摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 前言 | 第11-22页 |
1. PSⅠ和PSⅡ | 第11-12页 |
2. PSⅡ的组装与修复 | 第12-15页 |
3. 亲免蛋白的发现 | 第15-18页 |
4. 亲免蛋白的研究进展 | 第18-20页 |
4.1 亲免蛋白的结构特点 | 第18页 |
4.2 亲免蛋白的功能研究 | 第18-19页 |
4.3 叶绿体CYP亲环素蛋白的研究现状 | 第19-20页 |
5. 本研究的主要内容和意义 | 第20-22页 |
第二章 CYPs纯合突变体种子的鉴定 | 第22-29页 |
1. 实验材料 | 第22页 |
2. 实验试剂和仪器 | 第22页 |
2.1 实验试剂 | 第22页 |
2.2 实验仪器 | 第22页 |
3. 实验内容 | 第22-24页 |
3.1 提取纯合突变体植株的基因组DNA | 第23页 |
3.2 PCR鉴定 | 第23-24页 |
4. 结果与讨论 | 第24-29页 |
第三章 pRI101-AN-CYPs-His的载体构建 | 第29-51页 |
1. 宿主菌和质粒载体 | 第29-30页 |
2. 实验试剂和仪器 | 第30-32页 |
2.1 实验试剂 | 第30-31页 |
2.3 实验仪器 | 第31-32页 |
3. 实验内容 | 第32-43页 |
3.1 获得目的基因 | 第32-36页 |
3.2 将目的基因构建到载体pMD18-T上 | 第36-39页 |
3.3 将含His标签的目的基因构建到双元载体pRI101-AN上 | 第39-43页 |
4. 结果与讨论 | 第43-51页 |
4.1 叶绿体CYP亲环素蛋白基因tair搜索 | 第43-44页 |
4.2 CYPs-His与双元载体pRI101-AN的构建 | 第44-51页 |
第四章 获取转基因植株 | 第51-66页 |
1. 实验材料 | 第51页 |
2. 实验试剂和仪器 | 第51-53页 |
2.1 实验试剂 | 第51-52页 |
2.2 实验仪器 | 第52-53页 |
3. 实验内容 | 第53-58页 |
3.1 将构建好的载体转化至根瘤农杆菌 | 第53页 |
3.2 浸花法浸染拟南芥植株 | 第53-54页 |
3.3 筛选转基因植株 | 第54-55页 |
3.4 转基因植株DNA水平上的鉴定 | 第55-56页 |
3.5 转基因植株蛋白水平上的鉴定 | 第56-58页 |
4. 结果与讨论 | 第58-66页 |
4.1 转基因植株筛选的结果 | 第58-59页 |
4.2 转基因植株DNA水平鉴定的结果 | 第59-62页 |
4.3 转基因植株蛋白水平鉴定的结果 | 第62-66页 |
第五章 通过亲和层析获得CYPs蛋白及其互作蛋白 | 第66-78页 |
1. 亲和层析的原理 | 第66页 |
2. 实验试剂和仪器 | 第66-67页 |
2.1 实验试剂 | 第66-67页 |
2.2 实验仪器 | 第67页 |
3. 实验内容 | 第67-70页 |
3.1 提转基因植物的叶绿体 | 第67-68页 |
3.2 提取叶绿体中的蛋白 | 第68-69页 |
3.3 亲和层析获取CYPs的蛋白及其互作蛋白 | 第69-70页 |
3.4 浓缩目的蛋白 | 第70页 |
4. 结果与讨论 | 第70-78页 |
4.1 提取叶绿体蛋白时对CYPs蛋白的检测 | 第70-74页 |
4.2 获得CYPs的蛋白及其互作蛋白 | 第74-78页 |
第六章 质谱分析CYPs的蛋白及其互作蛋白 | 第78-89页 |
1. 质谱分析的简介 | 第78页 |
2. 实验试剂和仪器 | 第78页 |
2.1 实验试剂 | 第78页 |
2.2 实验仪器 | 第78页 |
3. 实验内容 | 第78-79页 |
3.1 蛋白样品预处理 | 第78-79页 |
3.2 蛋白样品液相色谱 | 第79页 |
3.3 蛋白样品质谱分析 | 第79页 |
4. 结果与讨论 | 第79-89页 |
4.1 CYP20-2质谱分析的结果与讨论 | 第79-86页 |
4.2 CYP37质谱分析的结果与讨论 | 第86-89页 |
结论 | 第89-91页 |
参考文献 | 第91-105页 |
附录:英文缩写 | 第105-106页 |
致谢 | 第106页 |