摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
英文缩略词 | 第7-11页 |
1 前言 | 第11-21页 |
1.1 圆环病毒病原特征 | 第11-12页 |
1.1.1 圆环病毒的分类 | 第11-12页 |
1.1.2 圆环病毒的理化性质 | 第12页 |
1.1.3 细胞培养特性 | 第12页 |
1.2 圆环病毒分子生物学特征 | 第12-13页 |
1.2.1 基因组结构 | 第12页 |
1.2.2 编码的蛋白 | 第12-13页 |
1.3 流行病学特征 | 第13-15页 |
1.3.1 PCV2流行情况和基因亚型 | 第13页 |
1.3.2 传播途径 | 第13-15页 |
1.4 临床症状 | 第15-17页 |
1.4.1 断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS) | 第15页 |
1.4.2 猪呼吸道疾病综合征(PRDC) | 第15-16页 |
1.4.3 增生性坏死性肺炎(PNP) | 第16页 |
1.4.4 PCV2引起的肺炎 | 第16页 |
1.4.5 PCV2引起的肠炎 | 第16页 |
1.4.6 繁殖障碍 | 第16页 |
1.4.7 猪皮炎肾病综合征(PDNS) | 第16-17页 |
1.5 致病机制 | 第17-18页 |
1.6 诊断方法 | 第18-20页 |
1.6.1 PCV2抗体检测技术 | 第18-19页 |
1.6.2 PCV2核酸检测技术 | 第19-20页 |
1.6.3 PCV2抗原检测技术 | 第20页 |
1.7 PCV2感染模型 | 第20-21页 |
1.8 研究目的与意义 | 第21页 |
2 材料和方法 | 第21-33页 |
2.1 材料 | 第21-23页 |
2.1.1 菌种、质粒和细胞 | 第21页 |
2.1.2 试验动物 | 第21-22页 |
2.1.3 主要仪器 | 第22页 |
2.1.4 主要试剂 | 第22页 |
2.1.5 实验所用溶液的配制 | 第22-23页 |
2.2 方法 | 第23-33页 |
2.2.1 组织样品的处理 | 第23-24页 |
2.2.2 引物设计与合成 | 第24页 |
2.2.3 病毒DNA的提取 | 第24页 |
2.2.4 PCR检测组织样品中的PCV2 | 第24-25页 |
2.2.5 病毒的分离与鉴定 | 第25页 |
2.2.6 间接免疫荧光试验 | 第25页 |
2.2.7 PCV2全基因组扩增 | 第25-26页 |
2.2.8 全基因DNA片段的纯化回收 | 第26页 |
2.2.9 全基因组DNA片段的连接 | 第26页 |
2.2.10 连接产物的转化 | 第26-27页 |
2.2.11 菌液的PCR鉴定及测序 | 第27页 |
2.2.12 序列分析及进化树的构建 | 第27-28页 |
2.2.13 荧光定量PCR引物设计 | 第28页 |
2.2.14 标准质粒的构建 | 第28-29页 |
2.2.15 标准曲线的构建 | 第29页 |
2.2.16 不同时间点细胞中PCV2的复制情况 | 第29页 |
2.2.17 D-氨基葡萄糖对PCV2培养的影响 | 第29-30页 |
2.2.18 血清抗体滴度检测 | 第30页 |
2.2.19 119-GD01分离株的攻毒方案 | 第30-31页 |
2.2.20 临床表现的观察 | 第31页 |
2.2.21 血清中PCV2核酸鉴定及其拷贝数测定 | 第31页 |
2.2.22 测定脏器组织中的PCV2载量 | 第31页 |
2.2.23 组织切片制备 | 第31-32页 |
2.2.24 免疫组化试验 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-47页 |
3.1 PCV2分离及鉴定结果 | 第33-34页 |
3.2 间接免疫荧光试验结果 | 第34页 |
3.3 PCV2分离株全基因扩增 | 第34-35页 |
3.4 PCV2分离株同源性分析和进化树构建及序列分析结果 | 第35-38页 |
3.5 荧光定量PCR试验的标准曲线 | 第38-39页 |
3.6 不同收获时间的病毒液中PCV2的DNA拷贝数 | 第39-40页 |
3.7 D-氨基葡萄糖处理对PCV2拷贝数的影响 | 第40-41页 |
3.8 攻毒实验结果 | 第41-47页 |
3.8.1 临床表现 | 第41页 |
3.8.2 剖检脏器宏观病理变化 | 第41-42页 |
3.8.3 血清中抗体滴度变化与病毒血症 | 第42-43页 |
3.8.4 四种脏器中的载毒量 | 第43-44页 |
3.8.5 组织切片及免疫组化 | 第44-47页 |
4 讨论 | 第47-50页 |
全文总结 | 第50-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-62页 |