| 中文摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 第一部分：灯盏花素对H_2O_2致人脐静脉内皮细胞损伤的的保护作用 | 第14-31页 |
| 1 实验材料 | 第14-15页 |
| 1.1 细胞株 | 第14页 |
| 1.2 主要仪器和设备 | 第14页 |
| 1.3 主要试剂 | 第14-15页 |
| 2 实验方法 | 第15-19页 |
| 2.1 HUVECs细胞培养 | 第15-17页 |
| 2.1.1 DMEM-F12完全培养液的配置 | 第15页 |
| 2.1.2 HUVECs的复苏 | 第15-16页 |
| 2.1.3 细胞换液 | 第16页 |
| 2.1.4 细胞传代 | 第16页 |
| 2.1.5 细胞计数 | 第16页 |
| 2.1.6 细胞冻存 | 第16-17页 |
| 2.2 MTT液的配制 | 第17页 |
| 2.3 MTT检测法 | 第17页 |
| 2.4 灯盏花素对HUVECs细胞存活率的影响（MTT法） | 第17页 |
| 2.5 H_2O_2体外诱导内皮细胞损伤的剂量关系（MTT法） | 第17-18页 |
| 2.6 H_2O_2损伤模型制作 | 第18页 |
| 2.7 实验分组 | 第18页 |
| 2.8 灯盏花素对H_2O_2损伤的HUVECs细胞形态的影响 | 第18页 |
| 2.9 灯盏花素对H_2O_2损伤的HUVECs细胞增殖的影响 | 第18页 |
| 2.10 HUVECs上清液中NO含量、GST活性的测定 | 第18-19页 |
| 2.11 HUVECs中SOD活性、MDA含量检测 | 第19页 |
| 2.12 统计分析 | 第19页 |
| 3 实验结果 | 第19-29页 |
| 3.1 灯盏花素对正常HUVECs细胞存活率的影响 | 第19-20页 |
| 3.2 H_2O_2体外诱导内皮细胞氧化应激损伤模型的构建 | 第20-21页 |
| 3.3 灯盏花素对H_2O_2处理的HUVECs细胞增殖的影响 | 第21-22页 |
| 3.4 灯盏花素花素对H_2O_2损伤的HUVECs细胞形态的影响 | 第22页 |
| 3.5 灯盏花素对H_2O_2处理的HUVECs细胞GST活性的影响 | 第22-24页 |
| 3.6 灯盏花素对H_2O_2处理的HUVECs细胞NO含量的影响 | 第24-26页 |
| 3.7 灯盏花素对H_2O_2处理的HUVECs细胞SOD活性的影响 | 第26-27页 |
| 3.8 灯盏花素对H_2O_2处理的HUVECs细胞MDA水平的影响 | 第27-29页 |
| 4 讨论 | 第29-30页 |
| 第一部分小结 | 第30-31页 |
| 第二部分：大鼠脑微血管内皮细胞的原代培养鉴定及OGD模型的建立 | 第31-41页 |
| 1 实验材料 | 第31-32页 |
| 1.1 实验动物 | 第31页 |
| 1.2 主要仪器和设备 | 第31页 |
| 1.3 主要试剂 | 第31-32页 |
| 2 实验方法 | 第32-35页 |
| 2.1 大鼠BMECs的分离提取 | 第32-33页 |
| 2.2 BMECs细胞培养 | 第33页 |
| 2.3 大鼠BMECs的鉴定 | 第33-34页 |
| 2.3.1 形态学 | 第33页 |
| 2.3.2 Ⅷ因子相关抗原免疫组化鉴定 | 第33-34页 |
| 2.3.3 BMECs 细胞生长曲线的绘制 | 第34页 |
| 2.4 OGD模型构建 | 第34-35页 |
| 2.4.1 OGD模型构建方法 | 第34-35页 |
| 2.4.2 OGD损伤时间的确定 | 第35页 |
| 2.5 统计分析 | 第35页 |
| 3. 实验结果 | 第35-39页 |
| 3.1 原代大鼠BMECs形态特征 | 第35-36页 |
| 3.2 Ⅷ因子相关抗原免疫组化鉴定 | 第36-37页 |
| 3.3 BMECs的生长曲线 | 第37页 |
| 3.4 OGD损伤时间的确定 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-40页 |
| 第二部分小结 | 第40-41页 |
| 第三部分 灯盏花素对大鼠脑微血管内皮细胞OGD损伤的保护作用及机制研究 | 第41-68页 |
| 1 实验材料 | 第41-42页 |
| 1.1 实验细胞 | 第41页 |
| 1.2 主要仪器和设备 | 第41页 |
| 1.3 主要试剂 | 第41-42页 |
| 2 实验方法 | 第42-47页 |
| 2.1 灯盏花素对BMECs细胞存活率的影响 | 第42页 |
| 2.2 灯盏花素对OGD损伤的BMECs细胞抑制率的影响 | 第42-43页 |
| 2.3 灯盏花素对OGD损伤的BMECs细胞CAT、NOS、XOD、SOD、LDH活性影响 | 第43页 |
| 2.4 Elisa法操作步骤 | 第43页 |
| 2.5 Elisa检测法数据处理 | 第43-44页 |
| 2.6 灯盏花素对OGD损伤的BMECs细胞TNF-α、IL-6 含量eNOS活性影响 | 第44页 |
| 2.7 灯盏花素对OGD损伤的BMECs细胞ET-1、IL-1β、PGI 2、INF-α 含量t-PA、PAI-1 活性影响 | 第44页 |
| 2.8 流式细胞技术检测细胞凋亡 | 第44-45页 |
| 2.9 RT-PCR法检测Bcl-2、Bax mRNA表达情况 | 第45-47页 |
| 2.10 统计分析 | 第47页 |
| 3 实验结果 | 第47-64页 |
| 3.0 灯盏花素对BMECs细胞存活率的影响 | 第47-48页 |
| 3.1 灯盏花素对OGD损伤的BMECs细胞抑制率的影响 | 第48页 |
| 3.2 Elisa检测法标准曲线 | 第48-52页 |
| 3.3 灯盏花素对OGD损伤的BMECs细胞NOS、eNOS活性影响 | 第52-53页 |
| 3.4 灯盏花素对OGD损伤的BMECs细胞CAT、XOD、SOD、LDH活性影响 | 第53-55页 |
| 3.5 灯盏花素对OGD损伤的BMECs细胞TNF-α、IL-6、IL-1β、INF-β 含量影响 | 第55-57页 |
| 3.6 灯盏花素对OGD损伤的BMECs细胞ET-1、PGI2含量影响 | 第57-58页 |
| 3.7 灯盏花素对OGD损伤的BMECs细胞t-PA、PAI-1 含量影响 | 第58-60页 |
| 3.8 灯盏花素对OGD损伤BMECs细胞凋亡率的影响 | 第60-62页 |
| 3.9 灯盏花素对OGD损伤BMECs细胞Bax、Bcl-2 mRNA表达情况 | 第62-64页 |
| 4 讨论 | 第64-67页 |
| 第三部分 小结 | 第67-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 缩略词表 | 第75-77页 |
| 综述 | 第77-87页 |
| 参考文献 | 第83-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 个人简历 | 第88-89页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第89页 |
