摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第11-28页 |
1.1 DNA聚合酶 | 第11-19页 |
1.1.1 DNA聚合酶的分类和结构 | 第11-19页 |
1.2 真核生物DNA聚合酶δ生物信息学及功能研究 | 第19-22页 |
1.2.1 真核生物DNA聚合酶δ功能研究 | 第19-20页 |
1.2.2 真核生物DNA聚合酶δ生物信息学研究 | 第20-21页 |
1.2.3 家蚕DNA聚合酶δ研究进展 | 第21-22页 |
1.3 杆状病毒表达系统研究进展 | 第22-26页 |
1.3.1 第一代MultiBac杆状病毒表达系统 | 第22-23页 |
1.3.2 第二代MultiBac杆状病毒表达系统 | 第23-24页 |
1.3.3 EMBacY杆状病毒表达系统 | 第24-25页 |
1.3.4 Polyprotein杆状病毒表达系统 | 第25-26页 |
1.4 立题背景和研究内容 | 第26-27页 |
1.4.1 立题背景 | 第26页 |
1.4.2 研究内容 | 第26-27页 |
1.5 技术路线 | 第27-28页 |
第二章 材料与方法 | 第28-35页 |
2.1 实验材料 | 第28-34页 |
2.1.1 载体质粒、菌种、细胞、家蚕 | 第28页 |
2.1.2 培养基 | 第28-29页 |
2.1.3 常用试剂及配制方法 | 第29-34页 |
2.2 设备仪器 | 第34-35页 |
第三章 家蚕DNA聚合酶δ复合物生物信息学分析 | 第35-41页 |
3.1 软件及分析方法 | 第35-36页 |
3.1.1 结构域分析 | 第35页 |
3.1.2 系统发生树分析 | 第35-36页 |
3.2 结果与讨论 | 第36-40页 |
3.2.1 亚基结构域分析 | 第36-38页 |
3.2.2 系统发生树 | 第38-40页 |
3.3 小结 | 第40-41页 |
第四章 家蚕DNA聚合酶δ复合物表达检测 | 第41-58页 |
4.1 材料和方法 | 第41-51页 |
4.1.1 家蚕血淋巴总RNA提取 | 第41页 |
4.1.2 CaCl2法制备大肠杆菌DH5α及DH10Multi Bac感受态细胞 | 第41-42页 |
4.1.3 感受态细胞转化 | 第42页 |
4.1.4 重组质粒及重组Bacmid Bmpol-1/2/3 杆状病毒载体构建 | 第42-50页 |
4.1.5 重组Bacmid Bmpol-1/2/3 杆状病毒制备 | 第50-51页 |
4.2 结果与讨论 | 第51-57页 |
4.2.1 重组质粒pFastBacHTb-Bmpol-1 构建 | 第51-52页 |
4.2.2 重组质粒pUCDM-Bmpol-2/3 构建 | 第52-53页 |
4.2.3 重组Bacmid Bmpol-1/2/3 杆状病毒制备 | 第53-56页 |
4.2.4 目的蛋白表达检测 | 第56-57页 |
4.3 小结 | 第57-58页 |
第五章 家蚕DNA聚合酶δ复合物酶学功能初步分析 | 第58-63页 |
5.1 材料和方法 | 第58-60页 |
5.1.1 材料 | 第58页 |
5.1.2 方法 | 第58-60页 |
5.2 结果与讨论 | 第60-62页 |
5.2.1 BmPOL-1 亚基酶活性测定 | 第60-61页 |
5.2.2 家蚕DNA聚合酶δ复合物酶活性测定 | 第61-62页 |
5.3 小结 | 第62-63页 |
第六章 家蚕DNA聚合酶δ复合物纯化及质谱鉴定 | 第63-68页 |
6.1 家蚕DNA聚合酶δ复合物大规模表达及纯化 | 第63-66页 |
6.2 家蚕DNA聚合酶δ复合物质谱鉴定 | 第66-67页 |
6.3 小结 | 第67-68页 |
总结与展望 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
硕士期间学术研究成果 | 第78页 |