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氨基糖苷类耐药基因armA实时荧光PCR检测方法的建立、应用及NDM-5阳性大肠埃希菌的特征研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
前言第11-13页
第1章 氨基糖苷类耐药基因armA荧光PCR检测方法的建立第13-27页
    1.1 试验材料第13-15页
        1.1.1 试验菌株第13-14页
        1.1.2 试验试剂和仪器第14-15页
    1.2 试验方法第15-23页
        1.2.1 细菌基因组DNA的提取第15-16页
        1.2.2 粪便样品中细菌基因组DNA提取第16-17页
        1.2.3 含armA重组质粒的制备第17-22页
        1.2.4 质粒拷贝数的计算第22页
        1.2.5 反应体系及条件第22页
        1.2.6 特异性评价第22页
        1.2.7 标准曲线的制备第22-23页
        1.2.8 粪便模拟标本的制备及检测第23页
    1.3 结果分析第23-25页
        1.3.1 引物和探针特异性的确定第23-24页
        1.3.2 标准曲线的绘制及灵敏度评价第24-25页
        1.3.3 粪便模拟标本的检测结果第25页
    1.4 讨论第25-27页
第2章 不同来源的革兰氏阴性菌中armA基因的分布及其基因与药敏表型的关系第27-37页
    2.1 试验材料第27页
        2.1.1 试验菌株第27页
        2.1.2 试验试剂和仪器第27页
    2.2 试验方法第27-29页
        2.2.1 菌种鉴定第27-28页
        2.2.2 荧光定量PCR方法检测分离菌株第28页
        2.2.3 药敏试验第28-29页
    2.3 结果分析第29-34页
        2.3.1 菌株基本情况第29-30页
        2.3.2 临床来源菌株氨基糖苷类药敏情况第30页
        2.3.3 临床来源菌株armA基因携带情况第30-31页
        2.3.4 临床来源菌株armA基因与药敏表型之间的关系第31-32页
        2.3.5 不同来源克雷伯菌属的比较第32-34页
    2.4 讨论第34-37页
        2.4.1 不同来源菌株对氨基糖苷类药物耐药现状第34-35页
        2.4.2 氨基糖苷类耐药基因armA的检测第35-36页
        2.4.3 菌株armA基因携带与氨基糖苷类耐药表型的关系第36-37页
第3章 NDM-5阳性大肠埃希菌的特征研究第37-50页
    3.1 试验材料第37-38页
        3.1.1 试验菌株第37页
        3.1.2 试验试剂和仪器第37-38页
    3.2 试验方法第38-43页
        3.2.1 接合转移实验第38页
        3.2.2 脉冲场凝胶电泳(PFGE)第38-41页
        3.2.3 Southern杂交第41-43页
    3.3 结果分析第43-48页
        3.3.1 4株菌株临床背景信息第43-45页
        3.3.2 药敏实验结果第45页
        3.3.3 菌株特征分析第45-46页
        3.3.4 PFGE和Southern杂交结果第46-47页
        3.3.5 接合转移实验第47-48页
    3.4 讨论第48-50页
第4章 结论第50-51页
参考文献第51-54页
综述第54-62页
    参考文献第58-62页
致谢第62页

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