鸭坦布苏病毒的遗传演化及毒力减弱的分子基础
| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-20页 |
| 1.1 鸭坦布苏病毒概述 | 第14-17页 |
| 1.1.1 鸭坦布苏病毒全基因组结构及主要功能 | 第14-15页 |
| 1.1.2 鸭坦布苏病毒的侵入与繁殖 | 第15页 |
| 1.1.3 鸭坦布苏病毒的培养特性 | 第15页 |
| 1.1.4 鸭坦布苏病毒流行病学 | 第15-16页 |
| 1.1.5 鸭坦布苏病毒的分子诊断方法 | 第16页 |
| 1.1.6 鸭坦布苏病毒的血清学检测方法 | 第16页 |
| 1.1.7 鸭坦布苏病毒的预防与控制 | 第16-17页 |
| 1.2 反向遗传操作系统概述 | 第17-18页 |
| 1.2.1 病毒反向遗传操作系统概述 | 第17页 |
| 1.2.2 黄病毒反向遗传操作系统概述 | 第17页 |
| 1.2.3 黄病毒反向遗传操作系统的应用 | 第17-18页 |
| 1.3 研究目的与意义 | 第18-20页 |
| 第二章 鸭坦布苏病毒的遗传演化 | 第20-36页 |
| 2.1 材料 | 第20-24页 |
| 2.1.1 材料来源 | 第20-22页 |
| 2.1.2 主要实验试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 主要实验仪器和器材 | 第22-23页 |
| 2.1.4 引物序列 | 第23-24页 |
| 2.2 方法 | 第24-28页 |
| 2.2.1 样品的采集和处理 | 第24页 |
| 2.2.2 病毒的分离及纯化 | 第24页 |
| 2.2.3 RNA提取和RT-PCR鉴定 | 第24-25页 |
| 2.2.4 全基因组分段扩增和序列测定 | 第25页 |
| 2.2.5 系统进化树的绘制 | 第25-26页 |
| 2.2.6 TCID50的测定 | 第26页 |
| 2.2.7 组织样品和血清的制备 | 第26-27页 |
| 2.2.8 Blocking ELISA | 第27页 |
| 2.2.9 ELD50测定 | 第27页 |
| 2.2.10 鸭坦布苏病毒鸭子致病性实验 | 第27-28页 |
| 2.2.11 鸭坦布苏病毒小鼠致病性实验 | 第28页 |
| 2.3 结果 | 第28-34页 |
| 2.3.1 病毒分离鉴定结果 | 第28页 |
| 2.3.2 全基因组分段扩增结果 | 第28-29页 |
| 2.3.3 全基因组序列测定 | 第29页 |
| 2.3.4 系统进化树的分析 | 第29-32页 |
| 2.3.5 鸭坦布苏病毒对麻鸭的致病性实验 | 第32-33页 |
| 2.3.6 鸭坦布苏病毒对小鼠的致病性实验 | 第33-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 鸭坦布苏病毒毒力减弱的分子基础 | 第36-56页 |
| 3.1 材料 | 第36-40页 |
| 3.1.1 材料来源 | 第36页 |
| 3.1.2 主要实验试剂 | 第36-37页 |
| 3.1.3 主要培养基、培养液和缓冲液 | 第37-38页 |
| 3.1.4 引物 | 第38-40页 |
| 3.1.5 主要实验仪器 | 第40页 |
| 3.2 方法 | 第40-49页 |
| 3.2.1 RNA抽提及反转录 | 第40页 |
| 3.2.2 PCR扩增 | 第40页 |
| 3.2.3 目的片段磷酸化 | 第40-41页 |
| 3.2.4 目的片段与pSIMPLE连接 | 第41页 |
| 3.2.5 转化及鉴定 | 第41页 |
| 3.2.6 阳性质粒的抽提及测序 | 第41-42页 |
| 3.2.7 质粒的构建 | 第42-44页 |
| 3.2.8 救获毒全长cDNA的扩增 | 第44-47页 |
| 3.2.9 病毒的救获 | 第47-48页 |
| 3.2.10 救获毒株对麻鸭的致病性实验 | 第48-49页 |
| 3.3 结果 | 第49-54页 |
| 3.3.1 救获毒全长cDNA的扩增 | 第49-50页 |
| 3.3.2 拯救病毒的救获 | 第50-51页 |
| 3.3.3 救获毒株对麻鸭的致病性实验 | 第51-54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-56页 |
| 第四章 全文结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
