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转牛MyoG和Myf6基因F1代小鼠脾脏免疫功能的比较

摘要第8-9页
英文摘要第9-10页
1 引言第11-21页
    1.1 转基因动物安全研究第11-16页
        1.1.1 转基因动物安全研究的发展第11-12页
        1.1.2 转基因动物安全研究现状第12-14页
        1.1.3 外源基因对宿主免疫功能的影响第14-16页
    1.2 动物免疫功能的检测方法第16-19页
        1.2.1 淋巴细胞免疫功能的检测第16-18页
        1.2.2 细胞因子及其表达的检测第18-19页
    1.3 Myo G和Myf6基因的研究第19-20页
        1.3.1 Myo G基因的研究第19页
        1.3.2 Myf6基因的研究第19-20页
    1.4 目的与意义第20-21页
2 材料与方法第21-31页
    2.1 材料第21-23页
        2.1.1 实验动物第21页
        2.1.2 实验试剂第21页
        2.1.3 主要溶液配制第21-22页
        2.1.4 主要仪器设备第22-23页
    2.2 试验方法第23-30页
        2.2.1 转基因小鼠鉴定及拷贝数检测第23-25页
        2.2.2 转基因小鼠免疫功能的检测第25-30页
    2.3 数据处理第30-31页
3 结果与分析第31-45页
    3.1 PCR法对F1代转基因小鼠鉴定第31-32页
    3.2 转基因小鼠拷贝数的检测结果第32-33页
        3.2.1 标准曲线的建立第32页
        3.2.2 荧光定量PCR法检测外源基因拷贝数第32-33页
    3.3 脾脏指数测定第33页
    3.4 MTT法检测脾脏T、B淋巴细胞增殖能力第33-34页
    3.5 AO/EB双染法检测脾淋巴细胞的凋亡第34-35页
    3.6 ANAE染色法检测小鼠脾脏T_(ANAE)~+细胞第35-36页
    3.7 小鼠脾脏中IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-6 和TNF-a的表达第36-45页
        3.7.1 RNA完整性及纯度鉴定第36-37页
        3.7.2 β-actin、IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-6 和TNF-a引物的鉴定第37-39页
        3.7.3 转Myo G基因小鼠脾脏中淋巴细胞因子表达量的检测第39-42页
        3.7.4 转Myf6基因小鼠脾脏中淋巴细胞因子表达量的检测第42-45页
4 讨论第45-52页
    4.1 试验动物的选择第45页
    4.2 阳性鉴定与拷贝数检测第45-46页
        4.2.1 转基因小鼠阳性鉴定第45-46页
        4.2.2 荧光定量PCR法检测外源基因拷贝数第46页
    4.3 转基因小鼠免疫功能的检测第46-50页
        4.3.1 脾脏指数的检测第46页
        4.3.2 淋巴细胞免疫功能的检测第46-48页
        4.3.3 荧光定量PCR法检测细胞因子表达第48-50页
    4.4 外源基因拷贝数与宿主免疫功能的关系第50-52页
5 结论第52-53页
致谢第53-54页
参考文献第54-61页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第61页

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