| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 缩略词 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 上篇 文献综述 | 第14-48页 |
| 第一章 肉鸡股骨头坏死研究进展 | 第14-30页 |
| 1 肉鸡股骨头坏死 | 第14-15页 |
| 2 股骨头坏死病因和发病机制 | 第15-20页 |
| ·创伤性股骨头坏死 | 第15-17页 |
| ·非创伤性股骨头坏死 | 第17-20页 |
| ·脂肪代谢紊乱和脂肪栓子 | 第17-18页 |
| ·皮质类固醇类激素(Glucocorticosteroids,GCs) | 第18页 |
| ·自愈作用 | 第18-19页 |
| ·血管发生抑制 | 第19页 |
| ·机械压力 | 第19页 |
| ·细胞凋亡 | 第19页 |
| ·血管内凝血 | 第19-20页 |
| 3 临床症状 | 第20页 |
| 4 病理变化 | 第20-24页 |
| 5 小结 | 第24-25页 |
| 参考文献 | 第25-30页 |
| 第二章 软骨内成骨的调控 | 第30-48页 |
| 1 间充质凝聚物(mesenchymal condensations,MCS) | 第30-31页 |
| 2 软骨细胞分化 | 第31-33页 |
| ·Sox蛋白 | 第32页 |
| ·胞外信号调节 | 第32-33页 |
| 3 生长板生长发育 | 第33-40页 |
| ·生长板生长胞外调节因子 | 第34-39页 |
| ·甲状旁腺相关肽((parathyroid hormone-related peptide,PTHrP) | 第34-36页 |
| ·IHH | 第36-37页 |
| ·PTHrP-Ihh信号轴负反馈调节系统 | 第37-38页 |
| ·FGF | 第38页 |
| ·BMP | 第38页 |
| ·WNT | 第38页 |
| ·NOTCH | 第38-39页 |
| ·核因子对生长板的调节 | 第39-40页 |
| 4 小结 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-48页 |
| 下篇 试验研究 | 第48-94页 |
| 第三章 IHH/PTHRP信号轴在肉鸡股骨头坏死病理发生中的调控作用 | 第48-74页 |
| 1 材料与方法 | 第49-55页 |
| ·主要仪器 | 第49-50页 |
| ·主要试剂 | 第50页 |
| ·试验动物 | 第50页 |
| ·样品采集 | 第50-51页 |
| ·生化指标检测 | 第51页 |
| ·骨指标测定 | 第51-52页 |
| ·骨指数测定 | 第51页 |
| ·骨放射密度测定 | 第51页 |
| ·骨强度测定 | 第51-52页 |
| ·实时荧光定量PCR检测相关基因mRNA相对表达量 | 第52-53页 |
| ·组织中Toatal RNA提取纯化 | 第52页 |
| ·样cDNA制备 | 第52页 |
| ·引物设计与合成 | 第52-53页 |
| ·Realtime PCR与结果分析 | 第53页 |
| ·石蜡切片制作及HE染色 | 第53-55页 |
| ·载玻片防脱片预处理 | 第53-54页 |
| ·组织脱钙处理 | 第54页 |
| ·脱水 | 第54页 |
| ·透明 | 第54页 |
| ·浸蜡与包埋 | 第54页 |
| ·切片 | 第54页 |
| ·HE染色 | 第54-55页 |
| ·免疫组织化学检测 | 第55页 |
| 2 数据分析与统计 | 第55页 |
| 3 结果与分析 | 第55-66页 |
| ·FHN评分统计结果 | 第55-57页 |
| ·体重、肝指数、采食量变化 | 第57页 |
| ·生化标志物变化 | 第57-58页 |
| ·骨生长参数统计结果 | 第58-59页 |
| ·VEGF、PTHrP、Ihh、GLI2、Bcl2、BMP6、MMP9等基因的表达变化 | 第59-62页 |
| ·组织学检测结果 | 第62-66页 |
| ·HE染色结果 | 第62-64页 |
| ·Ⅹ型胶原、Ⅱ型胶原免疫组织化学检测结果 | 第64-66页 |
| 4 讨论 | 第66-71页 |
| ·甲泼尼龙建立肉鸡股骨头坏死模型 | 第66-68页 |
| ·诱导股骨头坏死模型骨指数和骨骼代谢标志物变化 | 第68页 |
| ·Ihh-PTHrP信号在FHN发生中的作用 | 第68-71页 |
| 参考文献 | 第71-74页 |
| 第四章 Ihh/PTHrP信号轴对肉鸡软骨细胞增殖、分化、 | 第74-94页 |
| 1 材料和方法 | 第75-81页 |
| ·试验材料 | 第75-76页 |
| ·主要仪器和设备 | 第75-76页 |
| ·试验试剂 | 第76页 |
| ·试验动物 | 第76页 |
| ·软骨细胞原代培养 | 第76页 |
| ·MTT法检测细胞活性 | 第76-77页 |
| ·ALP活性检测 | 第77-78页 |
| ·二乙醇胺(DEA)缓冲液配制 | 第77页 |
| ·对硝基酚(PNP)标准液与裂解液TritonX-100配制配制 | 第77页 |
| ·ALP浓度测定 | 第77-78页 |
| ·实时荧光定量PCR检测软骨细胞相关基因mRNA相对表达量 | 第78-79页 |
| ·Total RNA的提取与纯化 | 第78页 |
| ·引物设计与合成 | 第78-79页 |
| ·荧光定量PCR | 第79页 |
| ·蛋白免疫印迹检查蛋白相对表达量 | 第79-81页 |
| ·样品制备 | 第79页 |
| ·BCA法蛋白浓度测定：参照1.4.4 | 第79页 |
| ·样品处理 | 第79-80页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳 | 第80页 |
| ·转印 | 第80页 |
| ·免疫反应 | 第80页 |
| ·化学发光反应 | 第80页 |
| ·凝胶分析 | 第80-81页 |
| 2 数据分析及统计 | 第81页 |
| 3 结果与分析 | 第81-87页 |
| ·软骨细胞增殖活性(MTT) | 第81页 |
| ·ALP活性检测结果 | 第81页 |
| ·PTHrP、Ihh和Ⅹ型胶原等基因的表达量变化 | 第81页 |
| ·Ihh、Ⅱ型胶原和Ⅹ型胶原蛋白表达量变化 | 第81-87页 |
| 4 讨论 | 第87-88页 |
| 5 小结 | 第88-91页 |
| 参考文献 | 第91-94页 |
| 全文总结 | 第94-96页 |
| 攻读硕士期间发表论文 | 第96-98页 |
| 致谢 | 第98页 |
