摘要 | 第3-12页 |
ABSTRACT | 第12-21页 |
第一章 前言 | 第25-30页 |
第二章 材料与方法 | 第30-51页 |
1 材料 | 第30-36页 |
2 实验方法 | 第36-51页 |
2.1 试剂及溶液的配制 | 第36-41页 |
2.2 细胞的冻存、复苏及传代培养 | 第41页 |
2.3 IP,考染及LCMS检测与Ezrin相互作用的蛋白 | 第41-43页 |
2.4 IP,银染及LCMS检测与Ezrin相互作用的蛋白 | 第43页 |
2.5 WB检测蛋白表达 | 第43-44页 |
2.6 提取胞浆及胞核蛋白,Co-IP检测PPIs | 第44页 |
2.7 IF检测蛋白共定位 | 第44-45页 |
2.8 3×Flag-Ezrin-6×His质粒构建 | 第45-47页 |
2.9 DH5α感受态制备及热激转化3×Flag-Ezrin-6×His | 第47-48页 |
2.10 质粒提取,转染及Co-IP,IF检测PPIs及蛋白共定位 | 第48-49页 |
2.11 Transwell检测乳腺癌细胞的侵袭能力 | 第49-50页 |
2.12 CCK-8检测乳腺癌细胞的增殖能力 | 第50页 |
2.13 统计学方法 | 第50-51页 |
第三章 实验结果 | 第51-86页 |
1. 考马斯亮蓝染色显示IP富集Ezrin及其结合蛋白 | 第51-52页 |
2. 银氨染色显示IP富集Ezrin及其结合蛋白 | 第52-53页 |
3. 与Ezrin相互作用的蛋白 | 第53-56页 |
4. Ezrin/p65相互作用及共定位 | 第56-64页 |
5. Ezrin/Smad2相互作用及共定位 | 第64-72页 |
6. Ezrin/p65,Ezrin/Smad2相互作用促进乳腺癌细胞侵袭 | 第72-79页 |
6.1 Ezrin/p65,Ezrin/Smad2相互作用促进MDA-MB-231细胞侵袭 | 第72-76页 |
6.2 Ezrin/p65,Ezrin/Smad2促进MCF-7细胞侵袭 | 第76-79页 |
7. Ezrin/p65,Ezrin/Smad2相互作用对乳腺癌细胞增殖能力没有影响 | 第79-86页 |
7.1 Ezrin/p65相互作用对MDA-MB-231细胞增殖能力没有影响 | 第79-81页 |
7.2 Ezrin/Smad2相互作用对MDA-MB-231细胞增殖能力没有影响 | 第81-82页 |
7.3 Ezrin/p65相互作用对MCF-7细胞增殖没有影响 | 第82-84页 |
7.4 Ezrin/Smad2相互作用对MCF-7细胞增殖没有影响 | 第84-86页 |
第四章 讨论 | 第86-91页 |
全文主要结论 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-97页 |
缩略词表 | 第97-99页 |
成果 | 第99-100页 |
致谢 | 第100-101页 |