摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
第一章 绪论 | 第14-32页 |
1.1 有机磷农药 | 第14-18页 |
1.1.1 丙溴磷 | 第15-18页 |
1.1.1.1 丙溴磷的胆碱能毒性 | 第15-16页 |
1.1.1.2 丙溴磷的非胆碱能毒性 | 第16-18页 |
1.2 胚胎发育 | 第18-23页 |
1.2.1 胚胎神经系统发育 | 第19-23页 |
1.2.1.1 胚胎神经管的形成 | 第20-22页 |
1.2.1.2 胚胎神经管的分化 | 第22页 |
1.2.1.3 放射状胶质细胞(神经干细胞) | 第22-23页 |
1.3 氧化应激 | 第23-25页 |
1.3.1 自由基 | 第23-24页 |
1.3.2 自由基对机体的损害机制 | 第24页 |
1.3.2.1 对生物膜的损害 | 第24页 |
1.3.2.2 使蛋白质变性和酶失活 | 第24页 |
1.3.2.3 攻击核酸分子 | 第24页 |
1.3.3 氧化应激生物标志物 | 第24-25页 |
1.4 基因表达 | 第25-27页 |
1.4.1 NTE | 第25-26页 |
1.4.2 PON1 | 第26-27页 |
1.5 本课题的研究内容 | 第27页 |
1.6 参考文献 | 第27-32页 |
第二章 丙溴磷对小鼠胚胎及放射状胶质细胞形态的影响 | 第32-52页 |
2.1 材料和方法 | 第32-42页 |
2.1.1 实验试剂 | 第32-33页 |
2.1.2 实验仪器 | 第33页 |
2.1.3 实验动物处理及分组 | 第33页 |
2.1.4 胚胎获取 | 第33页 |
2.1.5 胚胎形态观测 | 第33-34页 |
2.1.6 胚胎脑部区域组织切片标本制作 | 第34-42页 |
2.1.6.1 主要试剂配制 | 第34页 |
2.1.6.2 石蜡常规切片步骤 | 第34-38页 |
2.1.6.3 拍照分析 | 第38页 |
2.1.6.4 放射状胶质细胞体视学参数测量 | 第38-42页 |
2.1.7 数据统计分析 | 第42页 |
2.2 结果分析 | 第42-49页 |
2.2.1 孕鼠观察 | 第42页 |
2.2.2 胚胎整体观察 | 第42页 |
2.2.3 胚胎体重变化 | 第42-43页 |
2.2.4 胚胎身长变化 | 第43-44页 |
2.2.5 放射状胶质细胞(神经干细胞)形态观察 | 第44-46页 |
2.2.6 放射状胶质细胞体视学参数 | 第46-49页 |
2.3 讨论 | 第49-50页 |
2.4 参考文献 | 第50-52页 |
第三章 丙溴磷对胆碱酯酶与抗氧化酶的影响 | 第52-68页 |
3.1 材料和方法 | 第52-56页 |
3.1.1 实验试剂 | 第52-53页 |
3.1.2 实验仪器 | 第53页 |
3.1.3 主要试剂配制 | 第53-54页 |
3.1.4 胚胎蛋白提取 | 第54-55页 |
3.1.5 蛋白定量标准曲线制作 | 第55页 |
3.1.6 乙酰胆碱酯酶活性测定 | 第55页 |
3.1.7 丁酰胆碱酯酶活性测定 | 第55-56页 |
3.1.8 SOD活性测定 | 第56页 |
3.1.9 CAT活性测定 | 第56页 |
3.1.10 LDH活性测定 | 第56页 |
3.1.11 GSH总量测定 | 第56页 |
3.1.12 数据统计分析 | 第56页 |
3.2 结果分析 | 第56-63页 |
3.2.1 蛋白浓度标准曲线 | 第56-57页 |
3.2.2 胚胎头部蛋白浓度 | 第57-58页 |
3.2.3 AChE活性分析 | 第58页 |
3.2.4 BChE活性分析 | 第58-59页 |
3.2.5 SOD活性分析 | 第59-60页 |
3.2.6 CAT活性分析 | 第60-61页 |
3.2.7 LDH活性分析 | 第61-62页 |
3.2.8 GSH总量分析 | 第62-63页 |
3.3 讨论 | 第63-65页 |
3.4 参考文献 | 第65-68页 |
第四章 丙溴磷对NTE与PON1基因表达的研究 | 第68-86页 |
4.1 材料和方法 | 第68-74页 |
4.1.1 实验试剂 | 第68-69页 |
4.1.2 实验仪器 | 第69页 |
4.1.3 主要试剂配制 | 第69页 |
4.1.4 胚胎RNA提取 | 第69-70页 |
4.1.5 RNA完整性检测 | 第70-71页 |
4.1.6 cDNA链合成 | 第71-72页 |
4.1.7 引物设计与合成 | 第72页 |
4.1.8 Real Time PCR反应 | 第72-73页 |
4.1.9 相对定量 | 第73-74页 |
4.1.10 数据统计分析 | 第74页 |
4.2 结果分析 | 第74-83页 |
4.2.1 RNA完整性检测 | 第74页 |
4.2.2 PCR解离曲线 | 第74-78页 |
4.2.3 PCR扩增曲线 | 第78-82页 |
4.2.4 神经病靶标酯酶基因(NTE)相对表达量 | 第82页 |
4.2.5 血清对氧磷酶(PON1)基因相对表达量 | 第82-83页 |
4.3 讨论 | 第83-84页 |
4.4 参考文献 | 第84-86页 |
第五章 全文总结与展望 | 第86-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
硕士期间发表的论文 | 第89页 |