| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-19页 |
| 1.1 研究的目的和意义 | 第12-15页 |
| 1.1.1 NK细胞的功能 | 第12-13页 |
| 1.1.2 NK细胞受体的位置及分类 | 第13-14页 |
| 1.1.3 NK细胞受体结构与功能 | 第14-15页 |
| 1.2 鸡NK细胞 | 第15-19页 |
| 1.2.1 鸡NK细胞的鉴定 | 第15-16页 |
| 1.2.2 鸡NK细胞受体基因 | 第16-17页 |
| 1.2.3 鸡NK细胞受体 | 第17-19页 |
| 第二章 MHC单倍型BW/Gn鸡群的b-nk基因序列分析 | 第19-23页 |
| 2.1 材料 | 第19页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第19页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第19页 |
| 2.2 方法 | 第19-20页 |
| 2.2.1 b-nk基因序列分析 | 第19页 |
| 2.2.2 序列分析 | 第19-20页 |
| 2.3 结果 | 第20-21页 |
| 2.3.1 b-nk基因测序结果 | 第20页 |
| 2.3.2 b-nk氨基酸序列分析 | 第20-21页 |
| 2.4 讨论 | 第21-23页 |
| 第三章 B19单倍型鸡BNK单克隆抗体的制备 | 第23-30页 |
| 3.1 材料 | 第23页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第23页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第23页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第23页 |
| 3.2 方法 | 第23-27页 |
| 3.2.1 BNK19蛋白的纯化 | 第23-24页 |
| 3.2.2 动物免疫 | 第24页 |
| 3.2.3 间接ELISA方法的建立 | 第24页 |
| 3.2.4 细胞融合 | 第24-25页 |
| 3.2.5 间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞 | 第25页 |
| 3.2.6 杂交瘤细胞的亚克隆、冻存和复苏 | 第25-26页 |
| 3.2.7 杂交瘤细胞腹水的制备及纯化 | 第26页 |
| 3.2.8 单克隆抗体的亚型鉴定及腹水效价 | 第26页 |
| 3.2.9 单克隆抗体腹水的Western Blot检测 | 第26页 |
| 3.2.10 单抗表位的鉴定 | 第26-27页 |
| 3.3 结果 | 第27-29页 |
| 3.3.1 BNK19原核表达蛋白纯化结果 | 第27-28页 |
| 3.3.2 间接ELISA方法的建立 | 第28页 |
| 3.3.3 单抗亚型鉴定及腹水效价测定 | 第28页 |
| 3.3.4 腹水的Western blot检测 | 第28页 |
| 3.3.5 7A10单抗表位的初步鉴定 | 第28-29页 |
| 3.4 讨论 | 第29-30页 |
| 第四章 稳定表达B19单倍型鸡BNK蛋白的细胞系构建 | 第30-36页 |
| 4.1 材料 | 第30页 |
| 4.1.1 生物材料 | 第30页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第30页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第30页 |
| 4.2 方法 | 第30-32页 |
| 4.2.1 b-nk19基因的引物设计 | 第30页 |
| 4.2.2 b-nk19基因mRNA的提取及扩增 | 第30-31页 |
| 4.2.3 pIRES-BNK19真核表达载体的构建 | 第31页 |
| 4.2.4 pIRES-BNK19真核表达细胞系的建立 | 第31-32页 |
| 4.2.5 BNK19蛋白表达细胞系的RT-PCR鉴定 | 第32页 |
| 4.2.6 BNK19蛋白表达细胞系的IFA鉴定 | 第32页 |
| 4.2.7 BNK19蛋白表达细胞系的Western Bolt鉴定 | 第32页 |
| 4.2.8 CHO-BNK19稳定表达细胞系的建立 | 第32页 |
| 4.3 结果 | 第32-35页 |
| 4.3.1 pIRES-BNK19重组质粒的构建 | 第32-33页 |
| 4.3.2 表达BNK19蛋白瞬时细胞系的建立 | 第33页 |
| 4.3.3 细胞系的RT-PCR鉴定 | 第33-34页 |
| 4.3.4 IFA鉴定 | 第34页 |
| 4.3.5 Western Bolt鉴定 | 第34-35页 |
| 4.3.6 CHO-BNK19稳定表达细胞系的建立 | 第35页 |
| 4.4 讨论 | 第35-36页 |
| 第五章 鸡不同组织淋巴细胞中BNK蛋白的表达 | 第36-40页 |
| 5.1 材料 | 第36页 |
| 5.1.1 生物材料 | 第36页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第36页 |
| 5.1.3 主要仪器 | 第36页 |
| 5.2 方法 | 第36-37页 |
| 5.2.1 BNK蛋白在鸡胚脾脏淋巴细胞的表达 | 第36-37页 |
| 5.2.2 BNK蛋白在外周血淋巴细胞的表达 | 第37页 |
| 5.3 结果 | 第37-38页 |
| 5.3.1 BNK蛋白在鸡胚脾脏淋巴细胞中表达 | 第37-38页 |
| 5.3.2 BNK蛋白在外周血淋巴细胞中表达 | 第38页 |
| 5.4 讨论 | 第38-40页 |
| 第六章 全文结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 作者简历 | 第49页 |
