| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-19页 |
| 1.1 烯醇化酶研究进展 | 第13-15页 |
| 1.1.1 烯醇化酶 | 第13页 |
| 1.1.2 烯醇化酶的种类与分布 | 第13-14页 |
| 1.1.3 烯醇化酶的结构与功能 | 第14-15页 |
| 1.2 昆虫线粒体基因组研究进展 | 第15-16页 |
| 1.3 本研究所用的昆虫 | 第16-17页 |
| 1.3.1 柞蚕 | 第16-17页 |
| 1.3.2 蓖麻蚕 | 第17页 |
| 1.3.3 草地螟 | 第17页 |
| 1.4 研究的目的及意义 | 第17-19页 |
| 1.4.1 野蚕烯醇化酶基因研究 | 第17-18页 |
| 1.4.2 草地螟线粒体基因组的生物信息学分析 | 第18-19页 |
| 第二章 蓖麻蚕烯醇化酶Ⅰ和Ⅱ基因的克隆与表达谱分析 | 第19-33页 |
| 2.1 材料与方法 | 第19-23页 |
| 2.1.1 供试材料 | 第19页 |
| 2.1.2 总RNA提取及检测 | 第19-20页 |
| 2.1.3 DNaseI处理及反转录 | 第20-21页 |
| 2.1.4 基因克隆与序列分析 | 第21-22页 |
| 2.1.5 系统进化分析 | 第22-23页 |
| 2.1.6 实时荧光定量PCR检测基因表达 | 第23页 |
| 2.2 结果与分析 | 第23-30页 |
| 2.2.1 蓖麻蚕烯醇化酶基因Ⅰ和Ⅱ的克隆与序列分析 | 第23-27页 |
| 2.2.2 烯醇化酶Ⅰ和Ⅱ的序列比较 | 第27-28页 |
| 2.2.3 系统进化关系 | 第28-29页 |
| 2.2.4 烯醇化酶Ⅰ和Ⅱ的表达模式 | 第29-30页 |
| 2.3 结论与讨论 | 第30-33页 |
| 第三章 柞蚕烯醇化酶Ⅰ和Ⅱ基因的表达模式、原核表达与多克隆抗体制备 | 第33-49页 |
| 3.1 材料与方法 | 第33-42页 |
| 3.1.1 供试材料 | 第33-34页 |
| 3.1.2 Real-time PCR检测基因表达 | 第34页 |
| 3.1.3 原核表达所用引物的设计 | 第34-35页 |
| 3.1.4 表达质粒的构建 | 第35-37页 |
| 3.1.5 诱导表达 | 第37-38页 |
| 3.1.6 重组蛋白的纯化 | 第38-40页 |
| 3.1.7 重组蛋白的Western blotting分析 | 第40页 |
| 3.1.8 多克隆抗体制备 | 第40-42页 |
| 3.2 结果与分析 | 第42-48页 |
| 3.2.1 qRT-PCR检测柞蚕烯醇化酶基因Ⅰ和Ⅱ的表达模式 | 第42-43页 |
| 3.2.2 原核表达质粒的构建 | 第43-44页 |
| 3.2.3 原核表达条件的优化 | 第44页 |
| 3.2.4 重组蛋白的纯化 | 第44-45页 |
| 3.2.5 重组表达蛋白的Western blotting鉴定 | 第45-46页 |
| 3.2.6 ELISA检测结果 | 第46-47页 |
| 3.2.7 表达产物的抗原性鉴定 | 第47-48页 |
| 3.3 结论与讨论 | 第48-49页 |
| 第四章 草地螟线粒体基因组的生物信息学分析 | 第49-61页 |
| 4.1 材料与方法 | 第49-51页 |
| 4.1.1 数据 | 第49-51页 |
| 4.1.2 基因注释 | 第51页 |
| 4.1.3 系统进化分析 | 第51页 |
| 4.2 结果与分析 | 第51-58页 |
| 4.2.1 基因组成与偏好性 | 第51-53页 |
| 4.2.2 基因间隔区 | 第53-54页 |
| 4.2.3 A+T富集区 | 第54-56页 |
| 4.2.4 系统进化分析 | 第56-58页 |
| 4.3 结论与讨论 | 第58-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 致谢 | 第69-71页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第71页 |
