| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第1章 绪论 | 第10-21页 |
| 1.1 博落回 | 第10-11页 |
| 1.1.1 博落回植物的生物学特征 | 第10页 |
| 1.1.2 博落回植物的用途 | 第10页 |
| 1.1.3 博落回安全性评价 | 第10-11页 |
| 1.2 植物组织培养、植物基因工程与农作物遗传改良的相关概述 | 第11页 |
| 1.3 遗传转化的相关方法 | 第11-13页 |
| 1.3.1 基因枪法 | 第12页 |
| 1.3.2 农杆菌介导法 | 第12页 |
| 1.3.3 花粉管通道法 | 第12-13页 |
| 1.4 遗传转化相关影响因素 | 第13-16页 |
| 1.4.1 遗传转化外植体的选择 | 第13页 |
| 1.4.2 农杆菌的菌株 | 第13-14页 |
| 1.4.3 农杆菌侵染浓度与时间 | 第14页 |
| 1.4.4 提高转化率物质的添加 | 第14-15页 |
| 1.4.5 预培养时间 | 第15页 |
| 1.4.6 农杆菌抑制剂的选择 | 第15页 |
| 1.4.7 筛选剂的选择及筛选策略 | 第15-16页 |
| 1.5 CBF/DREB转录因子与矮化现象 | 第16-18页 |
| 1.5.1 植株矮化且抗逆性提高 | 第17页 |
| 1.5.2 植株矮化但抗逆性不提高 | 第17-18页 |
| 1.5.3 植株抗逆性提高但不矮化 | 第18页 |
| 1.5.4 植株抗性既不提高,也不矮化 | 第18页 |
| 1.6 试验前期工作基础 | 第18-20页 |
| 1.6.1 博落回体细胞胚的发生与植株再生 | 第18-19页 |
| 1.6.2 博落回花药离体培养和植株再生 | 第19页 |
| 1.6.3 试验所用相关技术 | 第19-20页 |
| 1.7 研究目的与意义 | 第20-21页 |
| 第2章 MtDREB1C基因植物表达载体构建 | 第21-33页 |
| 2.1 试验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 菌株与载体 | 第21页 |
| 2.1.2 培养基 | 第21-22页 |
| 2.2 试验主要试剂 | 第22页 |
| 2.3 试验主要仪器设备 | 第22页 |
| 2.4 试验方法 | 第22-29页 |
| 2.4.1 不同酶对扩增目的基因、启动子和终止子的影响 | 第22-26页 |
| 2.4.2 线性载体的制备 | 第26-27页 |
| 2.4.3 pCAMBIA1300-MtDREB1C表达载体的制备 | 第27-28页 |
| 2.4.4 含MtDREB1C农杆菌的转化 | 第28-29页 |
| 2.5 结果与分析 | 第29-31页 |
| 2.5.1 不同酶对目的基因、启动子和终止子产物的扩增结果 | 第29页 |
| 2.5.2 pCAMBIA1300-MtDREB1C表达载体的获得 | 第29-30页 |
| 2.5.3 含MtDREB1C农杆菌的制备 | 第30-31页 |
| 2.6 小结 | 第31页 |
| 2.7 讨论 | 第31-33页 |
| 第3章 博落回遗传转化体系的优化 | 第33-40页 |
| 3.1 试验材料 | 第33-34页 |
| 3.1.1 供试材料 | 第33页 |
| 3.1.2 培养基 | 第33-34页 |
| 3.2 试验主要试剂 | 第34页 |
| 3.3 试验方法 | 第34页 |
| 3.3.1 KM敏感性试验 | 第34页 |
| 3.3.2 农杆菌抑制剂敏感性试验 | 第34页 |
| 3.3.3 KM与Cef共同作用试验 | 第34页 |
| 3.4 结果与分析 | 第34-38页 |
| 3.4.1 KM敏感性试验 | 第34-36页 |
| 3.4.2 农杆菌抑制剂敏感性试验 | 第36-37页 |
| 3.4.3 KM与Cef共同作用试验 | 第37-38页 |
| 3.5 小结 | 第38页 |
| 3.6 讨论 | 第38-40页 |
| 第4章 MtDREB1C博落回遗传转化及相关鉴定 | 第40-51页 |
| 4.1 试验材料 | 第40-41页 |
| 4.1.1 供试材料 | 第40-41页 |
| 4.1.2 培养基 | 第41页 |
| 4.2 试验主要试剂 | 第41页 |
| 4.3 试验方法 | 第41-45页 |
| 4.3.1 制备MtDREB1C农杆菌侵染液 | 第41-42页 |
| 4.3.2 筛选转化愈伤组织 | 第42页 |
| 4.3.3 部分转化植株的分子检测 | 第42-44页 |
| 4.3.4 总RNA的提取 | 第44页 |
| 4.3.5 cDNA第一链的合成 | 第44-45页 |
| 4.3.6 RT-PCR检测 | 第45页 |
| 4.4 结果与分析 | 第45-48页 |
| 4.4.1 含MtDREB1C基因农杆菌的制备 | 第45页 |
| 4.4.2 部分阳性植株进行PCR初步检测 | 第45-46页 |
| 4.4.3 博落回遗传转化数据统计 | 第46-47页 |
| 4.4.4 RT-PCR检测 | 第47-48页 |
| 4.5 小结 | 第48-49页 |
| 4.6 讨论 | 第49-51页 |
| 第5章 结论 | 第51-53页 |
| 5.1 全文结论 | 第51页 |
| 5.2 创新点 | 第51-52页 |
| 5.3 下一步工作 | 第52页 |
| 5.4 展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 缩略词表 | 第60-61页 |
| 附录 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 个人简历 | 第63页 |
