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药物中间体环氧化物的微生物法去消旋化的研究

学位论文数据集第4-5页
摘要第5-6页
ABSTRACT第6-7页
目录第8-12页
第一章 文献综述第12-24页
    1.1 手性化合物与手性技术第12-18页
        1.1.1 手性药物第12-13页
        1.1.2 手性化合物的常规制备方法第13-15页
            1.1.2.1 手性源第13页
            1.1.2.2 消旋体的物理与化学法拆分第13-14页
            1.1.2.3 不对称合成第14-15页
        1.1.3 生物催化不对称合成第15-18页
            1.1.3.1 生物催化第15-16页
            1.1.3.2 生物催化手性化合物拆分第16页
            1.1.3.3 用于选择性生物催化的微生物第16-17页
            1.1.3.4 生物催化不对称合成的展望第17-18页
    1.2 环氧化物水解酶第18-22页
        1.2.1 环氧化物水解酶作用机理第18-19页
        1.2.2 环氧化物水解酶的分布第19-20页
            1.2.2.1 哺乳动物来源环氧化物水解酶第19页
            1.2.2.2 微生物来源环氧化物水解酶第19-20页
        1.2.3 环氧化物水解酶的研究进展第20-22页
    1.3 课题研究意义及内容第22-24页
第二章 菌种初筛第24-31页
    2.1 引言第24页
    2.2 初筛方案的确定第24页
    2.3 材料与方法第24-27页
        2.3.1 试剂第24-25页
        2.3.2 主要仪器第25-26页
        2.3.3 培养基第26页
            2.3.3.1 筛选培养基第26页
            2.3.3.2 菌种保存培养基第26页
            2.3.3.3 发酵培养基第26页
        2.3.4 实验方法第26-27页
            2.3.4.1 土壤中菌株的筛选第26页
            2.3.4.2 菌株的培养第26页
            2.3.4.3 完整细胞转化苯基环氧乙烷第26-27页
            2.3.4.4 变色酸显色法测定转化率第27页
    2.4 结果与讨论第27-30页
        2.4.1 土壤中菌株的筛选第27-28页
        2.4.2 苯乙二醇标准曲线的绘制第28页
        2.4.3 菌株完整细胞转化苯基环氧乙烷结果第28-30页
    2.5 小结第30-31页
第三章 菌种复筛第31-42页
    3.1 引言第31页
    3.2 材料与方法第31-37页
        3.2.1 试剂第31-32页
        3.2.2 主要仪器第32-33页
        3.2.3 培养基第33页
            3.2.3.1 菌种保存培养基第33页
            3.2.3.2 发酵培养基第33页
        3.2.4 实验方法第33-37页
            3.2.4.1 菌株的液体培养与预处理第33页
            3.2.4.2 菌株完整细胞转化苯基环氧乙烷第33页
            3.2.4.3 检测波长的确定第33-34页
            3.2.4.4 HPLC法测定转化率第34页
            3.2.4.5 手性HPLC测定e.e值第34-35页
            3.2.4.6 菌株的鉴定第35-37页
    3.3 结果与讨论第37-41页
        3.3.1 HPLC法确定各筛选出的菌株的转化率第37-38页
        3.3.2 菌株的选定第38-39页
        3.3.3 菌株G7的鉴定第39-41页
            3.3.3.1 菌株G7 16S rDNA的提取、扩增第39-40页
            3.3.3.2 菌株G7 16S rDNA的序列比对结果第40-41页
    3.4 小结第41-42页
第四章 菌株G7的发酵条件研究第42-51页
    4.1 引言第42页
    4.2 材料与方法第42-45页
        4.2.1 试剂第42-43页
        4.2.2 主要仪器第43-44页
        4.2.3 培养基第44页
            4.2.3.1 菌种保存培养基第44页
            4.2.3.2 发酵培养基第44页
        4.2.4 实验方法第44-45页
            4.2.4.1 菌株G7的液体培养与预处理第44页
            4.2.4.2 菌株完整细胞转化与酶活力的测定第44-45页
    4.3 结果与讨论第45-50页
        4.3.1 碳源对菌株G7环氧化物水解酶活力的影响第45页
        4.3.2 氮源对菌株G7环氧化物水解酶活力的影响第45-46页
        4.3.3 蔗糖浓度对菌株G7环氧化物水解酶活力的影响第46-47页
        4.3.4 胰蛋白胨浓度对菌株G7环氧化物水解酶活力的影响第47页
        4.3.5 无机金属离子对菌株G7环氧化物水解酶活力的影响第47-48页
        4.3.6 初始pH值对菌株G7环氧化物水解酶活力的影响第48页
        4.3.7 培养温度对菌株G7环氧化物水解酶活力的影响第48-49页
        4.3.8 培养时间对菌株G7环氧化物水解酶活力的影响第49-50页
    4.4 小结第50-51页
第五章 菌株G7转化苯基环氧乙烷条件的研究第51-57页
    5.1 引言第51页
    5.2 材料与方法第51-53页
        5.2.1 试剂第51-52页
        5.2.2 主要仪器第52页
        5.2.3 培养基第52-53页
            5.2.3.1 菌种保存培养基第52页
            5.2.3.2 发酵培养基第52-53页
        5.2.4 实验方法第53页
            5.2.4.1 菌株G7的液体培养与预处理第53页
            5.2.4.2 菌株G7完整细胞转化第53页
            5.2.4.3 HPLC法测定底物转化率与转化产物e.e值第53页
    5.3 结果与讨论第53-56页
        5.3.1 底物浓度对转化的影响第53-54页
        5.3.2 缓冲液pH值对转化的影响第54-55页
        5.3.3 温度对转化的影响第55页
        5.3.4 时间对转化的影响第55-56页
    5.4 小结第56-57页
第六章 结论第57-58页
参考文献第58-62页
附录第62-66页
致谢第66-68页
研究成果及发表的学术论文第68-70页
作者和导师简介第70-71页
附件第71-72页

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