摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 引言 | 第14-17页 |
第二章 下调HMGB1表达对食管鳞状细胞癌TE-1细胞放疗敏感性的影响 | 第17-41页 |
2.1 材料 | 第17-20页 |
2.1.1 细胞 | 第17页 |
2.1.2 主要试剂 | 第17-18页 |
2.1.3 主要仪器设备和耗材 | 第18-20页 |
2.2 常用试剂的配制 | 第20-23页 |
2.3 实验方法 | 第23-32页 |
2.3.1 食管鳞状细胞癌TE-1 细胞的培养 | 第23-25页 |
2.3.2 MTT实验 | 第25-26页 |
2.3.3 转染实验 | 第26-27页 |
2.3.4 提取RNA(teizol法提取) | 第27页 |
2.3.5 逆转录cDNA和荧光定量PCR | 第27-29页 |
2.3.6 Westernblot实验 | 第29-31页 |
2.3.7 克隆形成实验 | 第31-32页 |
2.3.8 统计学分析 | 第32页 |
2.4 结果 | 第32-38页 |
2.4.1 siHMGB1显著下调TE-1细胞HMGB1mRNA表达 | 第32-33页 |
2.4.2 siHMGB1显著下调TE-1细胞HMGB1蛋白表达 | 第33页 |
2.4.3 HMGB1沉默对TE-1细胞放疗后的体外增殖情况 | 第33-37页 |
2.4.4 HMGB1沉默后增强TE-1细胞体外放疗敏感性 | 第37-38页 |
2.5 讨论 | 第38-41页 |
第三章 下调HMGB1表达对食管鳞状细胞癌TE-1细胞放疗敏感性影响的机制研究 | 第41-53页 |
3.1 材料 | 第41页 |
3.1.1 主要试剂 | 第41页 |
3.1.2 主要仪器设备与耗材 | 第41页 |
3.2 常用试剂的配制 | 第41页 |
3.3 实验方法 | 第41-44页 |
3.3.1 转染实验 | 第41-42页 |
3.3.2 Trizol法提取总RNA | 第42页 |
3.3.3 逆转录cDNA和荧光定量PCR | 第42页 |
3.3.4 流式细胞仪检测细胞的凋亡 | 第42页 |
3.3.5 流式细胞仪检测ROS水平 | 第42-43页 |
3.3.6 流式细胞仪检测γH2AX水平 | 第43页 |
3.3.7 Westernblot实验 | 第43页 |
3.3.8 统计学分析 | 第43-44页 |
3.4 结果 | 第44-50页 |
3.4.1 HMGB1沉默增强TE-1细胞放疗诱导的凋亡 | 第44-46页 |
3.4.2 HMGB1沉默增强TE-1细胞放疗诱导的DNA损伤 | 第46-47页 |
3.4.3 HMGB1沉默增强TE-1细胞放疗诱导的NADPH氧化酶来源的ROS水平 | 第47-49页 |
3.4.4 JNK和p38通路活化参与到HMGB1沉默提高TE-1细胞的放疗敏感性 | 第49-50页 |
3.5 讨论 | 第50-53页 |
第四章 结论与展望 | 第53-54页 |
4.1 主要结论 | 第53页 |
4.2 展望 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第62页 |