| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 前言 | 第8-24页 |
| 1.1 细胞信号转导 | 第8页 |
| 1.2 酿酒酵母Ras/cAMP/PKA信号通路元件 | 第8-15页 |
| 1.2.1 酿酒酵母Ras/cAMP/PKA信号通路主要组成元件 | 第9页 |
| 1.2.2 G蛋白偶联受体体系 | 第9-11页 |
| 1.2.3 Ras蛋白 | 第11-13页 |
| 1.2.4 腺苷酸环化酶Cyr1 | 第13-14页 |
| 1.2.5 环腺苷酸磷酸二酯酶Pde1和Pde2 | 第14-15页 |
| 1.3 Ras/cAMP/PKA通路主要靶标蛋白激酶A及蛋白激酶A与胁迫耐受性关系 | 第15-21页 |
| 1.3.1 Ras/cAMP/PKA信号通路主要靶标蛋白激酶PKA | 第15-18页 |
| 1.3.2 Ras/cAMP/PKA信号通路和靶标蛋白激酶A与细胞胁迫耐受性关系 | 第18-21页 |
| 1.3.3 蛋白激酶A对于细胞生长和周期的调控 | 第21页 |
| 1.4 本课题的立题依据及研究内容 | 第21-24页 |
| 1.4.1 本课题的立题依据 | 第21-22页 |
| 1.4.2 本课题的研究内容 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-27页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第24页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.4 培养基 | 第26页 |
| 2.1.5 主要溶液 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-34页 |
| 2.2.1 PCR反应 | 第27-29页 |
| 2.2.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第29-30页 |
| 2.2.3 PCR产物纯化回收 | 第30页 |
| 2.2.4 大肠杆菌质粒的提取 | 第30页 |
| 2.2.5 酵母基因组的提取 | 第30-31页 |
| 2.2.6 酵母高效醋酸锂转化法 | 第31-32页 |
| 2.2.7 酵母基因组的粗提 | 第32页 |
| 2.2.8 生长曲线的测定 | 第32页 |
| 2.2.9 稀释点板实验 | 第32页 |
| 2.2.10 水浴热激实验 | 第32页 |
| 2.2.11 细胞周期的测定 | 第32-34页 |
| 3 结果与讨论 | 第34-60页 |
| 3.1 Tpk亚基对于细胞生长和耐热性的影响 | 第34-43页 |
| 3.1.1 突变株的构建 | 第34-38页 |
| 3.1.2 Tpk亚基对于生长性能的影响 | 第38-39页 |
| 3.1.3 Tpk亚基对于耐热性的影响 | 第39-41页 |
| 3.1.4 Tpk亚基对于细胞周期的影响 | 第41-42页 |
| 3.1.5 小结 | 第42-43页 |
| 3.2 两个Tpk催化亚基协同作用对细胞生长和耐热性的影响 | 第43-52页 |
| 3.2.1 突变株的构建 | 第43-47页 |
| 3.2.2 两个Tpk催化亚基协同作用对细胞生长性能的影响 | 第47-48页 |
| 3.2.3 两个Tpk催化亚基协同作用对细胞耐热性的影响 | 第48-50页 |
| 3.2.4 两个Tpk亚基协同作用对菌株在细胞周期的影响 | 第50-51页 |
| 3.2.5 小结 | 第51-52页 |
| 3.3 游离Tpk催化亚基对于细胞生长和耐热性的影响 | 第52-60页 |
| 3.3.1 突变株的构建 | 第52-55页 |
| 3.3.2 游离Tpk亚基对于细胞生长性能的影响 | 第55-56页 |
| 3.3.3 游离Tpk亚基对细胞耐热性的影响 | 第56-58页 |
| 3.3.4 游离Tpk亚基对菌株细胞周期的影响 | 第58页 |
| 3.3.5 小结 | 第58-60页 |
| 4 结论 | 第60-61页 |
| 5 展望 | 第61-62页 |
| 6 参考文献 | 第62-70页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文 | 第70-71页 |
| 8 致谢 | 第71页 |
