| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 绪论 | 第10-17页 |
| 1.1 日本沼虾生物学特性 | 第10-11页 |
| 1.2 参与甲壳动物蜕皮的主要激素 | 第11-12页 |
| 1.2.1 Y-器官和蜕皮激素 | 第11页 |
| 1.2.2 大颚器官和甲基法尼酯 | 第11-12页 |
| 1.2.3 X-器官窦腺复合体及蜕皮抑制激素 | 第12页 |
| 1.3 单克隆抗体技术 | 第12-16页 |
| 1.3.1 单克隆抗体的制备原理 | 第13-14页 |
| 1.3.2 单克隆抗体的应用 | 第14-16页 |
| 1.3.2.1 单克隆抗体技术在水产养殖中的应用 | 第14-15页 |
| 1.3.2.2 单克隆抗体在免疫定位中的应用 | 第15-16页 |
| 1.3.2.3 单克隆抗体在临床医学中的应用 | 第16页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第16-17页 |
| 第2章 日本沼虾蜕皮抑制激素蛋白的表达和纯化 | 第17-22页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 实验菌种 | 第17页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第17-18页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-20页 |
| 2.2.1 日本沼虾MIH蛋白的原核表达 | 第18-19页 |
| 2.2.2 日本沼虾MIH蛋白的纯化 | 第19页 |
| 2.2.3 日本沼虾MIH蛋白的浓缩换液 | 第19-20页 |
| 2.3 实验结果 | 第20页 |
| 2.4 讨论 | 第20-22页 |
| 第3章 小鼠免疫及间接ELISA方法的建立 | 第22-30页 |
| 3.1 实验材料 | 第22-23页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第22页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第23页 |
| 3.2 实验方法 | 第23-25页 |
| 3.2.1 小鼠免疫 | 第23-24页 |
| 3.2.2 间接ELISA方法的建立 | 第24-25页 |
| 3.2.2.1 间接ELISA检测方法的基本操作 | 第24页 |
| 3.2.2.2 抗原最佳包被浓度与待检血清最佳稀释度的确定 | 第24-25页 |
| 3.2.2.3 酶标二抗最佳工作浓度 | 第25页 |
| 3.2.3 小鼠血清效价的测定 | 第25页 |
| 3.3 实验结果 | 第25-28页 |
| 3.3.1 抗原最佳包被浓度与血清最佳稀释度的确定 | 第25-26页 |
| 3.3.2 酶标二抗最佳工作浓度的确定 | 第26-27页 |
| 3.3.3 小鼠的血清效价 | 第27-28页 |
| 3.4 讨论 | 第28-30页 |
| 3.4.1 小鼠免疫 | 第28-29页 |
| 3.4.2 间接ELISA方法的建立 | 第29-30页 |
| 第4章 蜕皮抑制激素单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 | 第30-42页 |
| 4.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 4.1.1 材料 | 第30页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第30页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第30-31页 |
| 4.2 实验方法 | 第31-36页 |
| 4.2.1 杂交瘤细胞株的建立 | 第31-34页 |
| 4.2.1.1 骨髓瘤细胞的准备 | 第31页 |
| 4.2.1.2 饲养细胞的制备 | 第31-32页 |
| 4.2.1.3 脾细胞悬液的制备 | 第32页 |
| 4.2.1.4 细胞融合 | 第32-33页 |
| 4.2.1.5 杂交瘤细胞的选择性培养 | 第33页 |
| 4.2.1.6 杂交瘤细胞的亚克隆 | 第33-34页 |
| 4.2.2 单克隆抗体的大量制备 | 第34-35页 |
| 4.2.3 单克隆抗体效价的测定 | 第35页 |
| 4.2.4 单克隆抗体的纯化 | 第35页 |
| 4.2.5 MIH单抗与日本沼虾血清中MIH蛋白的反应 | 第35-36页 |
| 4.3 实验结果 | 第36-40页 |
| 4.3.1 骨髓瘤细胞 | 第36-37页 |
| 4.3.2 饲养细胞 | 第37页 |
| 4.3.3 细胞融合及筛选 | 第37-39页 |
| 4.3.4 单克隆抗体的大量制备与效价测定 | 第39-40页 |
| 4.3.5 MIH单抗与日本沼虾血清中MIH蛋白的反应 | 第40页 |
| 4.4 讨论 | 第40-42页 |
| 4.4.1 细胞融合 | 第40-41页 |
| 4.4.2 单抗的大量制备 | 第41-42页 |
| 结论与展望 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 致谢 | 第48页 |
