摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第9-20页 |
1.1 烟草花叶病毒 | 第9-12页 |
1.1.1 TMV的生物学特性 | 第9-10页 |
1.1.2 TMV的防治 | 第10-12页 |
1.2 光合细菌 | 第12-17页 |
1.2.1 光合细菌生物学特性 | 第12-13页 |
1.2.2 光合细菌的应用 | 第13-17页 |
1.3 高氯酸溶性蛋白PSP的研究 | 第17-19页 |
1.4 研究的意义 | 第19-20页 |
第二章 Rhp-PSP基因的克隆与表达 | 第20-42页 |
2.1 材料 | 第20-21页 |
2.1.1 供试材料 | 第20-21页 |
2.2 试验方法 | 第21-33页 |
2.2.1 菌种活化培养 | 第21页 |
2.2.2 CTAB法提取菌液总DNA | 第21-22页 |
2.2.3 菌株16S rDNA序列的PCR扩增 | 第22-23页 |
2.2.4 PCR产物1%琼脂糖凝胶电泳检测 | 第23页 |
2.2.5 PCR产物的纯化回收 | 第23-25页 |
2.2.6 菌株DNA测序 | 第25页 |
2.2.7 DNA与T5载体的连接转化 | 第25-27页 |
2.2.8 Rhp-PSP的诱导表达 | 第27-29页 |
2.2.9 质粒的提取 | 第29-30页 |
2.2.10 目的基因的表达 | 第30-31页 |
2.2.11 蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第31-32页 |
2.2.12 重组蛋白与原蛋白的活性测定 | 第32-33页 |
2.3 结果分析 | 第33-38页 |
2.3.1 光合细菌PSB06菌液总DNA的提取 | 第33页 |
2.3.2 16S rDNA扩增的凝胶电泳检测分析 | 第33-34页 |
2.3.3 16S rDNA回收的电泳检测分析 | 第34页 |
2.3.4 Rhp-PSP序列的查找 | 第34页 |
2.3.5 Rhp-PSP序列的电泳检测分析 | 第34-35页 |
2.3.6 Rhp-PSP序列回收纯化的电泳检测分析 | 第35页 |
2.3.7 Rhp-PSP与T5载体的连接转化 | 第35-36页 |
2.3.8 Rhp-PSP序列与El载体的连接转化 | 第36-37页 |
2.3.9 Rhp-PSP的诱导表达 | 第37页 |
2.3.10 目的蛋白的活性测定 | 第37-38页 |
2.3.11 目的蛋白的质谱分析 | 第38页 |
2.4 讨论 | 第38-41页 |
2.5 结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-51页 |
附录1 试剂及培养基配制方法 | 第51-54页 |
附录2 常用试剂及仪器 | 第54-55页 |
致谢 | 第55页 |