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铁载体高产菌株的ARTP选育及其铁载体产量提高机理的初步分析

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第一章 绪论第9-19页
    1.1 铁元素概况第9-10页
        1.1.1 铁元素的稳态形式第9-10页
        1.1.2 铁的吸收机制第10页
    1.2 铁载体的概念、种类与检测方法第10-14页
        1.2.1 铁载体的概念第10-11页
        1.2.2 铁载体的种类第11-12页
        1.2.3 铁载体的检测方法第12-14页
    1.3 铁载体的合成机制第14-15页
    1.4 铁载体的应用第15-16页
        1.4.1 铁载体在医药方面的应用第15页
        1.4.2 铁载体在工农业方面的应用第15页
        1.4.3 铁载体在环境修复上的应用第15-16页
    1.5 铁载体在生物防治方面的研究概况第16页
    1.6 微生物诱变育种第16-17页
    1.7 课题的立题依据第17页
    1.8 课题的研究内容第17-19页
第二章 材料与方法第19-25页
    2.1 实验菌株第19页
    2.2 主要试剂与仪器第19页
        2.2.1 主要试剂及酶第19页
        2.2.2 主要仪器和设备第19页
    2.3 培养基第19-20页
    2.4 溶液的配置第20页
    2.5 实验方法第20-25页
        2.5.1 菌种活化第20页
        2.5.2 菌株产铁载体及类型鉴定第20页
        2.5.3 铁载体定量检测第20-21页
        2.5.4 菌株产铁载体曲线第21页
        2.5.5 菌株诱变第21-22页
        2.5.6 正突变率第22页
        2.5.7 突变菌株初筛第22页
        2.5.8 突变菌株复筛第22页
        2.5.9 二次诱变第22页
        2.5.10 诱变后菌株铁载体产量的优化第22页
        2.5.11 蛋白SDS-PAGE电泳分析第22页
        2.5.12 蛋白质的MALDI-TOF MS质谱分析第22-23页
        2.5.13 基因组分析第23页
        2.5.14 B. amyloliquefaciens SYBC H47基因组及所需质粒的提取第23页
        2.5.15 引物的设计第23页
        2.5.16 目的基因的扩增与重组表达菌体的构建第23-24页
        2.5.17 重组菌株的诱导表达第24页
        2.5.18 重组菌株铁载体产量测定第24-25页
第三章 结果与讨论第25-43页
    3.1 ARTP诱变B. amyloliquefaciens SYBC H47提高铁载体的产量第25-35页
        3.1.1 铁载体的鉴定第25-26页
        3.1.2 菌株产铁载体类型的鉴定第26-27页
        3.1.3 菌株铁载体产量测定第27页
        3.1.4 最佳诱变条件的确定第27-28页
        3.1.5 高产铁载体菌株的筛选及验证第28-30页
        3.1.6 突变体T7-14 遗传稳定性的验证第30-31页
        3.1.7 突变体T7-14 发酵培养基的单因素优化第31-35页
    3.2 突变体T7-14 胞内表达蛋白的质谱鉴定第35-37页
    3.3 B. amyloliquefaciens SYBC H47基因组分析第37-39页
    3.4 dhbA、dhbB、dhb C三基因的分子克隆与异源表达第39-42页
        3.4.1 基因的克隆第39-40页
        3.4.2 重组质粒的诱导表达第40-41页
        3.4.3 重组菌株铁载体产量测定第41-42页
    3.5 突变菌株铁载体产量提高机制的分析第42-43页
主要结论与展望第43-44页
    主要结论第43页
    展望第43-44页
致谢第44-45页
参考文献第45-50页
附录1:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第50-51页
附录2:基因序列第51-52页

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