| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 英文缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一章 综述 | 第12-22页 |
| 1 乳腺癌的概述 | 第12-13页 |
| 2 TCGA数据库 | 第13-14页 |
| 2.1 TCGA数据库的简介 | 第13页 |
| 2.2 TCGA数据库与乳腺癌 | 第13-14页 |
| 3 PI3K-Akt信号通路 | 第14-17页 |
| 3.1 PI3K的简介 | 第14-15页 |
| 3.2 Akt的简介 | 第15-16页 |
| 3.3 PI3K-Akt信号通路与癌症 | 第16-17页 |
| 3.3.1 PI3K-Akt信号通路上游分子的变化 | 第16-17页 |
| 3.3.2 PI3K与Akt的变化 | 第17页 |
| 4 骨桥蛋白 | 第17-20页 |
| 4.1 骨桥蛋白的简介 | 第17-19页 |
| 4.2 骨桥蛋白与癌症 | 第19-20页 |
| 5 课题的研究意义 | 第20-22页 |
| 第二章 TCGA数据库中乳腺癌的PIK3CA和SPP1的相关数据的分析 | 第22-27页 |
| 1 数据的获取 | 第22页 |
| 2 数据的分析方法 | 第22-23页 |
| 3 数据的分析结果 | 第23-26页 |
| 3.1 PIK3CA和SPP1在正常乳腺组织以及乳腺癌组织中的表达分析 | 第23页 |
| 3.2 PIK3CA和SPP1在不同PAM50分型的乳腺癌中的表达分析 | 第23-24页 |
| 3.3 PIK3CA和SPP1在不同临床阶段的乳腺癌中的表达分析 | 第24-25页 |
| 3.4 PIK3CA和SPP1的表达量对乳腺癌患者生存期的影响的分析 | 第25页 |
| 3.5 乳腺癌中PIK3CA与SPP1的表达相关性的分析 | 第25-26页 |
| 4 数据分析的结论 | 第26-27页 |
| 第三章 人正常乳腺细胞和人乳腺癌细胞中PI3K和OPN的基因表达的相关研究 | 第27-40页 |
| 1 实验材料与试剂 | 第27-28页 |
| 2 实验方法 | 第28-34页 |
| 2.1 人正常乳腺细胞株和人乳腺癌细胞株的培养 | 第28-29页 |
| 2.2 Trizol法提取三种细胞的总RNA | 第29页 |
| 2.3 反转录制备三种细胞的cDNA | 第29-30页 |
| 2.4 Real-time PCR检测三种细胞中PIK3CA和SPP1的表达情况 | 第30-31页 |
| 2.5 蛋白印迹实验检测细胞中PI3K、p-Akt和OPN的蛋白水平的差异 | 第31-32页 |
| 2.6 细胞爬片免疫组化检测细胞中PI3K、p-Akt和OPN的蛋白水平的差异 | 第32-33页 |
| 2.7 石蜡切片免疫组化检测样本中PI3K、p-Akt和OPN的蛋白水平的差异 | 第33-34页 |
| 3 实验结果 | 第34-38页 |
| 3.1 三种细胞中PIK3CA和SPP1的表达情况 | 第34-35页 |
| 3.2 三种细胞中PI3K、p-Akt和OPN的蛋白水平的差异 | 第35-37页 |
| 3.3 临床组织样本中PI3K、p-Akt和OPN的蛋白水平的差异 | 第37-38页 |
| 4 本章小结 | 第38-40页 |
| 第四章 乳腺癌中PI3K-Akt信号通路对OPN的基因表达的调控以及OPN对肿瘤侵袭与转移过程的影响的研究 | 第40-61页 |
| 1 实验材料与试剂 | 第40-42页 |
| 2 实验方法 | 第42-49页 |
| 2.1 人乳腺癌细胞株的培养 | 第42页 |
| 2.2 抑制剂A66处理MCF-7 和MDA-MB-231细胞 | 第42页 |
| 2.3 Trizol法提取细胞的总RNA | 第42-43页 |
| 2.4 反转录制备细胞的cDNA | 第43-44页 |
| 2.5 Real-time PCR检测A66处理后两种细胞中SPP1的表达情况 | 第44-45页 |
| 2.6 ELISA实验检测A66处理后两种细胞的分泌型OPN的浓度变化 | 第45页 |
| 2.7 蛋白印迹实验检测A66处理后细胞中p-Akt和OPN的蛋白水平的变化 | 第45-46页 |
| 2.8 爬片免疫组化检测A66处理后细胞中p-Akt和OPN的蛋白水平的变化 | 第46-47页 |
| 2.9 MTT实验检测A66处理后两种细胞的增殖能力的变化 | 第47页 |
| 2.10 细胞创口愈合实验检测A66处理后两种细胞的迁移能力的变化 | 第47页 |
| 2.11 细胞侵袭实验检测A66处理后MDA-MB-231的侵袭能力的变化 | 第47-48页 |
| 2.12 软琼脂克隆形成实验检测A66处理后MDA-MB-231的非锚定生长能力的变化 | 第48-49页 |
| 3 实验结果 | 第49-59页 |
| 3.1 A66处理后两种细胞中SPP1的表达的变化情况 | 第49-50页 |
| 3.2 A66处理后两种细胞的分泌型OPN的浓度变化情况 | 第50-51页 |
| 3.3 A66处理后两种细胞中p-Akt和OPN的蛋白水平的变化 | 第51-54页 |
| 3.4 A66处理后两种细胞的增殖能力的变化 | 第54页 |
| 3.5 A66处理后两种细胞的迁移能力的变化 | 第54-56页 |
| 3.6 A66处理后MDA-MB-231的侵袭能力的变化 | 第56-58页 |
| 3.7 A66处理后MDA-MB-231的非锚定生长能力的变化 | 第58-59页 |
| 4 本章小结 | 第59-61页 |
| 讨论 | 第61-63页 |
| 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
