| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第10-14页 |
| 1.1 引言 | 第10-11页 |
| 1.2 技术路线 | 第11-14页 |
| 1.2.1 构建HUVECs氧化应激模型 | 第11-12页 |
| 1.2.2 构建Mipu1干扰/过表达模型 | 第12-14页 |
| 第2章 实验材料 | 第14-18页 |
| 2.1 细胞株 | 第14页 |
| 2.2 主要试剂 | 第14-15页 |
| 2.3 主要仪器 | 第15-16页 |
| 2.4 数据分析 | 第16-18页 |
| 第3章 实验方法 | 第18-30页 |
| 3.1 细胞培养 | 第18-19页 |
| 3.1.1 细胞复苏 | 第18页 |
| 3.1.2 细胞传代 | 第18-19页 |
| 3.1.3 细胞培养 | 第19页 |
| 3.2 Mipu1表达和干扰质粒的转化、扩增 | 第19-23页 |
| 3.2.1 配制溶液 | 第19页 |
| 3.2.2 培养受体菌 | 第19-20页 |
| 3.2.3 制备感受态（CaCl_2法） | 第20页 |
| 3.2.4 质粒转化 | 第20页 |
| 3.2.5 质粒提取 | 第20-23页 |
| 3.2.6 测定质粒DNA浓度 | 第23页 |
| 3.3 细胞转染 | 第23-24页 |
| 3.4 Western Blot检测 | 第24-26页 |
| 3.4.1 蛋白提取 | 第24页 |
| 3.4.2 蛋白定量 | 第24-25页 |
| 3.4.3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第25-26页 |
| 3.5 免疫荧光检测 | 第26-27页 |
| 3.6 实验分组 | 第27-30页 |
| 第4章 实验结果 | 第30-38页 |
| 4.1 H_2O_2处理HUVECs对p62，Beclin-1，LC3和Mipu1表达的影响 | 第30-32页 |
| 4.1.1 不同浓度的H_2O_2处理HUVECs对p62，Beclin-1，LC3和Mipu1表达的影响 | 第30-31页 |
| 4.1.2 H_2O_2处理HUVECs不同时间对p62，Beclin-1，LC3和Mipu1表达的影响 | 第31-32页 |
| 4.2 Mipu1表达质粒对HUVECs的转染效率 | 第32-33页 |
| 4.3 Mipu1对H_2O_2处理的HUVECs自噬的影响 | 第33-35页 |
| 4.3.1 过表达Mipu1对H_2O_2处理的HUVECs自噬的影响 | 第33-34页 |
| 4.3.2 干扰Mipu1对H_2O_2处理的HUVECs自噬的影响 | 第34-35页 |
| 4.4 表达/干扰Mipu1质粒对LC3点聚集的影响 | 第35-37页 |
| 4.4.1 转染Mipu1干扰质粒对Mipu1表达的影响 | 第35页 |
| 4.4.2 转染Mipu1表达质粒对Mipu1表达的影响 | 第35页 |
| 4.4.3 干扰Mipu1质粒对LC3点聚集的影响 | 第35-36页 |
| 4.4.4 过表达Mipu1对LC3点聚集的影响 | 第36-37页 |
| 4.5 Mpiu1表达/干扰质粒和GFP-LC3质粒共转染对LC3的影响 | 第37-38页 |
| 第5章 讨论 | 第38-40页 |
| 第6章 结论 | 第40-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 文献综述 | 第46-59页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 攻读学位期间的科研成果 | 第59-61页 |
| 课题资助情况 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
