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大豆虫害响应相关基因的功能分析

摘要第5-6页
abstract第6页
英文缩略表第10-11页
第一章 引言第11-23页
    1.1 植物抗虫防御机制第11-17页
        1.1.1 植物防御蛋白抗虫性研究第11-12页
        1.1.2 植物次生代谢物抗虫性研究第12-17页
            1.1.2.1 植物次生代谢物分类和抗虫作用第12-13页
            1.1.2.2 三萜类次生物质抗虫功能研究第13-14页
            1.1.2.3 植物甾醇和三萜皂苷的生物合成途径第14-15页
            1.1.2.4 植物甾醇与三萜类物质合成途径中的关键酶第15-17页
    1.2 植物防御相关的重要调控因子第17-20页
        1.2.1 植物MYB转录因子研究概述第17-20页
            1.2.1.1 植物中MYB类转录因子的结构特征与分类第17-18页
            1.2.1.2 MYB转录因子的生物学功能第18-19页
            1.2.1.3 植物中MYB-related类转录因子第19-20页
    1.3 大豆抗食叶性害虫育种研究概述第20-21页
        1.3.1 大豆食叶性害虫危害第20页
        1.3.2 大豆抗虫育种研究第20-21页
    1.4 本研究的目的与意义第21-22页
    1.5 实验方案和技术路线第22-23页
第二章 鲨烯单加氧酶基因及其下游的四个氧化鲨烯环化酶基因的功能验证第23-42页
    2.1 材料和方法第23-35页
        2.1.1 材料第23-24页
        2.1.2 植物培养和组织取样第24页
        2.1.3 植物RNA提取第24-25页
        2.1.4 cDNA模板的合成第25页
        2.1.5 过表达载体的构建第25-31页
            2.1.5.1 PCR扩增目的基因的CDS片段第25-26页
            2.1.5.2 Gateway克隆技术构建GsSQM1基因的过表达载体第26-29页
            2.1.5.3 酶切法构建AtCAS1,AtLAS1,AtLUP5,AtPEN3基因的过表达载体第29-31页
        2.1.6 农杆菌转化第31页
        2.1.7 拟南芥遗传转化、筛选及表达量鉴定第31-33页
        2.1.8 拟南芥植株的抗虫性鉴定方法摸索第33-34页
        2.1.9 转基因拟南芥植株的抗虫性鉴定第34-35页
    2.2 结果与分析第35-40页
        2.2.1 野生大豆鲨烯单加氧酶基因(GsSQM1)植物过表达载体的构建第35-36页
        2.2.2 转GsSQM1基因拟南芥纯合株系相对表达量检测和抗虫性鉴定第36-37页
        2.2.3 拟南芥四个氧化鲨烯环化酶基因克隆和植物表达载体构建第37-39页
        2.2.4 拟南芥四个氧化鲨烯环化酶基因过表达转基因拟南芥抗虫性鉴定第39-40页
    2.3 讨论和小结第40-42页
第三章 大豆GmMYB010基因与其拟南芥同源基因AtMYB010的功能差异分析第42-55页
    3.1 材料与方法第42-45页
        3.1.1 材料第42页
        3.1.2 生物信息学分析第42-43页
        3.1.3 基因克隆和序列分析第43页
        3.1.4 过表达载体构建、转化和转基因纯合体筛选第43页
        3.1.5 组织特异性表达分析第43-44页
        3.1.6 亚细胞定位第44页
        3.1.7 转录激活功能分析第44页
        3.1.8 过表达转基因拟南芥表型观察和鉴定第44页
        3.1.9 GmMYB010过表达转基因拟南芥抗虫性鉴定第44-45页
        3.1.10 独脚金内酯代谢通路相关基因与AtMYB010基因协同表达分析第45页
    3.2 结果与分析第45-53页
        3.2.1 GmMYB010基因的筛选和序列分析第45-47页
        3.2.2 GmMYB010与AtMYB010组织表达特性分析和基因克隆第47-48页
        3.2.3 GmMYB010与At MYB010的亚细胞定位分析第48页
        3.2.4 GmMYB010与At MYB010转录因子活性分析第48-50页
        3.2.5 GmMYB010与AtMYB010过表达植株表型观察比较第50-51页
        3.2.6 GmMYB010过表达转基因拟南芥抗虫性鉴定第51-52页
        3.2.7 AtMYB010基因过表达影响独脚金内酯代谢通路第52-53页
    3.3 讨论和小结第53-55页
第四章 全文结论第55-56页
参考文献第56-63页
附录第63-67页
致谢第67-68页
作者简历第68页

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