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大花君子兰查尔酮合酶和黄烷酮-3-羟化酶基因的克隆及其功能验证

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1. 引言第10-16页
    1.1 植物花色及影响其形成的因素第10页
    1.2 类黄酮第10-11页
        1.2.1 类黄酮的结构第10-11页
        1.2.2 类黄酮的生物学功能第11页
    1.3 花色苷第11-13页
        1.3.1 花色苷的基本结构第11-12页
        1.3.2 花色苷生物合成途径第12-13页
    1.4 查尔酮合酶的研究进展第13-14页
    1.5 黄烷酮3羟化酶的研究进展第14页
    1.6 本论文的研究意义及内容第14-16页
2. 实验材料和方法第16-29页
    2.1 实验材料第16-21页
        2.1.1 植物材料第16页
        2.1.2 质粒和菌种第16页
        2.1.3 主要试剂第16-17页
        2.1.4 主要试剂的配置方法第17-19页
        2.1.5 主要仪器设备第19-20页
        2.1.6 引物的合成第20-21页
    2.2 实验方法第21-29页
        2.2.1 君子兰花色苷组成第21页
        2.2.2 君子兰着色组织RNA的提取及cDNA的合成第21-22页
        2.2.3 君子兰CmCHS和CmF3H基因克隆第22-25页
        2.2.4 CmCHS和CmF3H基因生物信息学分析第25页
        2.2.5 CmCHS和CmF3H基因表达量分析第25页
        2.2.6 载体构建第25-26页
        2.2.7 转拟南芥突变体及其表型观察和代谢产物分析第26-27页
        2.2.8 CmCHS体外酶活反应的检测第27-29页
3. 结果与分析第29-53页
    3.1 君子兰花色苷组成成分分析第29-30页
    3.2 君子兰CmCHS和CmF3H基因的克隆第30-37页
        3.2.1 君子兰CmCHS和CmF3H基因中间片段的扩增第30-32页
        3.2.2 君子兰CmCHS和CmF3H基因 3’末端和 5’末端的扩增第32-35页
        3.2.3 君子兰CmCHS和CmF3H基因cDNA全长的克隆第35-37页
    3.3 君子兰CmCHS和CmF3H基因cDNA全长生物信息学分析第37-40页
    3.4 君子兰CmCHS和CmF3H基因在主要着色组织中的表达量分析第40-41页
    3.5 载体构建第41-43页
        3.5.1 真核载体构建第41-42页
        3.5.2 原核载体构建第42-43页
    3.6 CmCHS和CmF3H基因转拟南芥突变体鉴定基因功能第43-49页
        3.6.1 CmCHS转基因鉴定基因功能第43-46页
        3.6.2 CmF3H转基因鉴定基因功能第46-49页
    3.7 CmCHS体外酶活反应鉴定基因功能第49-53页
        3.7.1 可溶性重组蛋白的制备与纯化第49-51页
        3.7.2 CmCHS体外酶活反应产物的检测第51-53页
4. 讨论第53-55页
    4.1 君子兰花色苷组成分析第53页
    4.2 生物信息学分析第53-54页
    4.3 表达模式分析第54页
    4.4 功能验证分析第54-55页
5. 主要结论与创新点第55-56页
    结论第55页
    创新点第55-56页
参考文献第56-61页
致谢第61-62页
在校期间发表论文情况第62页
在校期间参加科研项目情况第62页

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