| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-18页 |
| 1.1 研究背景 | 第10-16页 |
| 1.1.1 B7-H3在肿瘤耐药中的研究进展 | 第10-12页 |
| 1.1.2 5-Fu的作用机制 | 第12-13页 |
| 1.1.3 BRCC3细胞生物学功能 | 第13-14页 |
| 1.1.4 核质转运在肿瘤治疗中的作用 | 第14-16页 |
| 1.2 研究基础 | 第16页 |
| 1.3 研究意义 | 第16-17页 |
| 1.4 课题研究内容 | 第17-18页 |
| 第二章 CRC细胞中B7-H3的表达对 5-Fu作用的影响 | 第18-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-20页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第18页 |
| 2.1.2 试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.3 仪器 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-23页 |
| 2.2.1 试剂配置 | 第20页 |
| 2.2.2 细胞的培养 | 第20-21页 |
| 2.2.3 克隆形成实验 | 第21-22页 |
| 2.2.4 药物的敏感性实验 | 第22页 |
| 2.2.5 彗星实验检测DNA损伤状况 | 第22-23页 |
| 2.2.6 数据处理 | 第23页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第23-25页 |
| 2.3.1 B7-H3高表达降低CRC细胞对 5-Fu的敏感性 | 第23-24页 |
| 2.3.2 克隆形成实验检测CRC细胞对 5-Fu的敏感性 | 第24页 |
| 2.3.3 B7-H3对细胞的DNA损伤及修复功能的影响 | 第24-25页 |
| 2.4 本章小结 | 第25-26页 |
| 第三章 CRC细胞中B7-H3与BRCC3关系的研究 | 第26-36页 |
| 3.1 实验材料 | 第26-28页 |
| 3.1.1 细胞株 | 第26页 |
| 3.1.2 试剂 | 第26-27页 |
| 3.1.3 仪器 | 第27-28页 |
| 3.2 实验方法 | 第28-32页 |
| 3.2.1 试剂配置 | 第28页 |
| 3.2.2 细胞培养 | 第28页 |
| 3.2.3 RNA提取 | 第28-29页 |
| 3.2.4 BRCC3逆转录反应 | 第29页 |
| 3.2.5 实时荧光定量PCR检测细胞中BRCC3的表达量 | 第29-30页 |
| 3.2.6 蛋白的提取 | 第30页 |
| 3.2.7 细胞核蛋白提取 | 第30-31页 |
| 3.2.8 BCA蛋白定量 | 第31页 |
| 3.2.9 蛋白免疫印迹检测 | 第31-32页 |
| 3.2.10 免疫荧光染色 | 第32页 |
| 3.2.11 激光共聚焦显微镜的使用 | 第32页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第32-35页 |
| 3.3.1 CRC细胞中BRCC3 mRNA的表达 | 第32-33页 |
| 3.3.2 B7-H3稳转CRC细胞株中BRCC3蛋白的表达 | 第33页 |
| 3.3.3 免疫荧光检测BRCC3的分布和表达 | 第33-34页 |
| 3.3.4 5-Fu处理后BRCC3核内表达的变化 | 第34-35页 |
| 3.4 本章小结 | 第35-36页 |
| 第四章 下调BRCC3后 5-Fu对B7-H3高表达CRC细胞的影响 | 第36-43页 |
| 4.1 实验材料 | 第36-38页 |
| 4.1.1 细胞株 | 第36页 |
| 4.1.2 试剂 | 第36-37页 |
| 4.1.3 仪器 | 第37-38页 |
| 4.2 实验方法 | 第38-39页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第38页 |
| 4.2.2 siRNA干扰实验 | 第38页 |
| 4.2.3 蛋白免疫印迹检测 | 第38页 |
| 4.2.4 免疫荧光染色 | 第38页 |
| 4.2.5 克隆形成实验 | 第38页 |
| 4.2.6 细胞周期检测 | 第38-39页 |
| 4.2.7 彗星实验检测DNA损伤状况 | 第39页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第39-42页 |
| 4.3.1 SW480-B7-H3敲减BRCC3后的表达情况 | 第39-40页 |
| 4.3.2 克隆形成检测BRCC3敲减后CRC细胞的耐药变化 | 第40-41页 |
| 4.3.3 BRCC3对于DNA损伤后细胞周期的影响 | 第41页 |
| 4.3.4 BRCC3敲减后SW480-B7-H3对 5-Fu所致的DNA损伤修复的变化 | 第41-42页 |
| 4.4 本章小结 | 第42-43页 |
| 第五章 总结与展望 | 第43-45页 |
| 5.1 主要结论 | 第43-44页 |
| 5.2 问题与展望 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 附录A： 彗星实验结果分析表 | 第50-52页 |
| 附录B： 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第52页 |
