| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 缩略语 | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-25页 |
| 1.1.细菌抗汞特性研究现状 | 第10-14页 |
| 1.1.1 细菌抗汞特性研究现状 | 第10-11页 |
| 1.1.2 细菌抗汞机理 | 第11-14页 |
| 1.1.2.1 细菌抗汞所涉及的基因结构元件 | 第11-12页 |
| 1.1.2.2 细菌抗汞过程中汞的转运与降解 | 第12-14页 |
| 1.2 生物冶金技术 | 第14-17页 |
| 1.2.1 生物冶金技术简介 | 第14-16页 |
| 1.2.2 生物治金中的浸矿微生物 | 第16-17页 |
| 1.3 喜温硫杆菌的研究进展 | 第17-24页 |
| 1.3.1 喜温硫杆菌的分离及其特性 | 第17-18页 |
| 1.3.2 喜温硫杆菌在浸矿过程中的作用机制 | 第18-20页 |
| 1.3.3 喜温硫杆菌基因方面的研究 | 第20-21页 |
| 1.3.4 喜温硫杆菌遗传系统及遗传改造方面的研究 | 第21-24页 |
| 1.4 本论文的研究意义及内容 | 第24-25页 |
| 第二章 抗汞质粒载体的构建 | 第25-38页 |
| 2.1 引言 | 第25-26页 |
| 2.2 材料与方法 | 第26-29页 |
| 2.2.1 菌株与质粒 | 第26页 |
| 2.2.2 培养基和培养条件 | 第26页 |
| 2.2.2.1 LB培养基 | 第26页 |
| 2.2.2.2 麦康凯培养基 | 第26页 |
| 2.2.3.抗生素使用浓度 | 第26-27页 |
| 2.2.4.DNA操作技术 | 第27-29页 |
| 2.2.4.1 质粒DNA的提取 | 第27页 |
| 2.2.4.2琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
| 2.2.4.3 DNA浓度、纯度和DNA分子量的测定 | 第27-28页 |
| 2.2.4.4 限制性核酸内切酶酶切 | 第28页 |
| 2.2.4.5 琼脂糖凝胶中DNA片段的回收 | 第28页 |
| 2.2.4.6 连接 | 第28页 |
| 2.2.4.7 质粒DNA的转化 | 第28-29页 |
| 2.2.4.8 PCR技术 | 第29页 |
| 2.2.5 菌种保藏 | 第29页 |
| 2.2 实验结果 | 第29-38页 |
| 2.2.1 组成型抗汞质粒载体pTMJ212的构建 | 第29-32页 |
| 2.2.2 可调节型抗汞质粒载体pTMJ213的构建 | 第32-35页 |
| 2.2.2.1 merRTPA基因的克隆 | 第32-33页 |
| 2.2.2.2 可调节型抗汞质粒载体pTMJ213的构建 | 第33-35页 |
| 2.2.3 重组质粒pTMJ213与pTMJ212的抗汞基因在大肠杆菌中的表达 | 第35-38页 |
| 第三章 抗汞质粒在喜温硫杆菌中的表达研究 | 第38-51页 |
| 3.1 引言 | 第38-39页 |
| 3.2.材料和方法 | 第39-44页 |
| 3.2.1 菌株和质粒 | 第39页 |
| 3.2.2 培养基和培养条件 | 第39-40页 |
| 3.2.2.1 大肠杆菌 | 第39页 |
| 3.2.2.2 喜温硫杆菌 | 第39-40页 |
| 3.2.2.3 大肠杆菌—氧化硫硫杆菌接合培养基及菌体洗涤液 | 第40页 |
| 3.2.3 抗生素使用浓度 | 第40页 |
| 3.2.4 大肠杆菌和喜温硫杆菌的接合转移 | 第40-41页 |
| 3.2.4.1 供体菌及受体菌的准备 | 第40页 |
| 3.2.4.2 大肠杆菌与喜温硫杆菌的接合 | 第40-41页 |
| 3.2.4.3 接合转移子的鉴定 | 第41页 |
| 3.2.4.4提取质粒鉴定 | 第41页 |
| 3.2.2.5反向接合转移 | 第41页 |
| 3.2.5 质粒稳定性测定 | 第41页 |
| 3.2.6 DNA操作技术 | 第41-42页 |
| 3.2.6.1 质粒DNA的提取 | 第41-42页 |
| 3.2.6.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第42页 |
| 3.2.6.3 限制性核酸内切酶酶切 | 第42页 |
| 3.2.6.4 质粒DNA的转化 | 第42页 |
| 3.2.7 细胞总蛋白含量测定 | 第42-43页 |
| 3.2.7.1 标准曲线的绘制 | 第42-43页 |
| 3.2.7.2 细胞总蛋白含量测定(考马斯亮蓝染色法) | 第43页 |
| 3.2.8 重组菌抗汞性能检测 | 第43-44页 |
| 3.2.9 菌种保藏 | 第44页 |
| 3.2.9.1 大肠杆菌的保藏 | 第44页 |
| 3.2.9.2 喜温硫杆菌的保藏 | 第44页 |
| 3.3 实验结果 | 第44-49页 |
| 3.3.1 抗汞质粒pTMJ212从大肠杆菌到喜温硫杆菌中的接合转移 | 第44-45页 |
| 3.3.2 抗汞质粒pTMJ212从喜温硫杆菌向大肠杆菌的反向接合 | 第45-46页 |
| 3.3.3 抗汞质粒pTMJ212在喜温硫杆菌中稳定性测定 | 第46页 |
| 3.3.4 抗汞质粒pTMJ212在喜温硫杆菌中的表达及抗汞能力测定 | 第46-49页 |
| 3.4 讨论 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 攻读学位期间发表论文目录 | 第58-59页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第59页 |
