| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 一 绪论 | 第13-25页 |
| 1.1 生物活性物质 | 第13-14页 |
| 1.1.1 糖胺聚糖 | 第13-14页 |
| 1.2 硫酸软骨素 | 第14-16页 |
| 1.2.1 硫酸软骨素来源 | 第14页 |
| 1.2.2 硫酸软骨素的构成及化学性质 | 第14-15页 |
| 1.2.3 硫酸软骨素的物理性质 | 第15页 |
| 1.2.4 硫酸软骨素的生物功能 | 第15-16页 |
| 1.3 结直肠癌 | 第16-19页 |
| 1.3.1 结直肠癌的发病机制 | 第17-19页 |
| 1.3.2 结直肠癌的研究热点 | 第19页 |
| 1.4 多糖类物质的抗癌潜力 | 第19-21页 |
| 1.4.1 多糖与癌细胞死亡 | 第19-20页 |
| 1.4.2 多糖与癌细胞凋亡 | 第20-21页 |
| 1.4.3 硫酸软骨素的抗癌作用 | 第21页 |
| 1.5 立题依据及研究意义 | 第21页 |
| 1.6 研究内容 | 第21-23页 |
| 1.6.1 鲟鱼硫酸软骨素对结直肠癌细胞增殖与凋亡的调节作用 | 第22页 |
| 1.6.2 鲟鱼硫酸软骨素对结直肠癌患病小鼠的治疗作用 | 第22页 |
| 1.6.3 鲟鱼硫酸软骨素调节结直肠癌细胞增殖与凋亡的作用途径 | 第22-23页 |
| 1.7 技术路线 | 第23-25页 |
| 二 鲟鱼硫酸软骨素对结肠癌细胞增殖与凋亡的调节作用 | 第25-48页 |
| 2.1 前言 | 第25页 |
| 2.2 材料与方法 | 第25-26页 |
| 2.2.1 细胞 | 第25页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第25-26页 |
| 2.2.3 实验设备 | 第26页 |
| 2.3 细胞准备 | 第26-27页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第26-27页 |
| 2.3.2 细胞传代 | 第27页 |
| 2.3.3 细胞冻存 | 第27页 |
| 2.3.4 细胞复苏 | 第27页 |
| 2.4 实验方法 | 第27-30页 |
| 2.4.1 鲟鱼软骨前处理 | 第27页 |
| 2.4.2 提取流程 | 第27-28页 |
| 2.4.3 硫酸软骨素得率 | 第28页 |
| 2.4.4 硫酸软骨素纯化 | 第28页 |
| 2.4.5 硫酸软骨素纯度测定 | 第28页 |
| 2.4.6 细胞生长曲线测定 | 第28页 |
| 2.4.7 细胞增殖检测 | 第28-29页 |
| 2.4.8 细胞周期的测定 | 第29页 |
| 2.4.9 细胞凋亡的测定 | 第29页 |
| 2.4.10 细胞核Hoechst染色 | 第29-30页 |
| 2.4.11 Caspase-3活性测定 | 第30页 |
| 2.4.12 数据处理 | 第30页 |
| 2.5 结果与分析 | 第30-46页 |
| 2.5.1 鲟鱼硫酸软骨素纯度测定 | 第30-31页 |
| 2.5.2 细胞生长曲线的测定 | 第31页 |
| 2.5.3 鲟鱼硫酸软骨素对结肠癌细胞增殖率的影响 | 第31-33页 |
| 2.5.4 鲟鱼硫酸软骨素对结直肠癌细胞周期的作用 | 第33-37页 |
| 2.5.5 鲟鱼硫酸软骨素对结肠癌细胞凋亡活性的影响 | 第37-46页 |
| 2.6 讨论 | 第46-47页 |
| 2.6.1 鲟鱼硫酸软骨素抑制结直肠癌细胞的增殖 | 第46页 |
| 2.6.2 鲟鱼硫酸软骨素促进结直肠癌细胞凋亡 | 第46-47页 |
| 2.7 小结 | 第47-48页 |
| 三 鲟鱼硫酸软骨素对结直肠癌的治疗作用 | 第48-69页 |
| 3.1 前言 | 第48页 |
| 3.2 材料与方法 | 第48-52页 |
| 3.2.1 材料及溶液配制 | 第48-49页 |
| 3.2.2 主要仪器设备 | 第49页 |
| 3.2.3 结直肠癌细胞培养及制备 | 第49页 |
| 3.2.4 实验动物饲养及模型的建立 | 第49-50页 |
| 3.2.5 样本收集与处理 | 第50页 |
| 3.2.6 组织HE染色切片的制作 | 第50页 |
| 3.2.7 结肠隐窝深度测定 | 第50页 |
| 3.2.8 结肠肿瘤组织免疫组化分析 | 第50-51页 |
| 3.2.9 结直肠肿瘤组织的TUNEL染色分析 | 第51-52页 |
| 3.2.10 数据分析 | 第52页 |
| 3.3 结果与分析 | 第52-66页 |
| 3.3.1 实验动物观察与基本生理指标 | 第52-54页 |
| 3.3.2 口服鲟鱼硫酸软骨素后体内含量检测 | 第54页 |
| 3.3.3 鲟鱼硫酸软骨素对小鼠脏器组织的影响 | 第54-57页 |
| 3.3.4 鲟鱼硫酸软骨素对结直肠隐窝深度的影响 | 第57-60页 |
| 3.3.5 鲟鱼硫酸软骨素对结直肠肿瘤体积、重量的影响 | 第60-61页 |
| 3.3.6 口服鲟鱼硫酸软骨素对结直肠肿瘤组织的影响 | 第61-62页 |
| 3.3.7 口服鲟鱼硫酸软骨素对结直肠癌组织增殖活性的影响 | 第62-64页 |
| 3.3.8 口服鲟鱼硫酸软骨素对结直肠肿瘤组织凋亡活性的影响 | 第64-66页 |
| 3.4 讨论 | 第66-67页 |
| 3.4.1 动物实验材料的可靠性 | 第66-67页 |
| 3.4.2 鲟鱼硫酸软骨素对结直肠癌肿瘤的抑制作用 | 第67页 |
| 3.5 小结 | 第67-69页 |
| 四 鲟鱼硫酸软骨素调节结肠癌细胞增殖与凋亡的作用途径 | 第69-79页 |
| 4.1 前言 | 第69页 |
| 4.2 实验材料 | 第69-70页 |
| 4.2.1 主要试剂 | 第69-70页 |
| 4.2.2 实验设备 | 第70页 |
| 4.3 实验方法 | 第70-73页 |
| 4.3.1 细胞总RNA提取 | 第70页 |
| 4.3.2 结肠癌肿瘤组织总RNA提取 | 第70-71页 |
| 4.3.3 逆转录合成cDNA第一条链 | 第71页 |
| 4.3.4 实时定量qPCR检测 | 第71-72页 |
| 4.3.5 数据分析 | 第72-73页 |
| 4.4 结果与分析 | 第73-77页 |
| 4.4.1 鲟鱼硫酸软骨素对结肠癌细胞中p53表达量的影响 | 第73-74页 |
| 4.4.2 鲟鱼硫酸软骨素对Bcl-2家族基因表达量的影响 | 第74-75页 |
| 4.4.3 鲟鱼硫酸软骨对细胞色素C释放量的影响 | 第75页 |
| 4.4.4 鲟鱼硫酸软骨素对结肠癌细胞Caspase-9酶活性的影响 | 第75-77页 |
| 4.4.5 鲟鱼硫酸软骨素对结肠癌细胞Caspase-3表达量的影响 | 第77页 |
| 4.5 讨论 | 第77-78页 |
| 4.6 小结 | 第78-79页 |
| 五 结论与工作展望 | 第79-82页 |
| 5.1 全文总结 | 第79-80页 |
| 5.2 展望 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-89页 |
| 致谢 | 第89-91页 |
| 个人简介 | 第91页 |
