摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
缩略语表 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-24页 |
1 转基因作物的概况 | 第13-15页 |
1.1 转基因作物的发展概况 | 第13-14页 |
1.2 转cry1Ie基因抗虫玉米简介 | 第14-15页 |
2 转基因植物对土壤的生态安全性 | 第15-18页 |
2.1 转基因植物对土壤微生物的影响研究 | 第15-16页 |
2.2 转基因植物对土壤酶活性影响的研究 | 第16-17页 |
2.3 转基因植物对土壤化学性质影响的研究 | 第17-18页 |
3 研究土壤微生物群落结构的主要方法 | 第18-23页 |
3.1 直接测定方法 | 第18页 |
3.2 平板培养法 | 第18-19页 |
3.3 BIOLOG分析法 | 第19-20页 |
3.4 磷脂脂肪酸分析法(PLFA分析法) | 第20-21页 |
3.5 变性梯度凝胶电泳(DGGE)和温度梯度凝胶电泳(TGGE) | 第21页 |
3.6 随机扩增多态性DNA分析法(RAPD) | 第21-22页 |
3.7 扩増片段长度多态性技术(AFLP) | 第22页 |
3.8 单链构象多态性分析(SSCP) | 第22-23页 |
3.9 高通量测序方法 | 第23页 |
4 本研究的目的与意义 | 第23-24页 |
第二章 转cry1Ie基因抗虫玉米IE09S034 对土壤微生物群落结构的影响 | 第24-41页 |
1 材料 | 第24-26页 |
1.1 实验材料 | 第24页 |
1.2 试验地描述 | 第24页 |
1.3 样品采集 | 第24-25页 |
1.4 实验仪器和试剂 | 第25-26页 |
1.4.1 实验仪器 | 第25页 |
1.4.2 试剂配置 | 第25-26页 |
2 研究方法 | 第26-29页 |
2.1 变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析主要细菌群落结构的影响 | 第26-27页 |
2.1.1 土壤DNA的提取 | 第26页 |
2.1.2 细菌 16S rDNA的PCR扩增 | 第26-27页 |
2.1.3 变性梯度凝胶电泳 | 第27页 |
2.2 磷脂脂肪酸(PLFA)法分析土壤微生物群落结构动态变化 | 第27-29页 |
2.2.1 样品预处理 | 第27-28页 |
2.2.2 脂肪酸的提取 | 第28页 |
2.2.3 磷脂脂肪酸纯化 | 第28页 |
2.2.4 皂化和甲基化 | 第28-29页 |
2.2.5 磷脂脂肪酸检测 | 第29页 |
2.3 数据与图谱分析 | 第29页 |
3 结果与分析 | 第29-39页 |
3.1 PCR-DGGE分析转cry1Ie基因玉米对土壤微生物群落结构的影响 | 第29-32页 |
3.1.1 土壤样品总DNA的提取 | 第29-30页 |
3.1.2 细菌 16S rDNA V3 区PCR扩增 | 第30-31页 |
3.1.3 变性梯度凝胶电泳检测 | 第31-32页 |
3.2 PLFA分析转cry1Ie基因玉米对土壤微生物群落结构的影响 | 第32-39页 |
3.2.1 转cry1Ie基因抗虫玉米对土壤总微生物量的影响 | 第33-34页 |
3.2.2 转cry1Ie基因抗虫玉米对土壤细菌微生物量的影响 | 第34页 |
3.2.3 转cry1Ie基因抗虫玉米对土壤真菌微生物量的影响 | 第34-35页 |
3.2.4 转cry1Ie基因抗虫玉米对土壤细菌/真菌值微生物量的影响 | 第35-36页 |
3.2.5 转cry1Ie基因抗虫玉米对土壤GP/GN值微生物量的影响 | 第36-37页 |
3.2.6 PLFA主成分分析 | 第37-39页 |
4 讨论 | 第39-41页 |
第三章 转cry1Ie基因抗虫玉米IE09S034 对土壤肥力的影响 | 第41-66页 |
第一节 转cry1Ie基因抗虫玉米IE09S034 对土壤化学性质的影响 | 第41-55页 |
1 材料 | 第41-43页 |
1.1 实验材料 | 第41页 |
1.2 试验地描述 | 第41页 |
1.3 样品采集 | 第41页 |
1.4 实验试剂 | 第41-42页 |
1.5 仪器设备 | 第42页 |
1.6 试剂配制 | 第42-43页 |
2 方法 | 第43-49页 |
2.1 土壤水分测定 | 第43-44页 |
2.2 土壤pH值的测定(电位法) | 第44-45页 |
2.3 土壤有机质的测定(外加热重铬酸钾容量法) | 第45-46页 |
2.3.1 实验原理 | 第45页 |
2.3.2 操作步骤 | 第45页 |
2.3.3 结果计算 | 第45-46页 |
2.4 土壤碱解氮的测定(碱解扩散法) | 第46-47页 |
2.4.1 操作步骤 | 第46-47页 |
2.4.2 结果计算 | 第47页 |
2.5 土壤速效磷的测定(0.5 mol/L碳酸氢钠浸提) | 第47-48页 |
2.5.1 操作步骤 | 第47-48页 |
2.5.2 结果计算 | 第48页 |
2.6 土壤速效钾的测定(乙酸铵浸提—火焰光度法) | 第48页 |
2.6.1 操作步骤 | 第48页 |
2.6.2 结果计算 | 第48页 |
2.7 数据统计与分析 | 第48-49页 |
3 结果与分析 | 第49-53页 |
3.1 土壤含水量 | 第49页 |
3.2 转cry1Ie基因抗虫玉米对土壤有机质的影响 | 第49-50页 |
3.3 转基因玉米对土壤pH值的影响 | 第50-51页 |
3.4 转基因玉米对土壤碱解氮的影响 | 第51-52页 |
3.5 转基因玉米对土壤速效磷的影响 | 第52页 |
3.6 转基因玉米对土壤速效钾的影响 | 第52-53页 |
4 讨论 | 第53-55页 |
第二节 转cry1Ie基因抗虫玉米IE09S034 对土壤酶活性的影响 | 第55-66页 |
1 材料 | 第55-57页 |
1.1 实验材料 | 第55页 |
1.2 试验地描述 | 第55页 |
1.3 样品采集 | 第55页 |
1.4 仪器和试剂 | 第55-56页 |
1.5 试剂配制 | 第56-57页 |
1.5.1 脲酶测定所需试剂配制 | 第56页 |
1.5.2 蔗糖酶测定所需试剂配制 | 第56-57页 |
1.5.3 土壤磷酸酶活性测定所需试剂配制 | 第57页 |
2 土壤主要酶活性的测定 | 第57-60页 |
2.1 土壤脲酶活性测定 | 第57-58页 |
2.1.1 测定方法 | 第57-58页 |
2.1.2 计算方法 | 第58页 |
2.2 土壤磷酸酶活性测定 | 第58-59页 |
2.2.1 测定方法 | 第58-59页 |
2.2.2 计算方法 | 第59页 |
2.3 土壤蔗糖酶活性测定 | 第59-60页 |
2.3.1 测定方法 | 第59页 |
2.3.2 计算方法 | 第59-60页 |
3 结果与分析 | 第60-64页 |
3.1 转基因玉米对土壤脲酶活性的影响 | 第60-61页 |
3.2 转基因玉米对土壤蔗糖酶活性的影响 | 第61-62页 |
3.3 转基因玉米对土壤酸性磷酸酶活性影响 | 第62-63页 |
3.4 转基因玉米对土壤碱性磷酸酶活性的影响 | 第63-64页 |
4 讨论 | 第64-66页 |
第四章 全文总结 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-77页 |
攻读硕士期间发表论文情况 | 第77-78页 |
致谢 | 第78页 |