摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
图表目录 | 第13-14页 |
缩略词表 | 第14-15页 |
第一章 引言 | 第15-26页 |
1.1 百合病害概况 | 第15页 |
1.2 百合抗病种质资源研究进展 | 第15-16页 |
1.3 植物来源的镰刀菌抗性相关基因及抗病作用机理 | 第16-19页 |
1.3.1 病程相关蛋白(pathogenesis-related proteins,PRs) | 第17-18页 |
1.3.2 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(polygalacturonase-inhibiting protein,PGIP) | 第18-19页 |
1.4 植物抗病基因分离方法应用研究进展 | 第19-21页 |
1.4.1 抑制差减杂交(SSH) | 第19-20页 |
1.4.2 cDNA-AFLP | 第20页 |
1.4.3 基因表达系列分析(serial analysis of gene expression,SAGE) | 第20-21页 |
1.4.4 基因芯片 | 第21页 |
1.5 植物抗生物胁迫相关转录因子研究进展 | 第21-25页 |
1.5.1 ERF转录因子 | 第22-23页 |
1.5.2 bZIP转录因子 | 第23页 |
1.5.3 WRKY类转录因子 | 第23-25页 |
1.6 课题研究意义及目的 | 第25-26页 |
第二章 岷江百合受尖孢镰刀菌侵染过程的SSH cDNA文库构建及分析 | 第26-37页 |
2.1 前言 | 第26页 |
2.2 材料 | 第26-27页 |
2.2.1 植物材料及病原真菌 | 第26页 |
2.2.2 试剂 | 第26-27页 |
2.2.3 菌株及载体 | 第27页 |
2.2.4 培养基及缓冲液配方 | 第27页 |
2.3 方法 | 第27-30页 |
2.3.1 岷江百合组织培养 | 第27-28页 |
2.3.2 病原真菌的活化培养 | 第28页 |
2.3.3 病原真菌接种及激素处理 | 第28页 |
2.3.4 RNA提取及mRNA分离 | 第28-29页 |
2.3.5 SSH cDNA文库构建 | 第29页 |
2.3.6 文库插入片段分析 | 第29页 |
2.3.7 测序及序列分析 | 第29-30页 |
2.4 结果及分析 | 第30-35页 |
2.4.1 岷江百合组织培养 | 第30页 |
2.4.2 SSH cDNA文库构建及分析 | 第30-32页 |
2.4.3 文库插入片段分析结果 | 第32-33页 |
2.4.4 序列比对分析及相关功能基因分类 | 第33-35页 |
2.5 讨论 | 第35-37页 |
2.5.1 高质量RNA对于SSH文库构建的重要性 | 第35-36页 |
2.5.2 SSH技术应用于分离植物抗病相关基因的有效性和不足 | 第36-37页 |
第三章 基因表达谱分析 | 第37-65页 |
3.1 前言 | 第37页 |
3.2 材料 | 第37页 |
3.3 方法 | 第37-39页 |
3.3.1 病原菌接种处理及取样 | 第37-38页 |
3.3.2 RNA提取 | 第38页 |
3.3.3 寡核苷酸芯片制备及靶探针标记 | 第38页 |
3.3.4 杂交及信号扫描 | 第38-39页 |
3.3.5 数据分析 | 第39页 |
3.4 结果及分析 | 第39-62页 |
3.4.1 芯片杂交结果总体聚类分析及评价 | 第39-40页 |
3.4.2 差异表达基因的筛选及统计分析 | 第40-44页 |
3.4.3 差异表达基因的功能注释及分类 | 第44-56页 |
3.4.4 部分表达上调基因的表达谱分析 | 第56-62页 |
3.5 讨论 | 第62-65页 |
3.5.1 百合功能基因组学研究面临的问题 | 第62-63页 |
3.5.2 岷江百合抗应尖孢镰刀菌分子机理解析 | 第63-65页 |
第四章 岷江百合转录因子LrbZIP1的克隆及表达特性分析 | 第65-77页 |
4.1 前言 | 第65页 |
4.2 材料 | 第65-66页 |
4.2.1 植物材料 | 第65页 |
4.2.2 试剂 | 第65页 |
4.2.3 菌株及载体 | 第65-66页 |
4.3 方法 | 第66-69页 |
4.3.1 RNA提取及mRNA分离 | 第66页 |
4.3.2 5’RACE及3’RACE | 第66-67页 |
4.3.3 全长ORF的克隆 | 第67页 |
4.3.4 生物信息学分析 | 第67-68页 |
4.3.5 基因的表达分析 | 第68-69页 |
4.4 结果及分析 | 第69-75页 |
4.4.1 LrbZIP1转录因子全长ORF的克隆 | 第69-70页 |
4.4.2 LrbZIP1的生物信息学分析 | 第70-74页 |
4.4.3 LrbZIP1基因的表达分析 | 第74-75页 |
4.5 讨论 | 第75-77页 |
第五章 结论及展望 | 第77-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-89页 |
附录A | 第89-90页 |
附录B | 第90-96页 |