摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8页 |
第1章 绪论 | 第12-21页 |
1.1 叶酸及其转运体 | 第12-14页 |
1.1.1 叶酸 | 第12页 |
1.1.2 叶酸吸收和代谢 | 第12-13页 |
1.1.3 叶酸转运体 | 第13-14页 |
1.2 肝星状细胞和肝纤维化 | 第14-19页 |
1.2.1 HSCs的生物学性质 | 第15页 |
1.2.2 HSCs在正常肝脏中的作用 | 第15-16页 |
1.2.3 HSCs在肝损伤和肝纤维化中的作用 | 第16-19页 |
1.2.4 活化态HSCs和肝纤维化的解决 | 第19页 |
1.3 课题的提出和研究思路 | 第19-21页 |
第2章 大鼠原代HSCs的分离鉴定及其活化过程中叶酸摄取相关基因表达研究 | 第21-36页 |
2.1 实验材料 | 第21-25页 |
2.1.1 实验试剂 | 第21-24页 |
2.1.2 实验仪器 | 第24-25页 |
2.1.3 实验动物和细胞 | 第25页 |
2.2 实验方法 | 第25-31页 |
2.2.1 原代HSCs的分离 | 第25-26页 |
2.2.2 细胞的培养和观察 | 第26页 |
2.2.3 原代HSCs和T6细胞RNA相关操作 | 第26-28页 |
2.2.4 Western Blotting检测HSCs活化过程中蛋白表达 | 第28-30页 |
2.2.5 HSCs的细胞免疫荧光检测 | 第30-31页 |
2.2.6 统计学分析 | 第31页 |
2.3 结果分析 | 第31-35页 |
2.3.1 原代HSCs的分离培养和鉴定 | 第31-33页 |
2.3.2 原代HSCs活化过程中叶酸摄取相关基因的表达分析 | 第33-35页 |
2.4 本章小结 | 第35-36页 |
第3章 叶酸对HSC-T6细胞的再程序化作用研究 | 第36-46页 |
3.1 实验材料 | 第36-38页 |
3.1.1 实验试剂 | 第36-38页 |
3.1.2 实验仪器 | 第38页 |
3.1.3 细胞株 | 第38页 |
3.2 实验方法 | 第38-40页 |
3.2.1 CCK-8试剂盒检测叶酸对HSC-T6细胞活力影响 | 第38页 |
3.2.2 BrdU检测叶酸对HSC-T6细胞增殖影响 | 第38-39页 |
3.2.3 叶酸对HSC-T6细胞凋亡影响 | 第39-40页 |
3.2.4 划痕实验检测叶酸对HSC-T6细胞迁移行为影响 | 第40页 |
3.2.5 叶酸对HSC-T6细胞增殖和凋亡作用的蛋白表达检测 | 第40页 |
3.2.6 统计学分析 | 第40页 |
3.3 结果与讨论 | 第40-45页 |
3.3.1 叶酸对HSC-T6细胞活力影响 | 第40-41页 |
3.3.2 叶酸对HSC-T6细胞增殖的影响 | 第41-42页 |
3.3.3 叶酸对HSC-T6细胞凋亡影响 | 第42-43页 |
3.3.4 叶酸对HSC-T6细胞迁移行为影响 | 第43-45页 |
3.5 本章小结 | 第45-46页 |
第4章 叶酸对HSC-T6再程序化作用的可能机制探究 | 第46-55页 |
4.1 实验材料 | 第46-48页 |
4.1.1 实验试剂 | 第46-47页 |
4.1.2 实验仪器 | 第47-48页 |
4.1.3 细胞株 | 第48页 |
4.2 实验方法 | 第48-50页 |
4.2.1 RT-QPCR检测叶酸对HSC-T6细胞部分基因mRNA表达的影响 | 第48-49页 |
4.2.2 Western Blotting检测HSC-T6蛋白表达 | 第49-50页 |
4.2.3 统计学分析 | 第50页 |
4.3 结果与讨论 | 第50-53页 |
4.3.1 叶酸对HSC-T6细胞部分基因的mRNA表达的影响 | 第50-51页 |
4.3.2 叶酸通过ERK1/2信号通路影响HSC-T6细胞增殖 | 第51页 |
4.3.3 叶酸通过p53信号通路影响HSC-T6细胞凋亡 | 第51-52页 |
4.3.4 叶酸通过调控EMT转化相关基因表达调控HSC-T6细胞表型改变 | 第52-53页 |
4.4 本章小结 | 第53-55页 |
第5章 大鼠原代HSCs活化过程中CCN家族表达研究 | 第55-61页 |
5.1 实验材料 | 第56-57页 |
5.1.1 实验试剂 | 第56页 |
5.1.2 实验仪器 | 第56-57页 |
5.1.3 实验动物和细胞 | 第57页 |
5.2 实验方法 | 第57页 |
5.2.1 原代HSCs的分离及细胞培养 | 第57页 |
5.2.2 原代HSCs和T6细胞RNA相关操作 | 第57页 |
5.2.3 统计学分析 | 第57页 |
5.3 结果分析 | 第57-60页 |
5.3.1 原代HSCs活化过程中CCN家族基因的表达分析 | 第57-60页 |
5.4 本章小结 | 第60-61页 |
结论 | 第61-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-71页 |
攻读硕士期间发表论文 | 第71-72页 |
常用缩略词一览表 | 第72页 |