| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-41页 |
| 1.1 新药创制与靶标创新 | 第15-18页 |
| 1.1.1 粮食安全和环境安全需要不断创制新农药 | 第15页 |
| 1.1.2 我国农药创新现状 | 第15-16页 |
| 1.1.3 新农药创制的最新趋势是基于化学蛋白组学分子靶标导向的绿色农药创制 | 第16-18页 |
| 1.2 V-ATPASE作为药物靶标的研究现状 | 第18-34页 |
| 1.2.1 V-ATPase的结构与功能 | 第19-23页 |
| 1.2.2 昆虫V-ATPase | 第23-27页 |
| 1.2.3 V-ATPase抑制剂 | 第27-34页 |
| 1.3 苦皮藤素V作用机理研究进展 | 第34-38页 |
| 1.3.1 苦皮藤素V的症状学研究 | 第35-36页 |
| 1.3.2 苦皮藤素V对昆虫部分酶系活性的影响 | 第36页 |
| 1.3.3 苦皮藤素V的电生理研究 | 第36-37页 |
| 1.3.4 苦皮藤素V选择性作用机理研究 | 第37-38页 |
| 1.4 论文设计思想 | 第38-41页 |
| 1.4.1 选题背景、目的及科学意义 | 第38-39页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第39-40页 |
| 1.4.3 研究技术路线 | 第40-41页 |
| 第二章 结合蛋白的分离及鉴定 | 第41-50页 |
| 2.1 实验材料 | 第41-42页 |
| 2.1.1 试虫 | 第41页 |
| 2.1.2 供试化合物与试剂 | 第41页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第41-42页 |
| 2.2 实验方法 | 第42-45页 |
| 2.2.1 连接配体的合成 | 第42-43页 |
| 2.2.2 基于粘虫幼虫中肠刷状缘膜囊泡（BBMV）的亲和层析 | 第43-44页 |
| 2.2.3 电泳检测及结合蛋白的鉴定 | 第44-45页 |
| 2.3 结果与分析 | 第45-47页 |
| 2.3.1 连接配体的合成 | 第45页 |
| 2.3.2 结合蛋白的洗脱 | 第45-46页 |
| 2.3.3 电泳检测与质谱鉴定 | 第46-47页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第47-50页 |
| 第三章 二氢沉香呋喃多元酯类化合物对昆虫V-ATPASE和氨肽酶活性的影响 | 第50-61页 |
| 3.1 实验材料 | 第50-52页 |
| 3.1.1 试虫 | 第50页 |
| 3.1.2 供试化合物 | 第50-51页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第51-52页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第52页 |
| 3.1.5 主要缓冲液 | 第52页 |
| 3.2 实验方法 | 第52-55页 |
| 3.2.1 二氢沉香呋喃多元酯类化合物的杀虫活性 | 第52-53页 |
| 3.2.2 苦皮藤素V对氨肽酶N（APN）活性的影响 | 第53-54页 |
| 3.2.3 二氢沉香呋喃多元酯类化合物对粘虫中肠V-ATPase活性的影响 | 第54-55页 |
| 3.3 结果与分析 | 第55-59页 |
| 3.3.1 二氢沉香呋喃多元酯类化合物的杀虫活性 | 第55-56页 |
| 3.3.2 苦皮藤素V对氨肽酶（APN）活性的影响 | 第56-57页 |
| 3.3.3 二氢沉香呋喃多元酯类化合物对粘虫幼虫中肠V-ATPase活性影响 | 第57-58页 |
| 3.3.4 二氢沉香呋喃多元酯类化合物杀虫活性与对V-ATPase活性抑制率的相关性分析 | 第58-59页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第59-61页 |
| 第四章 粘虫V-ATPASE H亚基全长CDNA克隆和表达分析 | 第61-79页 |
| 4.1 实验材料 | 第61-62页 |
| 4.1.1 试虫 | 第61页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第61页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第61-62页 |
| 4.2 实验方法 | 第62-69页 |
| 4.2.1 粘虫V-ATPase H亚基全长cDNA的克隆 | 第62-68页 |
| 4.2.2 粘虫V-ATPase H亚基全长cDNA序列的生物信息学分析及系统发育树的构建 | 第68页 |
| 4.2.3 粘虫中肠V-ATPase H亚基表达的生长发育表达特征 | 第68-69页 |
| 4.3 结果与分析 | 第69-77页 |
| 4.3.1 粘虫V-ATPase H亚基cDNA部分基因克隆 | 第69-71页 |
| 4.3.2 粘虫中肠V-ATPase H亚基cDNA的 3′RACE | 第71-73页 |
| 4.3.3 粘虫中肠V-ATPase H亚基cDNA的 5'RACE | 第73页 |
| 4.3.4 粘虫V-ATPase H亚基cDNA 3′和 5′RACE的序列验证 | 第73-75页 |
| 4.3.5 序列分析 | 第75-76页 |
| 4.3.6 粘虫中肠V-ATPase H亚基表达的生长发育表达特征 | 第76-77页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第77-79页 |
| 第五章 二氢沉香呋喃多元酯类化合物和粘虫V-ATPASE H亚基的结合亲和性分析 | 第79-96页 |
| 5.1 实验材料 | 第79-80页 |
| 5.1.1 试虫 | 第79页 |
| 5.1.2 菌株与表达载体 | 第79页 |
| 5.1.3 主要试剂 | 第79-80页 |
| 5.1.4 主要仪器 | 第80页 |
| 5.2 实验方法 | 第80-84页 |
| 5.2.1 粘虫V-ATPase H亚基的原核表达 | 第80-82页 |
| 5.2.2 粘虫V-ATPase H亚基的纯化 | 第82页 |
| 5.2.3 二氢沉香呋喃多元酯类化合物和粘虫V-ATPase H亚基蛋白的结合亲和性与其胃毒活性和V-ATP酶抑制率的相关性分析 | 第82-84页 |
| 5.3 结果与分析 | 第84-95页 |
| 5.3.1 粘虫V-ATPase H亚基的原核表达与纯化 | 第84-90页 |
| 5.3.2 二氢沉香呋喃多元酯类化合物和粘虫V-ATPase H亚基蛋白的结合亲和性与其胃毒活性和对V-ATP酶抑制率的相关性 | 第90-95页 |
| 5.4 小结与讨论 | 第95-96页 |
| 第六章 东方粘虫幼虫中肠V-ATPASE H亚基同源模建及分子对接 | 第96-112页 |
| 6.1 实验材料 | 第96-98页 |
| 6.2 实验方法 | 第98-99页 |
| 6.2.1 粘虫V-ATPase H亚基模型的构建 | 第98-99页 |
| 6.2.2 二氢沉香呋喃多元酯类化合物与东方粘虫幼虫中肠V-ATPase H亚基的分子对接及结合位点的预测 | 第99页 |
| 6.3 结果与分析 | 第99-111页 |
| 6.3.1 目的蛋白序列与模板蛋白序列的比对 | 第99-100页 |
| 6.3.2 3D模型的构建 | 第100-101页 |
| 6.3.3 模型评估 | 第101-103页 |
| 6.3.4 粘虫V-ATPase H亚基和二氢沉香呋喃多元酯类化合物活性位点确定及分子对接 | 第103-111页 |
| 6.4 小结与讨论 | 第111-112页 |
| 第七章 讨论与结论 | 第112-119页 |
| 7.1 讨论 | 第112-116页 |
| 7.1.1 二氢沉香呋喃多元酯类杀虫化合物的作用靶标 | 第112-114页 |
| 7.1.2 二氢沉香呋喃多元酯类杀虫活性化合物的结合位点 | 第114页 |
| 7.1.3 二氢沉香呋喃多元酯类杀虫活性化合物的作用机理 | 第114-116页 |
| 7.2 结论 | 第116-118页 |
| 7.3 论文主要创新点 | 第118页 |
| 7.4 尚需研究的问题 | 第118-119页 |
| 参考文献 | 第119-131页 |
| 附录 | 第131-135页 |
| 附录1 化合物谱图 | 第131-133页 |
| 附录2 缓冲液配制 | 第133-134页 |
| 附录3 缩略词 | 第134-135页 |
| 致谢 | 第135-136页 |
| 作者简介 | 第136页 |
