摘要 | 第3-5页 |
Abstracts | 第5-6页 |
第1章 前言 | 第11-22页 |
1.1 艾滋病和HIV | 第11-14页 |
1.1.1 HIV分类和起源 | 第11页 |
1.1.2 HIV-1 进化 | 第11-12页 |
1.1.3 艾滋病的治疗 | 第12-13页 |
1.1.4 中国艾滋病疫情现状 | 第13-14页 |
1.2 艾滋病动物感染模型 | 第14-17页 |
1.2.1 鼠疫缺陷鼠模型 | 第14页 |
1.2.2 猫和兔感染模型 | 第14-15页 |
1.2.3 马感染模型 | 第15页 |
1.2.4 黑猩猩与食蟹猴模型 | 第15-16页 |
1.2.5 SHIV动物感染模型 | 第16-17页 |
1.3 天然免疫分子TRIM5α | 第17-21页 |
1.3.1 TRIM5α 分子的来源 | 第17页 |
1.3.2 TRIM5α 与TRIM蛋白家族 | 第17-19页 |
1.3.3 TRIM5α 限制HIV复制的机制 | 第19-21页 |
1.3.4 TRIM5α 基因敲低 | 第21页 |
1.4 慢病毒载体 | 第21-22页 |
第2章 材料方法 | 第22-37页 |
2.1 实验材料 | 第22-23页 |
2.1.1 细胞株、质粒、菌株 | 第22页 |
2.1.2 主要试剂和溶液 | 第22-23页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第23页 |
2.2 实验方法 | 第23-37页 |
2.2.1 基础实验方法 | 第23-24页 |
2.2.2 表达单个shRNA重组慢病毒质粒构建 | 第24-26页 |
2.2.3 慢病毒的包装 | 第26-27页 |
2.2.4 重组慢病毒感染CMEF细胞及细胞系筛选 | 第27-28页 |
2.2.5 TRIM5α 基因敲低对mRNA表达的影响 | 第28-29页 |
2.2.6 Western Blot | 第29-32页 |
2.2.7 功能验证 | 第32页 |
2.2.8 胚胎操作 | 第32-37页 |
第3章 结果与分析 | 第37-50页 |
3.1 shRNA重组慢病毒表达质粒构建 | 第37-39页 |
3.2 shRNA重组慢病毒包装 | 第39-40页 |
3.3 流式分选得到TRIM5α 基因敲低的细胞系 | 第40-42页 |
3.4 QRT-PCR结果 | 第42-46页 |
3.5 Western Blot结果 | 第46-47页 |
3.6 功能验证结果 | 第47-48页 |
3.7 激光共聚焦观察食蟹猴胚胎结果 | 第48-49页 |
3.8 小结 | 第49-50页 |
第4章 讨论与结论 | 第50-54页 |
4.1 RNA干扰的应用 | 第50-51页 |
4.2 慢病毒载体的优势与不足 | 第51-52页 |
4.3 用HIV-1 假病毒来进行功能分析的讨论 | 第52页 |
4.4 结论 | 第52-54页 |
致谢 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-60页 |