| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 缩略词 | 第9-14页 |
| 引言 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-32页 |
| 1 灰霉病菌和灰霉病 | 第15-20页 |
| 1.1 灰霉病菌生物学特征 | 第15-16页 |
| 1.2 灰霉病害发生规律 | 第16-17页 |
| 1.3 灰霉病菌侵染过程 | 第17-18页 |
| 1.4 灰霉病害的防治 | 第18-20页 |
| 1.4.1 农业防治 | 第18页 |
| 1.4.2 生物防治 | 第18-19页 |
| 1.4.3 化学防治 | 第19-20页 |
| 2 灰霉病防治常用杀菌剂作用机制及抗性研究 | 第20-30页 |
| 2.1 苯并咪唑类杀菌剂 | 第20-21页 |
| 2.2 苯胺基嘧啶类杀菌剂 | 第21-22页 |
| 2.3 二甲酰亚胺类杀菌剂 | 第22-23页 |
| 2.4 甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂 | 第23-25页 |
| 2.5 苯吡咯类杀菌剂 | 第25-26页 |
| 2.6 酰胺类杀菌剂 | 第26-29页 |
| 2.7 烟酰胺类杀菌剂 | 第29-30页 |
| 3 灰霉病菌多药抗性研究 | 第30页 |
| 4 本研究的目的及内容 | 第30-32页 |
| 第二章 材料与方法 | 第32-48页 |
| 1 试验材料 | 第32-37页 |
| 1.1 菌株和质粒 | 第32页 |
| 1.2 供试植物 | 第32页 |
| 1.3 培养基 | 第32-34页 |
| 1.4 常用试剂和仪器 | 第34-36页 |
| 1.4.1 常用试剂 | 第34-36页 |
| 1.4.2 试验仪器 | 第36页 |
| 1.5 试验药剂 | 第36-37页 |
| 2 试验方法 | 第37-48页 |
| 2.1 灰霉菌种的保存与培养 | 第37页 |
| 2.2 灰霉基因组DNA的提取 | 第37-39页 |
| 2.2.1 小量简易抽提 | 第37-38页 |
| 2.2.2 大量抽提 | 第38-39页 |
| 2.3 PCR技术 | 第39-40页 |
| 2.3.1 常规PCR | 第39页 |
| 2.3.2 高保真扩增PCR | 第39-40页 |
| 2.3.3 MP-PCR | 第40页 |
| 2.4 DNA的琼脂糖电泳 | 第40页 |
| 2.5 PCR产物纯化回收 | 第40-41页 |
| 2.6 DNA克隆技术 | 第41-42页 |
| 2.6.1 A尾连接体系(25 μl) | 第41-42页 |
| 2.6.2 T载体克隆体系(10 μl) | 第42页 |
| 2.6.3 T4连接酶连接体系(10μl) | 第42页 |
| 2.7 E.Coli DH5α感受态细胞的制备和转化 | 第42-44页 |
| 2.7.1 Inore法制备感受态细胞 | 第42-43页 |
| 2.7.2 感受态细胞的转化 | 第43-44页 |
| 2.8 重组质粒的检测和提取 | 第44-45页 |
| 2.8.1 重组质粒的鉴定 | 第44页 |
| 2.8.2 重组质粒的提取 | 第44-45页 |
| 2.9 质粒酶切 | 第45页 |
| 2.10 灰霉的原生质体转化 | 第45-48页 |
| 第三章 结果与分析 | 第48-79页 |
| 1 2012-2014年浙江省草莓灰霉病菌对杀菌剂抗药性和分子检测 | 第48-66页 |
| 1.16 45 株灰霉菌株的采集 | 第48页 |
| 1.2 筛选6类灰霉防治常用杀菌剂的抗性菌株 | 第48-53页 |
| 1.2.1 2012-2013 年灰霉病菌抗性筛选 | 第49-51页 |
| 1.2.2 2014年灰霉病菌抗性筛选 | 第51-53页 |
| 1.3 灰霉病菌对6类杀菌剂的EC_(50)值测定 | 第53-60页 |
| 1.3.1 对多菌灵敏感和抗性菌株的EC_(50)值测定 | 第53-54页 |
| 1.3.2 对异菌脲敏感和抗性菌株的EC_(50)值测定 | 第54-55页 |
| 1.3.3 对嘧菌酯敏感和抗性菌株的EC_(50)值测定 | 第55-56页 |
| 1.3.4 对嘧霉胺敏感和抗性菌株的EC_(50)值测定 | 第56-58页 |
| 1.3.5 对啶酰菌胺敏感和抗性菌株的EC_(50)值测定 | 第58-59页 |
| 1.3.6 对咯菌腈敏感的EC_(50)值测定 | 第59-60页 |
| 1.4 与杀菌剂抗性相关的分子检测 | 第60-63页 |
| 1.4.1 与嘧菌酯抗性相关的分子检测 | 第60-62页 |
| 1.4.1.1 Cyt b上G143A点突变检测 | 第60-61页 |
| 1.4.1.2 CYTB基因上内含子检测 | 第61-62页 |
| 1.4.2 与啶酰菌胺抗性相关的分子检测 | 第62-63页 |
| 1.5 小结与讨论 | 第63-66页 |
| 2 灰霉病菌对环酰菌胺抗药性机制的研究 | 第66-79页 |
| 2.1 2012-2014年灰霉病菌对环酰菌胺抗药性检测 | 第66-67页 |
| 2.1.1 筛选环酰菌胺抗性菌株 | 第66页 |
| 2.1.2 对环酰菌胺敏感和抗性菌株的EC_(50)值测定 | 第66-67页 |
| 2.2 FenR菌株中ERG27基因点突变检测 | 第67-69页 |
| 2.3 建立P57A点突变的Allele-specific PCR检测体系 | 第69-70页 |
| 2.4 ERG27基因转化载体的构建 | 第70-71页 |
| 2.5 ERG27基因转野生型菌株38B1 | 第71-72页 |
| 2.6 ERG27基因转化菌株抗药性检测 | 第72-73页 |
| 2.7 FenR菌株和FenS菌株遗传背景分析 | 第73-75页 |
| 2.8 FenR菌株和FenS菌株的转座子检测 | 第75-76页 |
| 2.9 小结与讨论 | 第76-79页 |
| 第四章 全文总结与展望 | 第79-84页 |
| 1 全文总结 | 第79-82页 |
| 1.1 灰霉病菌抗药性检测 | 第79-80页 |
| 1.2 部分药剂抗性相关的分子检测 | 第80页 |
| 1.3 环酰菌胺抗药性机制的研究 | 第80-82页 |
| 1.3.1 环酰菌胺抗药性检测 | 第80页 |
| 1.3.2 FenR菌株的Erg27点突变检测 | 第80-81页 |
| 1.3.3 ERG27基因转野生型菌株38B1 | 第81页 |
| 1.3.4 FenR菌株和FenS菌株遗传背景分析 | 第81页 |
| 1.3.5 FenR菌株和FenS菌株的转座子检测 | 第81-82页 |
| 2 本研究创新点 | 第82页 |
| 3 后续研究展望 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-93页 |
| 附录 | 第93-95页 |
| 附录A | 第93-95页 |
| 附录B：个人简历和硕士期间发表的学术论文 | 第95页 |
