| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 前言 | 第8-14页 |
| 实验材料及方法 | 第14-36页 |
| 一、实验材料 | 第14-17页 |
| 1. 主要仪器 | 第14-15页 |
| 2. 主要试剂 | 第15页 |
| 3. 实验动物，菌毒株，载体质粒和哺乳动物培养细胞 | 第15-17页 |
| 二、实验方法 | 第17-36页 |
| 1. pETP6重组质粒构建及鉴定 | 第17-20页 |
| 2. pETP6v载体质粒的构建及鉴定 | 第20-28页 |
| 3. 含有VP6蛋白基因pETP6F载体质粒的构建 | 第28页 |
| 4. 携带RV VP7抗原表位重组表达质粒构建及鉴定 | 第28-31页 |
| 5. 重组VP6载体蛋白和重组嵌合蛋白VP6/EP的表达及检测 | 第31页 |
| 6. 重组载体蛋白(rVP6F)和重组嵌合蛋白的纯化 | 第31页 |
| 7. Bradford法测定纯化蛋白的浓度 | 第31-32页 |
| 8. MA104细胞复苏与传代培养 | 第32-33页 |
| 9. RV增殖 | 第33页 |
| 10. RV的纯化与浓缩 | 第33页 |
| 11. 微量滴定法测定SAll与Wa病毒感染性滴度 | 第33-34页 |
| 12. 动物免疫及血清抗体的制备 | 第34页 |
| 13. 重组VP6载体蛋白和重组嵌合蛋白免疫血清中和抗体效价的检测 | 第34-35页 |
| 14. Western blot检测纯化的重组嵌合蛋白的免疫原性 | 第35-36页 |
| 结果与分析 | 第36-47页 |
| 1. 质粒的构建 | 第36-39页 |
| 2. 重组嵌合蛋白的表达及PAGE检测 | 第39-40页 |
| 3. 重组嵌合蛋白的纯化及PAGE检测 | 第40-41页 |
| 4. 纯化蛋白浓度的测定 | 第41-42页 |
| 5. RV感染性滴度的检测 | 第42页 |
| 6. 免疫动物血清中和抗体检测 | 第42-43页 |
| 7 Western blot检测重组嵌合蛋白的免疫原性 | 第43-47页 |
| 讨论 | 第47-49页 |
| 小结 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 附录 | 第54-71页 |
| (一) 缩略词 | 第54-56页 |
| (二) 主要溶液配方 | 第56-63页 |
| (三) 主要实验方法 | 第63-69页 |
| (四) TB-Chen株VP6编码基因核苷酸序列及氨基酸序列 | 第69-70页 |
| (五) TB-Chen株VP6F载体编码基因核苷酸序列 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 研究生简历 | 第72-73页 |
