缩略语表 | 第7-10页 |
英文摘要 | 第10-13页 |
中文摘要 | 第14-17页 |
第一章 前言 | 第17-20页 |
1.1 选题缘由 | 第17页 |
1.2 研究背景 | 第17-18页 |
1.3 研究意义 | 第18-19页 |
1.4 研究内容及方法 | 第19-20页 |
第二章 Ndk是一种PA的宿主应答蛋白 | 第20-29页 |
2.1 ndk基因在PA感染宿主时明显下调 | 第20-25页 |
2.1.1 试剂与材料 | 第21-22页 |
2.1.2 实验方法 | 第22-25页 |
2.1.3 结果与讨论 | 第25页 |
2.2 ndk基因表达下调不依赖于PA与宿主细胞直接的相互作用 | 第25-29页 |
2.2.1 试剂与材料 | 第25-26页 |
2.2.2 实验方法 | 第26-28页 |
2.2.3 结果与讨论 | 第28-29页 |
第三章 Ndk在调节PA对宿主致病性中的作用 | 第29-65页 |
3.1 PA基因突变菌株构建 | 第29-38页 |
3.1.1 试剂与材料 | 第29-31页 |
3.1.2 实验方法 | 第31-37页 |
3.1.3 结果与讨论 | 第37-38页 |
3.2 Ndk通过调节T3SS影响PA对宿主的致病性 | 第38-46页 |
3.2.1 试剂与材料 | 第38-40页 |
3.2.2 实验方法 | 第40-43页 |
3.2.3 结果与讨论 | 第43-46页 |
3.3 Ndk通过调节T3SS影响PA的细胞毒性 | 第46-56页 |
3.3.1 ndk基因敲除通过上调T3SS表达水平增强PA的细胞毒性 | 第47-52页 |
3.3.1.1 试剂与材料 | 第47-48页 |
3.3.1.2 实验方法 | 第48-50页 |
3.3.1.3 结果与讨论 | 第50-52页 |
3.3.2 ndk基因敲除通过上调T3SS表达水平促进细胞凋亡 | 第52-56页 |
3.3.2.1 试剂与材料 | 第53-54页 |
3.3.2.2 实验方法 | 第54页 |
3.3.2.3 结果与讨论 | 第54-56页 |
3.4 Ndk通过T3SS影响PA细胞毒性的相关机制 | 第56-65页 |
3.4.1 Ndk通过调节T3SS效应蛋白转运影响PA的细胞毒性 | 第56-62页 |
3.4.1.1 试剂与材料 | 第56-59页 |
3.4.1.2 实验方法 | 第59-60页 |
3.4.1.3 结果与讨论 | 第60-62页 |
3.4.2 Ndk通过调节T3SS表达水平影响细胞膜的通透性 | 第62-65页 |
3.4.2.1 试剂与材料 | 第62-63页 |
3.4.2.2 实验方法 | 第63页 |
3.4.2.3 结果与讨论 | 第63-65页 |
第四章 Ndk对PA全基因组基因表达的影响 | 第65-75页 |
4.1 转录组测序样品准备及测序 | 第65-69页 |
4.1.1 试剂与材料 | 第65-66页 |
4.1.2 实验方法 | 第66页 |
4.1.3 结果与讨论 | 第66-69页 |
4.2 差异表达基因的GO功能及KEGG代谢通路分析 | 第69-75页 |
4.2.1 分析方法 | 第69-70页 |
4.2.2 结果与讨论 | 第70-75页 |
第五章 Ndk对PA毒力相关表型的影响 | 第75-101页 |
5.1 Ndk对PA胞外毒力因子产生的影响 | 第75-83页 |
5.1.1 试剂与材料 | 第75-77页 |
5.1.2 实验方法 | 第77-79页 |
5.1.3 结果与讨论 | 第79-83页 |
5.2 Ndk对PA T3SS的影响 | 第83-95页 |
5.2.1 RT-qPCR验证Ndk对T33S基因表达的影响 | 第83-88页 |
5.2.1.1 试剂与材料 | 第83-84页 |
5.2.1.2 实验方法 | 第84-86页 |
5.2.1.3 结果与讨论 | 第86-88页 |
5.2.2 Exs A在Ndk对T3SS基因表达调节中的作用 | 第88-91页 |
5.2.2.1 试剂与材料 | 第88-89页 |
5.2.2.2 实验方法 | 第89页 |
5.2.2.3 结果与讨论 | 第89-91页 |
5.2.3 Western blot验证Ndk对T3SS蛋白表达的影响 | 第91-95页 |
5.2.3.1 试剂与材料 | 第91-92页 |
5.2.3.2 实验方法 | 第92-93页 |
5.2.3.3 结果与讨论 | 第93-95页 |
5.3 Ndk对PA运动的影响 | 第95-98页 |
5.3.1 试剂与材料 | 第95-96页 |
5.3.2 实验方法 | 第96-97页 |
5.3.3 结果与讨论 | 第97-98页 |
5.4 Ndk对PA生物膜形成的影响 | 第98-101页 |
5.4.1 试剂与材料 | 第98-99页 |
5.4.2 实验方法 | 第99页 |
5.4.3 结果与讨论 | 第99-101页 |
第六章 Ndk对PA QS系统的调节作用 | 第101-110页 |
6.1 Ndk对PA QS相关基因表达的影响 | 第101-104页 |
6.1.1 试剂与材料 | 第101-102页 |
6.1.2 实验方法 | 第102-103页 |
6.1.3 结果与讨论 | 第103-104页 |
6.2 Ndk对PA QS信号分子合成的影响 | 第104-110页 |
6.2.1 试剂与材料 | 第104-105页 |
6.2.2 实验方法 | 第105-107页 |
6.2.3 结果与讨论 | 第107-110页 |
第七章 Ndk通过QS系统调节PA毒力相关表型 | 第110-123页 |
7.1 Ndk通过QS系统调节胞外毒力相关基因表达及合成 | 第110-114页 |
7.1.1 试剂与材料 | 第110-111页 |
7.1.2 实验方法 | 第111-112页 |
7.1.3 结果与讨论 | 第112-114页 |
7.2 Ndk通过调节QS系统抑制T3SS表达水平 | 第114-118页 |
7.2.1 试剂与材料 | 第115-116页 |
7.2.2 实验方法 | 第116-117页 |
7.2.3 结果与讨论 | 第117-118页 |
7.3 Ndk对PA毒力相关表型的调节作用不依赖于其激酶活性 | 第118-123页 |
7.3.1 试剂与材料 | 第119-120页 |
7.3.2 实验方法 | 第120-121页 |
7.3.3 结果与讨论 | 第121-123页 |
第八章 Ndk对PA毒力调节的生物学意义 | 第123-124页 |
全文总结 | 第124-125页 |
参考文献 | 第125-134页 |
文献综述 Nucleoside diphosphate kinase (Ndk): a pleiotropic effector manipulatingbacterial virulence and adaptive responses | 第134-171页 |
References | 第159-171页 |
附录 | 第171-189页 |
攻读博士学位期间的科研成果 | 第189-190页 |
致谢 | 第190页 |