摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
1 引言 | 第11-21页 |
1.1 转基因动物安全研究 | 第11-16页 |
1.1.1 转基因动物安全研究的发展 | 第11-12页 |
1.1.2 转基因动物安全研究现状 | 第12-14页 |
1.1.3 外源基因对宿主免疫功能的影响 | 第14-16页 |
1.2 动物免疫功能的检测方法 | 第16-19页 |
1.2.1 淋巴细胞免疫功能的检测 | 第16-18页 |
1.2.2 细胞因子及其表达的检测 | 第18-19页 |
1.3 Myo G和Myf6基因的研究 | 第19-20页 |
1.3.1 Myo G基因的研究 | 第19页 |
1.3.2 Myf6基因的研究 | 第19-20页 |
1.4 目的与意义 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-31页 |
2.1 材料 | 第21-23页 |
2.1.1 实验动物 | 第21页 |
2.1.2 实验试剂 | 第21页 |
2.1.3 主要溶液配制 | 第21-22页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第22-23页 |
2.2 试验方法 | 第23-30页 |
2.2.1 转基因小鼠鉴定及拷贝数检测 | 第23-25页 |
2.2.2 转基因小鼠免疫功能的检测 | 第25-30页 |
2.3 数据处理 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-45页 |
3.1 PCR法对F1代转基因小鼠鉴定 | 第31-32页 |
3.2 转基因小鼠拷贝数的检测结果 | 第32-33页 |
3.2.1 标准曲线的建立 | 第32页 |
3.2.2 荧光定量PCR法检测外源基因拷贝数 | 第32-33页 |
3.3 脾脏指数测定 | 第33页 |
3.4 MTT法检测脾脏T、B淋巴细胞增殖能力 | 第33-34页 |
3.5 AO/EB双染法检测脾淋巴细胞的凋亡 | 第34-35页 |
3.6 ANAE染色法检测小鼠脾脏T_(ANAE)~+细胞 | 第35-36页 |
3.7 小鼠脾脏中IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-6 和TNF-a的表达 | 第36-45页 |
3.7.1 RNA完整性及纯度鉴定 | 第36-37页 |
3.7.2 β-actin、IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-6 和TNF-a引物的鉴定 | 第37-39页 |
3.7.3 转Myo G基因小鼠脾脏中淋巴细胞因子表达量的检测 | 第39-42页 |
3.7.4 转Myf6基因小鼠脾脏中淋巴细胞因子表达量的检测 | 第42-45页 |
4 讨论 | 第45-52页 |
4.1 试验动物的选择 | 第45页 |
4.2 阳性鉴定与拷贝数检测 | 第45-46页 |
4.2.1 转基因小鼠阳性鉴定 | 第45-46页 |
4.2.2 荧光定量PCR法检测外源基因拷贝数 | 第46页 |
4.3 转基因小鼠免疫功能的检测 | 第46-50页 |
4.3.1 脾脏指数的检测 | 第46页 |
4.3.2 淋巴细胞免疫功能的检测 | 第46-48页 |
4.3.3 荧光定量PCR法检测细胞因子表达 | 第48-50页 |
4.4 外源基因拷贝数与宿主免疫功能的关系 | 第50-52页 |
5 结论 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第61页 |