摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 前言 | 第10-17页 |
1.1 油棕介绍 | 第10页 |
1.2 油棕果实中油脂代谢的研究进展 | 第10-11页 |
1.2.1 油棕果实中油脂含量的种类及其动态变化 | 第10-11页 |
1.2.2 油棕果实中油脂代谢的研究进展 | 第11页 |
1.3 植物脂肪酸脱饱和酶基因的研究进展 | 第11-12页 |
1.4 植物组织特异性启动子的概况 | 第12-13页 |
1.4.1 植物组织特异性启动子的定义、特点及分类 | 第12-13页 |
1.5 植物组织特异性启动子的研究进展 | 第13-14页 |
1.5.1 根特异性启动子 | 第13页 |
1.5.2 叶片特异性启动子 | 第13页 |
1.5.3 花特异性启动子 | 第13-14页 |
1.5.4 种子特异性启动子 | 第14页 |
1.5.5 其他特异性启动子 | 第14页 |
1.6 研究的目的和意义 | 第14-16页 |
1.7 本研究的技术路线 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-29页 |
2.1 实验材料 | 第17-18页 |
2.1.1 植物材料 | 第17页 |
2.1.2 菌株 | 第17页 |
2.1.3 试剂 | 第17页 |
2.1.4 培养基 | 第17-18页 |
2.1.5 仪器 | 第18页 |
2.2 实验方法 | 第18-29页 |
2.2.1 油棕脱饱和酶基因(ω3、Δ6、Δ12启动子的克隆 | 第18-22页 |
2.2.2 启动子生物信息学分析 | 第22页 |
2.2.3 植物表达载体的构建 | 第22-24页 |
2.2.4 根癌农杆菌转化法侵染拟南芥 | 第24-25页 |
2.2.5 拟南芥抗性苗的筛选 | 第25-26页 |
2.2.6 转基因拟南芥植株的鉴定 | 第26页 |
2.2.7 转基因拟南芥植株的表达分析 | 第26-27页 |
2.2.8 启动子的功能验证 | 第27-29页 |
3 结果与分析 | 第29-59页 |
3.1 ω3、Δ6、Δ12启动子的克隆 | 第29-30页 |
3.1.1 PCR产物的检测 | 第29页 |
3.1.2 TA克隆菌落PCR的验证 | 第29-30页 |
3.2 ω3、Δ6、Δ12启动子序列的生物信息学分析 | 第30-36页 |
3.3 ω3、Δ6、Δ12启动子的植物表达载体的构建及农杆菌转化 | 第36-39页 |
3.3.1 ω3、Δ6、△12启动子的植物表达载体的构建 | 第36-38页 |
3.3.2 启动子转农杆菌的鉴定 | 第38-39页 |
3.4 拟南芥抗性苗的筛选及转基因拟南芥的鉴定 | 第39-42页 |
3.4.1 拟南芥抗性苗的筛选 | 第39-40页 |
3.4.2 转基因拟南芥的鉴定 | 第40-42页 |
3.5 转基因拟南芥的表达分析 | 第42-47页 |
3.5.1 转基因拟南芥的GUS组织染色分析 | 第42-45页 |
3.5.2 启动子在转基因拟南芥的GUS活性定量分析 | 第45页 |
3.5.3 启动子在拟南芥不同器官中的GUS活性定量分析 | 第45-47页 |
3.6 启动子的功能验证 | 第47-59页 |
3.6.1 光周期处理 | 第47-50页 |
3.6.2 脱落酸(ABA)的处理 | 第50-52页 |
3.6.3 茉莉酸甲酯反应(MeJA)的处理 | 第52-54页 |
3.6.4 低温的处理 | 第54-56页 |
3.6.5 乙烯利对ω3启动子的处理 | 第56-57页 |
3.6.6 水杨酸(SA)对ω3、Δ12启动子的处理 | 第57-59页 |
4 讨论 | 第59-64页 |
4.1 脱饱和酶基因启动子的克隆及生物信息学分析 | 第59-60页 |
4.2 植物表达载体的构建及GUS组织化学分析 | 第60页 |
4.3 启动子GUS活性定量分析 | 第60-61页 |
4.4 启动子的功能验证 | 第61-64页 |
5 结论 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-74页 |
附录 | 第74-80页 |
致谢 | 第80页 |