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丝状真菌纤维素酶高产菌株遗传改造及p24蛋白家族研究

中文摘要第8-10页
ABSTRACT第10-12页
符号说明第13-14页
第一章 绪论第14-37页
    1.1 不溶性纤维素进入丝状真菌机制猜想第14页
    1.2 丝状真菌合成纤维素酶信号感应机制第14-19页
        1.2.1 碳信号第14-17页
        1.2.2 光信号第17-19页
    1.3 转录水平调控纤维素酶基因的表达第19-25页
        1.3.1 转录因子调控纤维素酶基因表达第19-23页
        1.3.2 染色质重建调控纤维素酶基因表达第23-25页
    1.4 纤维素酶蛋白的加工修饰第25-28页
        1.4.1 糖基化对纤维素酶影响第26-27页
        1.4.2 真菌N-糖基化修饰路径第27-28页
    1.5 丝状真菌分泌路径第28-32页
        1.5.1 丝状真菌内膜系统第28-29页
        1.5.2 分泌机制研究第29-31页
        1.5.3 丝状真菌蛋白分泌方式研究第31-32页
    1.6 纤维素降解酶类第32-34页
    1.7 半纤维素和木质素降解酶类第34页
    1.8 诱变获得纤维素酶高产菌株第34-35页
    1.9 本文的立题依据和研究目的第35-37页
第二章 草酸青霉JUA10-1胞外木质纤维素降解酶系的理性改造第37-56页
    2.1 引言第37-38页
    2.2 实验材料与方法第38-46页
        2.2.1 实验仪器第38-39页
        2.2.2 实验试剂第39页
        2.2.3 常用培养基配方及溶液配方第39-41页
        2.2.4 实验方法第41-46页
    2.3 实验结果第46-54页
        2.3.1 凝胶阻滞迁移(EMSA)实验第46-48页
        2.3.2 草酸青霉JUA10-1基因工程构建第48-49页
        2.3.3 流加葡萄糖提高草酸青霉CXA纤维素酶表达量第49-51页
        2.3.4 草酸青霉CXA的工业化应用前景第51-54页
    2.4 讨论第54-55页
    2.5 小结第55-56页
第三章 草酸青霉和里氏木霉P24同源蛋白ERP生理功能比较第56-74页
    3.1 引言第56-57页
    3.2 材料和方法第57-62页
        3.2.1 菌株第57页
        3.2.2 实验试剂第57页
        3.2.3 实验仪器第57页
        3.2.4 常用培养基及试剂配方第57-58页
        3.2.5 本章所用的引物序列第58-60页
        3.2.6 实验操作方法第60-62页
    3.3 结果和分析第62-71页
        3.3.1 里氏木霉和草酸青霉中p24γ家族同源蛋白Erp第62-64页
        3.3.2 里氏木霉和草酸青霉⊿erp生孢能力测试第64-66页
        3.3.3 草酸青霉和里氏木霉⊿erp菌株菌丝生长方式出现明显差异第66-67页
        3.3.4 erp敲除株细胞膜完整性受到损伤但细胞壁并没破坏第67-68页
        3.3.5 里氏木霉和草酸青霉⊿erp菌株在纤维素酶转录和分泌方面表现出明显差异第68-71页
    3.4. 讨论第71-72页
    3.5. 小结第72-74页
第四章 草酸青霉P24异二聚体生理功能研究第74-100页
    4.1 引言第74-75页
    4.2 材料与方法第75-79页
        4.2.1 实验仪器第75页
        4.2.2 实验试剂第75页
        4.2.3 各种常用实验培养基配方及常用溶液配方第75-76页
        4.2.4 实验方法第76-77页
        4.2.5 BiFC实验第77页
        4.2.6 生孢能力测试实验第77页
        4.2.7 菌落表型观察和利用显微镜观察侧枝发育模式第77-78页
        4.2.8 出发菌株和敲除株之间定量蛋白质组学比较第78-79页
    4.3 实验结果第79-96页
        4.3.1 草酸青霉114-2 p24同源蛋白第79-83页
        4.3.2 Erp-Pδ体内相互作用研究第83-84页
        4.3.3 表型观察及孢子定量实验第84-85页
        4.3.4 出发株和⊿pErppδ菌株之间侧枝发育方式比较第85-86页
        4.3.5 草酸青霉中敲除p24异二聚体后胞内蛋白质组学分析第86-96页
    4.4 讨论第96-98页
    4.5 小结第98-100页
全文主要创新点及不足第100-102页
参考文献第102-111页
致谢第111-112页
攻读学位期间发表的学术论文第112-113页
学位论文评阅及答辩情况表第113-114页
附件第114-121页

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