| 学位论文数据集 | 第3-4页 |
| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 符号说明 | 第16-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-29页 |
| 1.1 肝纤维化的研究概况 | 第17-19页 |
| 1.1.1 肝纤维化的简介 | 第17-18页 |
| 1.1.2 肝纤维化的研究机制的进展 | 第18-19页 |
| 1.2 脂肪肝的研究概况 | 第19-21页 |
| 1.2.1 脂肪肝的简介 | 第19-20页 |
| 1.2.2 脂肪肝的最新研究进展 | 第20-21页 |
| 1.3 miRNA的研究概况 | 第21-24页 |
| 1.3.1 miRNA调控机理 | 第21-23页 |
| 1.3.2 miRNA与癌症及其他疾病的研究 | 第23-24页 |
| 1.3.3 miRNA的靶向运输载体 | 第24页 |
| 1.4 miRNA在脂肪肝和肝纤维化中的应用 | 第24-28页 |
| 1.4.1 miRNA在脂肪肝中的应用 | 第24-25页 |
| 1.4.2 miRNA在肝纤维化中的应用 | 第25-28页 |
| 1.5 论文主要研究内容 | 第28-29页 |
| 第二章 miRNA调控HSC细胞凋亡对肝纤维化的作用研究 | 第29-49页 |
| 2.1 实验研究目的及意义 | 第29页 |
| 2.2 实验材料及仪器 | 第29-30页 |
| 2.2.1 实验主要仪器 | 第29-30页 |
| 2.2.2 实验主要试剂 | 第30页 |
| 2.3 细胞的准备与培养 | 第30-31页 |
| 2.3.1 细胞复苏 | 第30-31页 |
| 2.3.2 细胞传代 | 第31页 |
| 2.3.3 细胞冻存 | 第31页 |
| 2.4 细胞转染实验 | 第31-34页 |
| 2.4.1 miRNA及其同序列荧光标记DNA合成 | 第31页 |
| 2.4.2 细胞计数 | 第31-32页 |
| 2.4.3 细胞转染 | 第32-34页 |
| 2.5 qRT-PCR实验 | 第34-37页 |
| 2.5.1 引物设计 | 第34-35页 |
| 2.5.2 细胞中RNA提取 | 第35-36页 |
| 2.5.3 反转录PCR实验 | 第36页 |
| 2.5.4 qPCR实验 | 第36-37页 |
| 2.6 Western blot实验 | 第37-40页 |
| 2.6.1 细胞总蛋白质提取 | 第37页 |
| 2.6.2 Western blot | 第37-40页 |
| 2.7 TUNEL染色实验 | 第40页 |
| 2.8 实验结果与讨论 | 第40-47页 |
| 2.8.1 细胞转染实验结论 | 第40-41页 |
| 2.8.2 qRT-PCR实验结论 | 第41-44页 |
| 2.8.2.1 miR-15b的qRT-PCR实验结论 | 第41-44页 |
| 2.8.2.2 Bcl-2的mRNA的qRT-PCR实验结论 | 第44页 |
| 2.8.3 Western blot实验结论 | 第44-45页 |
| 2.8.4 TUNEL染色实验结论 | 第45-47页 |
| 2.9 本章小结 | 第47-49页 |
| 第三章 miRNA对体外非酒精性脂肪肝细胞的作用研究 | 第49-63页 |
| 3.1 研究目的及意义 | 第49页 |
| 3.2 实验材料及方法 | 第49-51页 |
| 3.2.1 实验主要仪器 | 第49-50页 |
| 3.2.2 实验主要试剂 | 第50页 |
| 3.2.3 脂肪肝细胞模型的建立与培养 | 第50-51页 |
| 3.2.3.1 HepG_2细胞培养 | 第51页 |
| 3.2.3.2 建立脂肪肝细胞模型 | 第51页 |
| 3.3 细胞转染实验 | 第51-52页 |
| 3.3.1 检验脂肪肝细胞模型建立是否成功 | 第51-52页 |
| 3.3.2 细胞转染 | 第52页 |
| 3.4 qRT-PCR实验 | 第52-55页 |
| 3.4.1 引物设计 | 第52-54页 |
| 3.4.2 细胞中总RNA提取 | 第54页 |
| 3.4.3 qRT-PCR实验程序 | 第54-55页 |
| 3.5 Western blot实验 | 第55-58页 |
| 3.5.1 提取细胞中总蛋白 | 第55-56页 |
| 3.5.2 Western blot | 第56-58页 |
| 3.6 实验结果与讨论 | 第58-61页 |
| 3.6.1 脂肪肝细胞模型检测结论 | 第58-59页 |
| 3.6.2 qRT-PCR实验结论 | 第59-60页 |
| 3.6.2.1 miR-130a的qRT-PCR实验结论 | 第59页 |
| 3.6.2.2 FAS和PPAR-γ的mRNA的qRT-PCR实验结论 | 第59-60页 |
| 3.6.3 Western blot实验结论 | 第60-61页 |
| 3.7 本章小结 | 第61-63页 |
| 第四章 miR-130a对非酒精性脂肪肝模型小鼠的作用研究 | 第63-75页 |
| 4.1 实验试剂与仪器 | 第63-64页 |
| 4.2 动物实验 | 第64-65页 |
| 4.2.1 脂肪肝小鼠模型建立 | 第64页 |
| 4.2.2 脂质体包裹miR-130a | 第64-65页 |
| 4.2.3 尾静脉注射 | 第65页 |
| 4.2.4 动物取材 | 第65页 |
| 4.3 qRT-PCR实验 | 第65-67页 |
| 4.3.1 RNA引物设计合成 | 第65页 |
| 4.3.2 小鼠肝脏组织总RNA提取 | 第65-66页 |
| 4.3.3 qRT-PCR实验程序 | 第66-67页 |
| 4.4 Western blot实验 | 第67-68页 |
| 4.5 实验结果与讨论 | 第68-74页 |
| 4.5.1 小鼠体重称量结论 | 第68页 |
| 4.5.2 肝脏病理学切片检测结论 | 第68-71页 |
| 4.5.3 qRT-PCR实验结论 | 第71-72页 |
| 4.5.3.1 miR-130a的qRT-PCR实验结论 | 第71页 |
| 4.5.3.2 FAS和PPAR-γ的mRNA的qRT-PCR实验结论 | 第71-72页 |
| 4.5.4 Western blot实验结论 | 第72-73页 |
| 4.5.5 血清生化检测结论 | 第73-74页 |
| 4.6 本章小结 | 第74-75页 |
| 第五章 结论与展望 | 第75-77页 |
| 5.1 结论 | 第75页 |
| 5.2 展望 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-81页 |
| 附录 | 第81-83页 |
| 致谢 | 第83-85页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第85-87页 |
| 作者和导师简介 | 第87-88页 |
| 附件 | 第88-89页 |
