量子点聚合体在蛋白质定量检测及超高分辨率定位研究中的应用

【摘要】：量子点(Quantum Dot,QD)是一种半导体纳米发光材料。与传统有机荧光染料相比,量子点具有吸收光谱宽、发射光谱窄、量子产率高、抗漂白性能强等诸多特点,在化学分析、生物传感、分子影像等领域得到了广泛应用。本论文以单分子宽场显微技术为手段,研究量子点聚合体在蛋白质定量检测及超高分辨率定位上的应用。具体内容如下:1、量子点团聚体聚合度的测量。以单个量子点光谱成像法,监测量子点团聚物的光漂白和光谱蓝移过程,根据量子点光谱蓝移与漂白的不同步性,计量团聚体中量子点的个数。量子点团聚体由QD-Biotin和链酶亲和素特异性结合而成。当链酶亲和素的浓度在0 nM–25 nM时,量子点团聚体的平均聚合度随其浓度的增加而线性增大。2、量子点聚合度的影响因素及聚合度在蛋白质定量检测中的应用。探讨了蛋白质浓度、离子强度、缓冲液pH值、反应温度、反应时间等因素对量子点团聚程度的影响。在条件优化的基础上,以生物素化的抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ-Biotin)为例,考察了量子点团聚物聚合度与其浓度的关系,依此建立了生物素化蛋白质的全新定量方法。3、量子点聚合体的超高分辨率定位及影响因素研究。考察了量子点超分辨定位准确性的影响因素,如曝光时间、增益、外力等。根据量子点的眨眼及光谱蓝移现象,对衍射极限范围内的量子点团聚体中的多个量子点分别超定位,初步研究了量子点聚合体中量子点间的相互关系。
【关键词】：量子点聚合体 链酶亲和素 抗凝血酶Ⅲ 蛋白质定量 量子点光谱蓝移 超高分辨率定位
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：TQ937;O657.3