| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 英文缩写表 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-19页 |
| 引言 | 第10页 |
| 1 黄曲霉毒素 | 第10-13页 |
| ·黄曲霉毒素污染现状 | 第11-12页 |
| ·黄曲霉毒素毒性 | 第12页 |
| ·黄曲霉毒素的代谢过程及致癌机理 | 第12-13页 |
| 2 异柠檬酸脱氢酶 | 第13-15页 |
| ·异柠檬酸脱氢酶分类及结构组成 | 第14页 |
| ·异柠檬酸脱氢酶的功能 | 第14-15页 |
| ·异柠檬酸脱氢酶ɑ亚基 | 第15页 |
| 3 RNA 干扰 | 第15-19页 |
| ·RNA 干扰的发现 | 第16页 |
| ·RNA 干扰的分类及机制 | 第16-17页 |
| ·RNAi 技术的特征 | 第17页 |
| ·RNAi 的生物学功能 | 第17-18页 |
| ·RNAi 的生物学应用 | 第18-19页 |
| 第二章 IDH3ɑ多克隆抗体的制备 | 第19-37页 |
| 1 实验材料和方法 | 第19-28页 |
| ·主要载体、菌株、动物 | 第19页 |
| ·主要试剂与药品 | 第19页 |
| ·主要仪器设备 | 第19-20页 |
| ·小鼠肝脏RNA 的提取 | 第20页 |
| ·idh3ɑ基因的获得 | 第20-21页 |
| ·原核表达载体pET28a-idh3ɑ的构建 | 第21-24页 |
| ·蛋白表达及纯化 | 第24-26页 |
| ·小鼠的免疫及多克隆抗体的获得 | 第26-28页 |
| 2 结果及分析 | 第28-35页 |
| ·小鼠肝脏RNA 的提取 | 第28页 |
| ·idh3ɑ基因的获得 | 第28-29页 |
| ·原核表达载体pET28a（+）-idh3ɑ的构建 | 第29-31页 |
| ·蛋白表达及纯化 | 第31-33页 |
| ·小鼠的免疫及多克隆抗体的获得 | 第33-35页 |
| 讨论 | 第35页 |
| 结论 | 第35-37页 |
| 第三章 黄曲霉毒素B1 的提取 | 第37-43页 |
| 1 实验材料和方法 | 第37-39页 |
| ·菌株 | 第37页 |
| ·主要试剂与药品 | 第37页 |
| ·主要仪器设备 | 第37页 |
| ·黄曲霉毒素B1 标准菌株的培养 | 第37页 |
| ·黄曲霉毒素B1 的提取 | 第37-38页 |
| ·黄曲霉毒素B1 的浓度测定 | 第38-39页 |
| 2 结果和分析 | 第39-42页 |
| ·黄曲霉毒素菌株的培养 | 第39页 |
| ·黄曲霉毒素的提取 | 第39-40页 |
| ·黄曲霉毒素B1 的浓度测定 | 第40-42页 |
| 讨论 | 第42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 第四章 黄曲霉毒素对细胞和小鼠的作用 | 第43-53页 |
| 1 实验材料和方法 | 第43-46页 |
| ·主要细胞及实验动物 | 第43页 |
| ·主要试剂与药品 | 第43页 |
| ·主要仪器设备 | 第43页 |
| ·黄曲霉毒素B1 感染细胞 | 第43-44页 |
| ·黄曲霉毒素B1 感染小鼠 | 第44页 |
| ·Western Blot 检测IDH3ɑ蛋白表达变化 | 第44-46页 |
| 2 结果和分析 | 第46-52页 |
| ·AFB1 对细胞形态学的变化 | 第46页 |
| ·AFB1 对细胞凋亡的影响 | 第46-50页 |
| ·AFB1 对细胞及肝脏IDH3ɑ蛋白的影响 | 第50-52页 |
| 讨论 | 第52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 第五章 IDH3ɑ过表达与RNA 干扰细胞模型的建立 | 第53-72页 |
| 1 实验材料和方法 | 第53-61页 |
| ·主要菌株、细胞及质粒 | 第53页 |
| ·主要实验试剂和药品 | 第53页 |
| ·主要实验仪器和设备 | 第53-54页 |
| ·idh3ɑ哺乳动物细胞过表达载体的构建 | 第54-55页 |
| ·pGPU6/GFP/neo-shRNA 干扰载体的构建 | 第55-58页 |
| ·脂质体转染细胞（24 孔板） | 第58页 |
| ·荧光定量PCR 定量鉴定基因干扰 | 第58-60页 |
| ·Western Blot 检测IDH3ɑ蛋白过表达和干扰 | 第60-61页 |
| 2 结果与分析 | 第61-70页 |
| ·idh3ɑ哺乳动物细胞过表达载体的构建 | 第61-63页 |
| ·干扰载体pGPU6/GFP/neo-shRNA 的构建 | 第63-65页 |
| ·荧光定量PCR 定量鉴定RNAi 效果 | 第65-69页 |
| ·Western Blot 检测IDH3ɑ蛋白过表达和干扰 | 第69-70页 |
| 讨论 | 第70-71页 |
| 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 附录 | 第78-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
