摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第11-19页 |
1.1 植原体概况 | 第11-12页 |
1.2 小麦蓝矮植原体特点 | 第12-14页 |
1.2.1 小麦蓝矮病的分布,病害症状及其寄主范围 | 第13页 |
1.2.2 小麦蓝矮植原体传播介体 | 第13-14页 |
1.2.3 防治方法 | 第14页 |
1.3 植原体基因组及其致病因子研究 | 第14-18页 |
1.3.1 当前已测序完成植原体基因组 | 第14-15页 |
1.3.2 植原体效应蛋白的研究进展 | 第15-18页 |
1.4 研究意义及其目的 | 第18-19页 |
第二章 植原体核心基因组及其组间特异性基因鉴定 | 第19-34页 |
2.1 实验材料和仪器 | 第19-20页 |
2.1.1 实验材料 | 第19-20页 |
2.1.2 实验仪器及其软件 | 第20页 |
2.2 实验方法 | 第20-22页 |
2.2.1 基因序列下载以及预测编码蛋白 | 第20页 |
2.2.2 16S rRNA分子进化树构建 | 第20-21页 |
2.2.3 构建密码子以及氨基酸使用热图 | 第21页 |
2.2.4 鉴定核心基因组 | 第21页 |
2.2.5 组间特异性基因鉴定 | 第21页 |
2.2.6 潜在分泌性蛋白鉴定 | 第21-22页 |
2.3 实验结果 | 第22-32页 |
2.3.1 16S rRNA分子进化树与密码子氨基酸聚类热图比较 | 第22-24页 |
2.3.2 5 个种属10个不同株系植原体的核心基因组分析 | 第24-29页 |
2.3.3 组间特异性基因 | 第29-32页 |
2.4 讨论 | 第32-34页 |
第三章 小麦蓝矮植原体特异性检测及其免疫膜蛋白分子进化 | 第34-49页 |
3.1 材料、试剂和仪器 | 第34-40页 |
3.1.1 材料 | 第34页 |
3.1.2 试剂 | 第34-39页 |
3.1.3 主要实验仪器 | 第39-40页 |
3.1.4 软件 | 第40页 |
3.2 实验方法 | 第40-45页 |
3.2.1 实验中用到的引物 | 第40页 |
3.2.2 感染WBD长春花的DNA提取 | 第40-41页 |
3.2.3 感染WBD长春花的RNA提取 | 第41页 |
3.2.4 反转录 | 第41-42页 |
3.2.5 连接转化 | 第42页 |
3.2.6 感受态大肠杆菌DH5α 制备 | 第42页 |
3.2.7 Western Blotting步骤 | 第42-44页 |
3.2.8 可溶性蛋白纯化 | 第44-45页 |
3.3 实验结果 | 第45-48页 |
3.3.1 小麦蓝矮免疫膜蛋白Imp克隆 | 第45页 |
3.3.2 免疫膜蛋白在不同植原体基因组上的位置 | 第45页 |
3.3.3 小麦蓝矮植原体免疫膜蛋白Imp分子进化树分析 | 第45-46页 |
3.3.4 Imp蛋白表达质粒构建及其表达 | 第46-47页 |
3.3.5 小麦蓝矮植原体特异性检测 | 第47-48页 |
3.4 讨论 | 第48-49页 |
第四章 小麦蓝矮植原体Imp与昆虫寄主的肌动蛋白互作 | 第49-55页 |
4.1 实验材料及其试剂 | 第49-50页 |
4.1.1 材料 | 第49页 |
4.1.2 实验试剂 | 第49-50页 |
4.2 实验方法 | 第50-51页 |
4.2.1 昆虫蛋白提取 | 第50页 |
4.2.2 一维FWB膜蛋白提取 | 第50页 |
4.2.3 Far Western blots | 第50-51页 |
4.2.4 体外PULL-DOWN实验 | 第51页 |
4.3 实验结果 | 第51-53页 |
4.3.1 Dot-Far Western Blots | 第51-52页 |
4.3.2 1D Far-Western Blots | 第52页 |
4.3.3 体外PULL-DOWN | 第52-53页 |
4.4 实验讨论 | 第53-55页 |
第五章 全文结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者简介 | 第61页 |