| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 第一章 前言 | 第8-20页 |
| 1.1 干旱胁迫研究进展 | 第8-15页 |
| 1.1.2 干旱胁迫的信号传导模式概述 | 第8-9页 |
| 1.1.3 ABA和干旱胁迫抗性 | 第9-10页 |
| 1.1.4 干旱胁迫调控ABA的生物合成与降解 | 第10页 |
| 1.1.5 干旱胁迫与ABA调控的基因表达 | 第10-12页 |
| 1.1.6 干旱胁迫与ABA信号通路的调控关系 | 第12-13页 |
| 1.1.7 ABI5与ABA信号通路的调控关系及研究进展 | 第13-15页 |
| 1.2 miR159研究进展 | 第15-18页 |
| 1.2.1 miR159的功能与作用 | 第15-16页 |
| 1.2.2 miR159与ABA信号通路 | 第16-18页 |
| 1.3 本课题研究意义 | 第18-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-23页 |
| 2.1.1 材料 | 第20页 |
| 2.1.2 仪器及试剂 | 第20-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-39页 |
| 2.2.1 拟南芥抗旱能力分析 | 第23-24页 |
| 2.2.1.1 拟南芥材料种植与干旱处理 | 第23-24页 |
| 2.2.2 拟南芥抗旱相关基因表达分析 | 第24-26页 |
| 2.2.2.1 拟南芥材料种植与干旱处理 | 第24页 |
| 2.2.2.2 拟南芥组织获取 | 第24页 |
| 2.2.2.3 拟南芥组织RNA提取 | 第24页 |
| 2.2.2.4 拟南芥组织cDNA制备 | 第24-26页 |
| 2.2.2.5 实时定量PCR | 第26页 |
| 2.2.3 构建与鉴定纯和突变体株系 | 第26-28页 |
| 2.2.3.1 拟南芥突变体杂交与初步筛选 | 第26-27页 |
| 2.2.3.2 拟南芥基因组粗提 | 第27页 |
| 2.2.3.3 纯合T-DNA插入PCR鉴定 | 第27-28页 |
| 2.2.4 拟南芥突变体ABA敏感性分析 | 第28-29页 |
| 2.2.4.1 ABA梯度浓度培养基配置 | 第28页 |
| 2.2.4.2 拟南芥种子消毒 | 第28页 |
| 2.2.4.3 拟南芥种子萌发率实验 | 第28页 |
| 2.2.4.4 拟南芥种子萌发后根生长实验 | 第28-29页 |
| 2.2.5 染色质免疫共沉淀实验 | 第29-32页 |
| 2.2.5.1 染色质固定 | 第29页 |
| 2.2.5.2 染色质抽提和声波破碎 | 第29-30页 |
| 2.2.5.3 免疫沉淀反应 | 第30-31页 |
| 2.2.5.4 反交联反应 | 第31-32页 |
| 2.2.6 载体构建及植物遗传转化 | 第32-39页 |
| 2.2.6.1 拟南芥基因组DNA精提 | 第32页 |
| 2.2.6.2 引物设计 | 第32-33页 |
| 2.2.6.3 目的基因克隆 | 第33-34页 |
| 2.2.6.4 载体线性化及连接目的片段 | 第34-35页 |
| 2.2.6.5 大肠杆菌转化 | 第35页 |
| 2.2.6.6 阳性克隆筛选与鉴定 | 第35-37页 |
| 2.2.6.7 根瘤农杆菌转化 | 第37页 |
| 2.2.6.8 农杆菌侵染拟南芥 | 第37-38页 |
| 2.2.6.9 转基因阳性植株筛选 | 第38-39页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第39-55页 |
| 3.1 拟南芥抗旱能力分析 | 第39-42页 |
| 3.2 拟南芥抗旱相关基因表达分析 | 第42-43页 |
| 3.3 miR159和ABI5遗传关系分析 | 第43-48页 |
| 3.4 MYB33是miR159调控抗旱的主要靶基因 | 第48-52页 |
| 3.5 miR159调控ABI5的分子机理研究 | 第52-53页 |
| 3.6 相关载体构建与转基因材料转化 | 第53-55页 |
| 第四章 结论与展望 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-66页 |
| 附表 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |