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山羊PTHrP基因的克隆、原核表达和多克隆抗体制备

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第一章 文献综述第12-24页
   ·动物体内钙代谢研究进展第12-17页
     ·钙的生理功能第12页
     ·钙在动物机体内的代谢过程第12-13页
     ·影响钙代谢的主要因素第13-15页
     ·影响乳钙的因素第15页
     ·钙的跨膜转运过程第15-16页
     ·人体钙的缺乏及补充第16-17页
   ·PTHrP 研究进展第17-23页
     ·基本概况第17-18页
     ·生物学作用第18-21页
     ·作用机制第21页
     ·对乳钙沉积的影响第21-23页
   ·本研究的目的和意义第23-24页
第二章 山羊PTHrP 基因的cDNA 克隆及生物信息学分析第24-37页
   ·材料与方法第24-26页
     ·试验动物第24页
     ·菌株来源第24页
     ·主要试剂及试剂盒第24页
     ·主要仪器第24-25页
     ·主要试剂的配制及器具处理第25页
     ·引物设计第25-26页
   ·试验方法第26-30页
     ·山羊乳腺组织总RNA 的提取第26页
     ·cDNA 第一链的合成第26页
     ·PCR 反应扩增目的基因第26-27页
     ·目的片段的回收第27页
     ·克隆载体与目的片段连接第27-28页
     ·转化第28页
     ·质粒提取及酶切鉴定第28-29页
     ·生物信息学分析第29-30页
   ·实验结果第30-35页
     ·山羊乳腺组织总RNA 的提取第30页
     ·山羊PTHrP 基因的克隆及鉴定第30-31页
     ·山羊PTHrP 基因的测序及生物信息学分析第31-35页
   ·讨论第35-36页
   ·小结第36-37页
第三章 山羊PTHrP 基因在大肠杆菌中的融合表达第37-48页
   ·材料与方法第37-39页
     ·菌株和质粒来源第37页
     ·主要试剂及试剂盒第37-38页
     ·主要仪器第38页
     ·主要试剂的配制第38-39页
     ·引物设计第39页
   ·试验方法第39-43页
     ·原核表达载体的构建及鉴定第39-40页
     ·融合蛋白最佳表达条件的筛选第40-42页
     ·融合蛋白在E.coli BL21(DE3)中的分布第42页
     ·融合蛋白的纯化及鉴定第42-43页
   ·试验结果第43-46页
     ·原核表达载体的构建及鉴定第43页
     ·菌落PCR 鉴定第43-44页
     ·融合蛋白最优表达条件的筛选第44-45页
     ·融合蛋白在E.coli BL21(DE3)中的分布第45-46页
     ·融合蛋白的纯化第46页
   ·讨论第46-47页
   ·小结第47-48页
第四章 多克隆抗体制备及组织图谱分析第48-55页
   ·材料与方法第48-49页
     ·试验动物第48页
     ·主要试剂第48页
     ·主要仪器第48页
     ·主要试剂配制第48-49页
   ·试验方法第49-51页
     ·多克隆抗体的制备第49-50页
     ·ELISA 检测抗体效价第50页
     ·Western blot 检测抗血清的特异性第50-51页
     ·组织表达图谱分析第51页
   ·试验结果第51-52页
     ·多抗血清效价和特异性检测第51-52页
     ·组织表达图谱分析第52页
   ·讨论第52-54页
   ·小结第54-55页
第五章 总结第55-56页
参考文献第56-62页
附录第62-66页
缩略词表第66-68页
致谢第68-69页
作者简介第69页

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