摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第9-19页 |
1.1 铁元素概况 | 第9-10页 |
1.1.1 铁元素的稳态形式 | 第9-10页 |
1.1.2 铁的吸收机制 | 第10页 |
1.2 铁载体的概念、种类与检测方法 | 第10-14页 |
1.2.1 铁载体的概念 | 第10-11页 |
1.2.2 铁载体的种类 | 第11-12页 |
1.2.3 铁载体的检测方法 | 第12-14页 |
1.3 铁载体的合成机制 | 第14-15页 |
1.4 铁载体的应用 | 第15-16页 |
1.4.1 铁载体在医药方面的应用 | 第15页 |
1.4.2 铁载体在工农业方面的应用 | 第15页 |
1.4.3 铁载体在环境修复上的应用 | 第15-16页 |
1.5 铁载体在生物防治方面的研究概况 | 第16页 |
1.6 微生物诱变育种 | 第16-17页 |
1.7 课题的立题依据 | 第17页 |
1.8 课题的研究内容 | 第17-19页 |
第二章 材料与方法 | 第19-25页 |
2.1 实验菌株 | 第19页 |
2.2 主要试剂与仪器 | 第19页 |
2.2.1 主要试剂及酶 | 第19页 |
2.2.2 主要仪器和设备 | 第19页 |
2.3 培养基 | 第19-20页 |
2.4 溶液的配置 | 第20页 |
2.5 实验方法 | 第20-25页 |
2.5.1 菌种活化 | 第20页 |
2.5.2 菌株产铁载体及类型鉴定 | 第20页 |
2.5.3 铁载体定量检测 | 第20-21页 |
2.5.4 菌株产铁载体曲线 | 第21页 |
2.5.5 菌株诱变 | 第21-22页 |
2.5.6 正突变率 | 第22页 |
2.5.7 突变菌株初筛 | 第22页 |
2.5.8 突变菌株复筛 | 第22页 |
2.5.9 二次诱变 | 第22页 |
2.5.10 诱变后菌株铁载体产量的优化 | 第22页 |
2.5.11 蛋白SDS-PAGE电泳分析 | 第22页 |
2.5.12 蛋白质的MALDI-TOF MS质谱分析 | 第22-23页 |
2.5.13 基因组分析 | 第23页 |
2.5.14 B. amyloliquefaciens SYBC H47基因组及所需质粒的提取 | 第23页 |
2.5.15 引物的设计 | 第23页 |
2.5.16 目的基因的扩增与重组表达菌体的构建 | 第23-24页 |
2.5.17 重组菌株的诱导表达 | 第24页 |
2.5.18 重组菌株铁载体产量测定 | 第24-25页 |
第三章 结果与讨论 | 第25-43页 |
3.1 ARTP诱变B. amyloliquefaciens SYBC H47提高铁载体的产量 | 第25-35页 |
3.1.1 铁载体的鉴定 | 第25-26页 |
3.1.2 菌株产铁载体类型的鉴定 | 第26-27页 |
3.1.3 菌株铁载体产量测定 | 第27页 |
3.1.4 最佳诱变条件的确定 | 第27-28页 |
3.1.5 高产铁载体菌株的筛选及验证 | 第28-30页 |
3.1.6 突变体T7-14 遗传稳定性的验证 | 第30-31页 |
3.1.7 突变体T7-14 发酵培养基的单因素优化 | 第31-35页 |
3.2 突变体T7-14 胞内表达蛋白的质谱鉴定 | 第35-37页 |
3.3 B. amyloliquefaciens SYBC H47基因组分析 | 第37-39页 |
3.4 dhbA、dhbB、dhb C三基因的分子克隆与异源表达 | 第39-42页 |
3.4.1 基因的克隆 | 第39-40页 |
3.4.2 重组质粒的诱导表达 | 第40-41页 |
3.4.3 重组菌株铁载体产量测定 | 第41-42页 |
3.5 突变菌株铁载体产量提高机制的分析 | 第42-43页 |
主要结论与展望 | 第43-44页 |
主要结论 | 第43页 |
展望 | 第43-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
附录1:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第50-51页 |
附录2:基因序列 | 第51-52页 |