摘要 | 第5-6页 |
abstract | 第6页 |
英文缩略表 | 第10-11页 |
第一章 引言 | 第11-23页 |
1.1 植物抗虫防御机制 | 第11-17页 |
1.1.1 植物防御蛋白抗虫性研究 | 第11-12页 |
1.1.2 植物次生代谢物抗虫性研究 | 第12-17页 |
1.1.2.1 植物次生代谢物分类和抗虫作用 | 第12-13页 |
1.1.2.2 三萜类次生物质抗虫功能研究 | 第13-14页 |
1.1.2.3 植物甾醇和三萜皂苷的生物合成途径 | 第14-15页 |
1.1.2.4 植物甾醇与三萜类物质合成途径中的关键酶 | 第15-17页 |
1.2 植物防御相关的重要调控因子 | 第17-20页 |
1.2.1 植物MYB转录因子研究概述 | 第17-20页 |
1.2.1.1 植物中MYB类转录因子的结构特征与分类 | 第17-18页 |
1.2.1.2 MYB转录因子的生物学功能 | 第18-19页 |
1.2.1.3 植物中MYB-related类转录因子 | 第19-20页 |
1.3 大豆抗食叶性害虫育种研究概述 | 第20-21页 |
1.3.1 大豆食叶性害虫危害 | 第20页 |
1.3.2 大豆抗虫育种研究 | 第20-21页 |
1.4 本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
1.5 实验方案和技术路线 | 第22-23页 |
第二章 鲨烯单加氧酶基因及其下游的四个氧化鲨烯环化酶基因的功能验证 | 第23-42页 |
2.1 材料和方法 | 第23-35页 |
2.1.1 材料 | 第23-24页 |
2.1.2 植物培养和组织取样 | 第24页 |
2.1.3 植物RNA提取 | 第24-25页 |
2.1.4 cDNA模板的合成 | 第25页 |
2.1.5 过表达载体的构建 | 第25-31页 |
2.1.5.1 PCR扩增目的基因的CDS片段 | 第25-26页 |
2.1.5.2 Gateway克隆技术构建GsSQM1基因的过表达载体 | 第26-29页 |
2.1.5.3 酶切法构建AtCAS1,AtLAS1,AtLUP5,AtPEN3基因的过表达载体 | 第29-31页 |
2.1.6 农杆菌转化 | 第31页 |
2.1.7 拟南芥遗传转化、筛选及表达量鉴定 | 第31-33页 |
2.1.8 拟南芥植株的抗虫性鉴定方法摸索 | 第33-34页 |
2.1.9 转基因拟南芥植株的抗虫性鉴定 | 第34-35页 |
2.2 结果与分析 | 第35-40页 |
2.2.1 野生大豆鲨烯单加氧酶基因(GsSQM1)植物过表达载体的构建 | 第35-36页 |
2.2.2 转GsSQM1基因拟南芥纯合株系相对表达量检测和抗虫性鉴定 | 第36-37页 |
2.2.3 拟南芥四个氧化鲨烯环化酶基因克隆和植物表达载体构建 | 第37-39页 |
2.2.4 拟南芥四个氧化鲨烯环化酶基因过表达转基因拟南芥抗虫性鉴定 | 第39-40页 |
2.3 讨论和小结 | 第40-42页 |
第三章 大豆GmMYB010基因与其拟南芥同源基因AtMYB010的功能差异分析 | 第42-55页 |
3.1 材料与方法 | 第42-45页 |
3.1.1 材料 | 第42页 |
3.1.2 生物信息学分析 | 第42-43页 |
3.1.3 基因克隆和序列分析 | 第43页 |
3.1.4 过表达载体构建、转化和转基因纯合体筛选 | 第43页 |
3.1.5 组织特异性表达分析 | 第43-44页 |
3.1.6 亚细胞定位 | 第44页 |
3.1.7 转录激活功能分析 | 第44页 |
3.1.8 过表达转基因拟南芥表型观察和鉴定 | 第44页 |
3.1.9 GmMYB010过表达转基因拟南芥抗虫性鉴定 | 第44-45页 |
3.1.10 独脚金内酯代谢通路相关基因与AtMYB010基因协同表达分析 | 第45页 |
3.2 结果与分析 | 第45-53页 |
3.2.1 GmMYB010基因的筛选和序列分析 | 第45-47页 |
3.2.2 GmMYB010与AtMYB010组织表达特性分析和基因克隆 | 第47-48页 |
3.2.3 GmMYB010与At MYB010的亚细胞定位分析 | 第48页 |
3.2.4 GmMYB010与At MYB010转录因子活性分析 | 第48-50页 |
3.2.5 GmMYB010与AtMYB010过表达植株表型观察比较 | 第50-51页 |
3.2.6 GmMYB010过表达转基因拟南芥抗虫性鉴定 | 第51-52页 |
3.2.7 AtMYB010基因过表达影响独脚金内酯代谢通路 | 第52-53页 |
3.3 讨论和小结 | 第53-55页 |
第四章 全文结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
附录 | 第63-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
作者简历 | 第68页 |