学位论文数据集 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
目录 | 第8-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-24页 |
1.1 手性化合物与手性技术 | 第12-18页 |
1.1.1 手性药物 | 第12-13页 |
1.1.2 手性化合物的常规制备方法 | 第13-15页 |
1.1.2.1 手性源 | 第13页 |
1.1.2.2 消旋体的物理与化学法拆分 | 第13-14页 |
1.1.2.3 不对称合成 | 第14-15页 |
1.1.3 生物催化不对称合成 | 第15-18页 |
1.1.3.1 生物催化 | 第15-16页 |
1.1.3.2 生物催化手性化合物拆分 | 第16页 |
1.1.3.3 用于选择性生物催化的微生物 | 第16-17页 |
1.1.3.4 生物催化不对称合成的展望 | 第17-18页 |
1.2 环氧化物水解酶 | 第18-22页 |
1.2.1 环氧化物水解酶作用机理 | 第18-19页 |
1.2.2 环氧化物水解酶的分布 | 第19-20页 |
1.2.2.1 哺乳动物来源环氧化物水解酶 | 第19页 |
1.2.2.2 微生物来源环氧化物水解酶 | 第19-20页 |
1.2.3 环氧化物水解酶的研究进展 | 第20-22页 |
1.3 课题研究意义及内容 | 第22-24页 |
第二章 菌种初筛 | 第24-31页 |
2.1 引言 | 第24页 |
2.2 初筛方案的确定 | 第24页 |
2.3 材料与方法 | 第24-27页 |
2.3.1 试剂 | 第24-25页 |
2.3.2 主要仪器 | 第25-26页 |
2.3.3 培养基 | 第26页 |
2.3.3.1 筛选培养基 | 第26页 |
2.3.3.2 菌种保存培养基 | 第26页 |
2.3.3.3 发酵培养基 | 第26页 |
2.3.4 实验方法 | 第26-27页 |
2.3.4.1 土壤中菌株的筛选 | 第26页 |
2.3.4.2 菌株的培养 | 第26页 |
2.3.4.3 完整细胞转化苯基环氧乙烷 | 第26-27页 |
2.3.4.4 变色酸显色法测定转化率 | 第27页 |
2.4 结果与讨论 | 第27-30页 |
2.4.1 土壤中菌株的筛选 | 第27-28页 |
2.4.2 苯乙二醇标准曲线的绘制 | 第28页 |
2.4.3 菌株完整细胞转化苯基环氧乙烷结果 | 第28-30页 |
2.5 小结 | 第30-31页 |
第三章 菌种复筛 | 第31-42页 |
3.1 引言 | 第31页 |
3.2 材料与方法 | 第31-37页 |
3.2.1 试剂 | 第31-32页 |
3.2.2 主要仪器 | 第32-33页 |
3.2.3 培养基 | 第33页 |
3.2.3.1 菌种保存培养基 | 第33页 |
3.2.3.2 发酵培养基 | 第33页 |
3.2.4 实验方法 | 第33-37页 |
3.2.4.1 菌株的液体培养与预处理 | 第33页 |
3.2.4.2 菌株完整细胞转化苯基环氧乙烷 | 第33页 |
3.2.4.3 检测波长的确定 | 第33-34页 |
3.2.4.4 HPLC法测定转化率 | 第34页 |
3.2.4.5 手性HPLC测定e.e值 | 第34-35页 |
3.2.4.6 菌株的鉴定 | 第35-37页 |
3.3 结果与讨论 | 第37-41页 |
3.3.1 HPLC法确定各筛选出的菌株的转化率 | 第37-38页 |
3.3.2 菌株的选定 | 第38-39页 |
3.3.3 菌株G7的鉴定 | 第39-41页 |
3.3.3.1 菌株G7 16S rDNA的提取、扩增 | 第39-40页 |
3.3.3.2 菌株G7 16S rDNA的序列比对结果 | 第40-41页 |
3.4 小结 | 第41-42页 |
第四章 菌株G7的发酵条件研究 | 第42-51页 |
4.1 引言 | 第42页 |
4.2 材料与方法 | 第42-45页 |
4.2.1 试剂 | 第42-43页 |
4.2.2 主要仪器 | 第43-44页 |
4.2.3 培养基 | 第44页 |
4.2.3.1 菌种保存培养基 | 第44页 |
4.2.3.2 发酵培养基 | 第44页 |
4.2.4 实验方法 | 第44-45页 |
4.2.4.1 菌株G7的液体培养与预处理 | 第44页 |
4.2.4.2 菌株完整细胞转化与酶活力的测定 | 第44-45页 |
4.3 结果与讨论 | 第45-50页 |
4.3.1 碳源对菌株G7环氧化物水解酶活力的影响 | 第45页 |
4.3.2 氮源对菌株G7环氧化物水解酶活力的影响 | 第45-46页 |
4.3.3 蔗糖浓度对菌株G7环氧化物水解酶活力的影响 | 第46-47页 |
4.3.4 胰蛋白胨浓度对菌株G7环氧化物水解酶活力的影响 | 第47页 |
4.3.5 无机金属离子对菌株G7环氧化物水解酶活力的影响 | 第47-48页 |
4.3.6 初始pH值对菌株G7环氧化物水解酶活力的影响 | 第48页 |
4.3.7 培养温度对菌株G7环氧化物水解酶活力的影响 | 第48-49页 |
4.3.8 培养时间对菌株G7环氧化物水解酶活力的影响 | 第49-50页 |
4.4 小结 | 第50-51页 |
第五章 菌株G7转化苯基环氧乙烷条件的研究 | 第51-57页 |
5.1 引言 | 第51页 |
5.2 材料与方法 | 第51-53页 |
5.2.1 试剂 | 第51-52页 |
5.2.2 主要仪器 | 第52页 |
5.2.3 培养基 | 第52-53页 |
5.2.3.1 菌种保存培养基 | 第52页 |
5.2.3.2 发酵培养基 | 第52-53页 |
5.2.4 实验方法 | 第53页 |
5.2.4.1 菌株G7的液体培养与预处理 | 第53页 |
5.2.4.2 菌株G7完整细胞转化 | 第53页 |
5.2.4.3 HPLC法测定底物转化率与转化产物e.e值 | 第53页 |
5.3 结果与讨论 | 第53-56页 |
5.3.1 底物浓度对转化的影响 | 第53-54页 |
5.3.2 缓冲液pH值对转化的影响 | 第54-55页 |
5.3.3 温度对转化的影响 | 第55页 |
5.3.4 时间对转化的影响 | 第55-56页 |
5.4 小结 | 第56-57页 |
第六章 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-62页 |
附录 | 第62-66页 |
致谢 | 第66-68页 |
研究成果及发表的学术论文 | 第68-70页 |
作者和导师简介 | 第70-71页 |
附件 | 第71-72页 |