摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-24页 |
·动物体内钙代谢研究进展 | 第12-17页 |
·钙的生理功能 | 第12页 |
·钙在动物机体内的代谢过程 | 第12-13页 |
·影响钙代谢的主要因素 | 第13-15页 |
·影响乳钙的因素 | 第15页 |
·钙的跨膜转运过程 | 第15-16页 |
·人体钙的缺乏及补充 | 第16-17页 |
·PTHrP 研究进展 | 第17-23页 |
·基本概况 | 第17-18页 |
·生物学作用 | 第18-21页 |
·作用机制 | 第21页 |
·对乳钙沉积的影响 | 第21-23页 |
·本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
第二章 山羊PTHrP 基因的cDNA 克隆及生物信息学分析 | 第24-37页 |
·材料与方法 | 第24-26页 |
·试验动物 | 第24页 |
·菌株来源 | 第24页 |
·主要试剂及试剂盒 | 第24页 |
·主要仪器 | 第24-25页 |
·主要试剂的配制及器具处理 | 第25页 |
·引物设计 | 第25-26页 |
·试验方法 | 第26-30页 |
·山羊乳腺组织总RNA 的提取 | 第26页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第26页 |
·PCR 反应扩增目的基因 | 第26-27页 |
·目的片段的回收 | 第27页 |
·克隆载体与目的片段连接 | 第27-28页 |
·转化 | 第28页 |
·质粒提取及酶切鉴定 | 第28-29页 |
·生物信息学分析 | 第29-30页 |
·实验结果 | 第30-35页 |
·山羊乳腺组织总RNA 的提取 | 第30页 |
·山羊PTHrP 基因的克隆及鉴定 | 第30-31页 |
·山羊PTHrP 基因的测序及生物信息学分析 | 第31-35页 |
·讨论 | 第35-36页 |
·小结 | 第36-37页 |
第三章 山羊PTHrP 基因在大肠杆菌中的融合表达 | 第37-48页 |
·材料与方法 | 第37-39页 |
·菌株和质粒来源 | 第37页 |
·主要试剂及试剂盒 | 第37-38页 |
·主要仪器 | 第38页 |
·主要试剂的配制 | 第38-39页 |
·引物设计 | 第39页 |
·试验方法 | 第39-43页 |
·原核表达载体的构建及鉴定 | 第39-40页 |
·融合蛋白最佳表达条件的筛选 | 第40-42页 |
·融合蛋白在E.coli BL21(DE3)中的分布 | 第42页 |
·融合蛋白的纯化及鉴定 | 第42-43页 |
·试验结果 | 第43-46页 |
·原核表达载体的构建及鉴定 | 第43页 |
·菌落PCR 鉴定 | 第43-44页 |
·融合蛋白最优表达条件的筛选 | 第44-45页 |
·融合蛋白在E.coli BL21(DE3)中的分布 | 第45-46页 |
·融合蛋白的纯化 | 第46页 |
·讨论 | 第46-47页 |
·小结 | 第47-48页 |
第四章 多克隆抗体制备及组织图谱分析 | 第48-55页 |
·材料与方法 | 第48-49页 |
·试验动物 | 第48页 |
·主要试剂 | 第48页 |
·主要仪器 | 第48页 |
·主要试剂配制 | 第48-49页 |
·试验方法 | 第49-51页 |
·多克隆抗体的制备 | 第49-50页 |
·ELISA 检测抗体效价 | 第50页 |
·Western blot 检测抗血清的特异性 | 第50-51页 |
·组织表达图谱分析 | 第51页 |
·试验结果 | 第51-52页 |
·多抗血清效价和特异性检测 | 第51-52页 |
·组织表达图谱分析 | 第52页 |
·讨论 | 第52-54页 |
·小结 | 第54-55页 |
第五章 总结 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
附录 | 第62-66页 |
缩略词表 | 第66-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
作者简介 | 第69页 |