| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| 1 核盘菌概述 | 第11-12页 |
| 1.1 核盘菌及其生长发育研究 | 第11-12页 |
| 1.2 核盘菌关键致病因子 | 第12页 |
| 2 叉头框(forkhead box，Fox)家族转录因子研究概述 | 第12-15页 |
| 2.1 Fox家族蛋白的命名及分类 | 第12-13页 |
| 2.2 Forkhead结构域的特征 | 第13页 |
| 2.3 Forkhead家族转录因子在真菌中的研究进展 | 第13-15页 |
| 3 蛋白互作研究的主要方法 | 第15-19页 |
| 3.1 酵母双杂交技术 | 第15-17页 |
| 3.2 双分子荧光互补技术 | 第17-18页 |
| 3.3 染色质免疫共沉淀技术 | 第18-19页 |
| 4 本研究的目的与意义 | 第19-20页 |
| 第二章 转录因子Ss-FoxE2酵母双杂交候选蛋白的回转验证 | 第20-38页 |
| 1 实验材料 | 第20-22页 |
| 1.1 菌株及载体 | 第20页 |
| 1.2 主要试剂 | 第20页 |
| 1.3 主要仪器 | 第20-21页 |
| 1.4 主要培养基及试剂配置 | 第21-22页 |
| 2 实验方法 | 第22-31页 |
| 2.1 酵母双杂交AD载体的构建 | 第22-28页 |
| 2.2 酵母菌株AH109的转化 | 第28-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-36页 |
| 3.1 核盘菌总RNA的提取 | 第31页 |
| 3.2 pGADT7载体与目的基因重组的菌液PCR验证 | 第31-32页 |
| 3.3 pGADT7与目的基因重组质粒的双酶切验证 | 第32-33页 |
| 3.4 酵母阳性转化子的验证 | 第33-35页 |
| 3.5 X-gal 染色分析转录因子 Ss-FoxE2 与候选蛋白在酵母菌中的相互作用 | 第35-36页 |
| 4 小结与讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 双分子荧光互补实验验证转录因子Ss-Fox E2的候选互作蛋白 | 第38-50页 |
| 1 实验材料 | 第38-39页 |
| 1.1 植物、菌株材料及载体 | 第38页 |
| 1.2 实验仪器 | 第38页 |
| 1.3 主要试剂及试剂盒 | 第38页 |
| 1.4 主要试剂配置 | 第38-39页 |
| 2 实验方法 | 第39-45页 |
| 2.1 BiFC重组载体的构建 | 第39-43页 |
| 2.2 去内毒素重组质粒的大量提取 | 第43页 |
| 2.3 拟南芥原生质体制备及转化 | 第43-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-48页 |
| 3.1 BiFC载体的线性化 | 第45页 |
| 3.2 重组载体pSAT4-cYFP-X与pSAT4-nYFP-E2的鉴定 | 第45-47页 |
| 3.3 双分子荧光互补分析转录因子SsFox-E2与候选蛋白的互作 | 第47-48页 |
| 4 小结与讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 核盘菌转录因子Ss-Fox E2调控的靶标基因研究 | 第50-62页 |
| 1 实验材料 | 第50-53页 |
| 1.1 菌株及蛋白 | 第50页 |
| 1.2 主要试剂 | 第50页 |
| 1.3 主要仪器 | 第50-51页 |
| 1.4 试剂及培养基配置 | 第51-53页 |
| 2 实验方法 | 第53-57页 |
| 2.1 核盘菌菌核的大量诱导 | 第53-54页 |
| 2.2 核盘菌子囊盘的诱导 | 第54页 |
| 2.3 交联时间和染色体DNA超声断裂时间的确定 | 第54-55页 |
| 2.4 SsFoxE2抗血清的制备 | 第55页 |
| 2.5 ELISA检测 | 第55-56页 |
| 2.6 Western blot检测 | 第56-57页 |
| 3 结果与分析 | 第57-60页 |
| 3.1 交联时间和染色体DNA超声断裂时间的确定 | 第57-58页 |
| 3.2 ELISA检测抗体效价 | 第58-59页 |
| 3.3 Western blot分析抗体特异性 | 第59-60页 |
| 4 讨论与小结 | 第60-62页 |
| 全文结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-74页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
