| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 前言 | 第13-34页 |
| 1.1 禾谷镰刀菌 | 第13-20页 |
| 1.1.1 禾谷镰刀菌的危害 | 第13-14页 |
| 1.1.2 禾谷镰刀菌的生物学特性 | 第14-15页 |
| 1.1.3 禾谷镰刀菌的侵染循环 | 第15-16页 |
| 1.1.4 禾谷镰刀菌保守信号通路研究进展 | 第16-19页 |
| 1.1.5 禾谷镰刀菌组学的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.2 禾谷镰刀菌的有性生殖 | 第20-26页 |
| 1.2.1 有性生殖的重要性 | 第20页 |
| 1.2.2 有性生殖过程 | 第20-22页 |
| 1.2.3 禾谷镰刀菌有性时期RNA编辑 | 第22-23页 |
| 1.2.4 有性生殖相关的调控网络 | 第23-26页 |
| 1.3 G蛋白偶联受体（G protein-coupled receptors, GPCRs） | 第26-31页 |
| 1.3.1 GPCRs及其介导的信号转导过程 | 第26-28页 |
| 1.3.2 GPCRs结构特点的研究 | 第28-29页 |
| 1.3.2.1 GPCRs N末端与信号识别 | 第28页 |
| 1.3.2.2 GPCRs介导的信号通路特点 | 第28-29页 |
| 1.3.3 G蛋白偶联受体与真菌 | 第29-31页 |
| 1.4 禾谷镰刀菌中GPCRs研究的现实意义 | 第31-34页 |
| 第二章 实验材料与步骤 | 第34-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第34-36页 |
| 2.1.1 质粒载体 | 第34页 |
| 2.1.2 实验用菌株 | 第34-35页 |
| 2.1.3 供试植物 | 第35页 |
| 2.1.4 试剂 | 第35-36页 |
| 2.1.5 试剂配方 | 第36页 |
| 2.1.6 实验用仪器 | 第36页 |
| 2.1.7 主要软件工具及数据库 | 第36页 |
| 2.2 实验步骤 | 第36-37页 |
| 第三章 禾谷镰刀菌GPCRs基因的预测及功能分析 | 第37-51页 |
| 3.1 禾谷镰刀菌中GPCRs基因的预测及分类 | 第37-44页 |
| 3.1.1 禾谷镰刀菌中有85个预测的G蛋白偶联受体(GPCRs)基因 | 第37-38页 |
| 3.1.2 禾谷镰刀菌中GPCRs的分类 | 第38-44页 |
| 3.2 GPCRs基因的表达模式 | 第44-46页 |
| 3.2.1 GPCRs的进化分析及基因表达形式的构建 | 第44页 |
| 3.2.2 GPCRs参与生长发育、侵染、有性等重要生物学过程的调控 | 第44-46页 |
| 3.3 禾谷镰刀菌中候选GPCRs基因的敲除及突变体的表型分析 | 第46-51页 |
| 3.3.1 85 个GPCRs基因序列的下载 | 第46-47页 |
| 3.3.2 表型及侵染分析 | 第47-48页 |
| 3.3.3 GPCRs基因的单个敲除不影响生长及产孢 | 第48页 |
| 3.3.4 3 个GPCRs基因敲除突变体影响小麦侵染时期致病性 | 第48-49页 |
| 3.3.5 3 个GPCRs基因敲除突变体影响有性生殖 | 第49-51页 |
| 第四章 CRL1和CRL2对有性发育的调控 | 第51-65页 |
| 4.1 CRL1, CRL2有性时期特异表达 | 第51-52页 |
| 4.2 突变体crl1不影响菌丝融合并且父本可育 | 第52-53页 |
| 4.2.1 突变体crl1与mat111 的杂交 | 第52-53页 |
| 4.2.2 突变体crl1父本可育 | 第53页 |
| 4.3 CRL1调控有性生殖前期的发育 | 第53-55页 |
| 4.3.1 子囊壳前期观察 | 第53页 |
| 4.3.2 突变体crl1影响子囊壳形成过程中外壁菌丝的包围 | 第53-55页 |
| 4.4 突变体crl2影响产囊丝钩(crozier)的进一步发育 | 第55-56页 |
| 4.5 CRL1和CRL2不同形式的突变对其功能的影响 | 第56-61页 |
| 4.5.1 crl1的互补实验 | 第56-58页 |
| 4.5.1.1 互补载体CRL1-GFP的构建 | 第56页 |
| 4.5.1.2 crl1/CRL1-GFP转化子的获得 | 第56-57页 |
| 4.5.1.3 转化子crl1/CRL1-GFP不能互补突变体crl1的表型 | 第57页 |
| 4.5.1.4 CRL1的 3’UTR对Crl1蛋白功能的正常发挥起到重要的作用 | 第57-58页 |
| 4.5.2 CRL1不同突变形式CRL1~(△43-81)、CRL1~(GCC)的研究 | 第58-60页 |
| 4.5.3 crl2的互补实验 | 第60-61页 |
| 4.5.3.1 crl2/CRL2-eGFP转化子的获得 | 第60-61页 |
| 4.5.3.2 Crl2定位在未成熟的子囊膜上 | 第61页 |
| 4.6 Crl1，Crl2下游通路研究 | 第61-65页 |
| 4.6.1 Crl1偶联G蛋白Gpa1激活下游信号 | 第61-62页 |
| 4.6.2 Crl1、Crl2下游激酶簇的鉴定 | 第62-65页 |
| 4.6.2.1 外源cAMP不能互补crl1和crl2突变体的表型 | 第62-63页 |
| 4.6.2.2 双敲突变体crl1 pde2，crl2 pde2不能互补crl1, crl2的表型 | 第63页 |
| 4.6.2.3 Fst7作为Crl2的下游调控子囊的发育 | 第63-65页 |
| 第五章 RNA编辑基因AMD1对有性发育的影响 | 第65-81页 |
| 5.1 AMD1基因的进化及生物信息学分析 | 第65-67页 |
| 5.1.1 AMD1的生物信息学分析及编辑位点 | 第65-66页 |
| 5.1.2 AMD1编码的蛋白特异的存在形成子囊果的子囊菌里 | 第66页 |
| 5.1.3 讨论与分析 | 第66-67页 |
| 5.2 amd1突变体的获得及表型分析 | 第67-72页 |
| 5.2.1 表型分析与半薄切片样品的获得 | 第67页 |
| 5.2.2 amd1突变体不影响无性生殖而特异的影响子囊孢子的喷发 | 第67-69页 |
| 5.2.3 AMD1基因负责子囊壁的完整性 | 第69-71页 |
| 5.2.4 amd1突变体在有性诱导 7 d后开始讲解 | 第71-72页 |
| 5.3 AMD1的表达模式 | 第72-73页 |
| 5.3.1 样品的收集及实时荧光定量PCR (qRT-PCR) | 第72页 |
| 5.3.2 AMD1在有性发育后期特异表达 | 第72-73页 |
| 5.4 A632-to-I编辑对AMD1基因功能的影响 | 第73-76页 |
| 5.4.1 AMD1~(WT), AMD1~(TGG), AMD1~(TAA)载体的构建 | 第73页 |
| 5.4.2 表达AMD1~(WT)和AMD1~(TGG)可以互补amd1突变体的缺陷 | 第73-74页 |
| 5.4.3 无性时期持续表达AMD1~(TGG)对菌的生长没有影响 | 第74页 |
| 5.4.4 Amd1定位在子囊膜上 | 第74-75页 |
| 5.4.5 讨论 | 第75-76页 |
| 5.5 AMD1与子囊孢子萌发自抑制 | 第76-79页 |
| 5.5.1 amd1突变体中散乱的子囊孢子在子囊壳内萌发 | 第76-77页 |
| 5.5.2 Fgkin1突变体中AMD1表达量降低 | 第77-78页 |
| 5.5.3 讨论 | 第78-79页 |
| 5.6 AMD1在转录水平的调控 | 第79-81页 |
| 5.6.1 RNA-seq数据的分析 | 第79-80页 |
| 5.6.2 AMD1基因的缺失影响300多个基因的表达 | 第80页 |
| 5.6.3 讨论 | 第80-81页 |
| 第六章 全文总结及分析 | 第81-84页 |
| 6.1 GPCRs功能研究总结 | 第81-82页 |
| 6.2 AMD1研究总结 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-94页 |
| 附录 | 第94-116页 |
| 英文缩写表 | 第116-118页 |
| 致谢 | 第118-120页 |
| 作者简介 | 第120页 |
