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野生蕉β-1,3葡聚糖酶基因克隆及抗寒相关功能分析

缩写词第1-9页
摘要第9-13页
Abstract第13-18页
第一章 引言第18-25页
 1 植物抗寒研究进展第18-20页
   ·植物低温为害生理第18-19页
   ·植物抗寒指标第19页
   ·植物冷传导途径第19-20页
 2 芭蕉属植物抗寒相关研究第20-21页
   ·芭蕉属植物的低温为害生理第20-21页
   ·芭蕉属植物低温伤害发生规律第21页
   ·芭蕉属植物抗寒相关基因的研究第21页
 3 植物β-1,3葡聚糖酶的研究进展第21-23页
   ·β-1,3葡聚糖酶的功能第21-22页
   ·β-1,3葡聚糖酶的分类第22-23页
 4 本研究的意义及主要内容第23-25页
   ·本研究的意义第23-24页
   ·研究的主要内容第24-25页
第二章 芭蕉属植物低温下的生理生化研究第25-37页
 第一节 低温下芭蕉属植物的电解质渗出率测定第25-31页
  1 材料与方法第25-26页
   ·材料第25-26页
   ·方法第26页
     ·低温预处理第26页
     ·处理条件第26页
     ·电导率测定第26页
     ·半致死温度计算第26页
  2 结果与分析第26-29页
   ·低温胁迫下10种芭蕉属植物的相对电导率(REC)变化第26-27页
   ·低温胁迫下10种芭蕉属植物的半致死温度(LT_(50))确定第27-28页
   ·三明野生蕉的耐受低温确定第28-29页
  3. 讨论第29-31页
   ·芭蕉属植物的抗寒差异分析第29-30页
   ·植物能够启动多次抗寒响应第30页
   ·10种芭蕉属植物适宜种植的区域探讨第30-31页
 第二节 低温下三明野生蕉β-1,3葡聚糖酶活性变化第31-37页
  1 材料与方法第31-32页
   ·材料第31页
   ·方法第31-32页
     ·材料处理第31页
     ·葡萄糖标准曲线制作第31-32页
     ·粗酶液提取第32页
     ·待测样品制备第32页
     ·DNS法测定还原糖生成量第32页
  2 结果与分析第32-35页
   ·不同温度处理下三明野生蕉叶片表面变化第32-33页
   ·不同温度处理下β-1,3葡聚糖酶活性变化第33-35页
  3 讨论第35-37页
   ·β-1,3葡聚糖酶在内的PR蛋白具有重要的抗寒功能第35页
   ·β-1,3葡聚糖酶可能参与了植物的抗寒及抗冻响应第35-37页
第三章 基于香蕉基因组数据库的GSP全基因家族功能与进化分析第37-53页
 1 材料与方法第37-38页
   ·GSP家族基因成员获得与验证第37页
   ·GSP系统进化树构建及基因结构分析第37-38页
   ·GSP家族基因在染色体上的定位与基因复制事件推测第38页
 2 结果与分析第38-51页
   ·尖叶蕉与长梗蕉GSP家族基因序列的获得第38-40页
   ·尖叶蕉GSP家族基因分类及功能分析第40-41页
   ·尖叶蕉与长梗蕉GSP基因家族比较与进化分析第41-48页
   ·尖叶蕉GSP家族基因的染色体定位与进化分析第48-51页
 3 讨论第51-53页
   ·GSP功能具有多样性和保守性第51页
   ·GSP抗寒及PR相关功能可能来源于外源基因的插入第51-53页
第四章 野生蕉抗寒相关Mugsps的克隆分析第53-63页
 1 材料与方法第53-55页
   ·材料第53页
   ·方法第53-55页
     ·三明野生蕉总RNA提取及cDNA合成第53页
     ·三明野生蕉DNA提取第53-54页
     ·Mugsps的cDNA和DNA克隆及分析第54-55页
 2 结果与分析第55-60页
   ·三明野生蕉Mugsps的cDNA和DNA序列获得第55-56页
   ·三明野生蕉、尖叶蕉及长梗蕉的β-1,3葡聚糖酶基因序列比对分析第56-58页
   ·三明野生蕉Mugsps的生物信息学分析第58-60页
 3 讨论第60-63页
   ·Mugsps可变剪接参与植物抗寒第60-61页
   ·Mugsps可能参与抗寒相关蛋白激酶MAPK调控途径第61页
   ·Mugsps可能属于一类新的PR相关β-1,3葡聚糖酶基因第61-63页
第五章 野生蕉抗寒相关Mugsps的亚细胞定位分析第63-69页
 1 材料与方法第63-64页
   ·材料第63页
   ·方法第63-64页
     ·三明野生蕉总RNA的提取及cDNA合成第63页
     ·引物设计与PCR扩增第63-64页
     ·融合表达载体构建第64页
     ·表达载体转化洋葱表皮细胞及显微观察第64页
 2 结果与分析第64-67页
   ·常温下Mugsp1.2、Mugsp2、Mugsp4的亚细胞定位第64-66页
   ·低温诱导Mugsp1.2、Mugsp2、Mugsp4定位改变第66-67页
 3 讨论第67-69页
   ·β-1,3葡聚糖酶的膜定位是行使多种功能的基础第67页
   ·低温下Mugsps可能参与植物抗寒途径的上游调控第67-69页
第六章 野生蕉抗寒相关Mugsps的实时荧光定量表达分析第69-76页
 1 材料与方法第69-70页
   ·材料第69页
   ·方法第69-70页
     ·三明野生蕉材料处理及总RNA提取、cDNA合成第69页
     ·实时荧光定量PCR引物设计第69-70页
     ·荧光定量PCR扩增第70页
 2 结果与分析第70-74页
   ·不同温度处理下的三明野生蕉叶片形态变化第70-71页
   ·不同低温处理下Mugsps表达分析第71-72页
   ·低温及SA处理后Mugsps表达分析第72-74页
 3 讨论第74-76页
   ·Mugsps协同抵御植物低温胁迫第74页
   ·低温下SA可能通过保护细胞膜推迟对Mugsps的诱导第74-75页
   ·Mugsps可能作为植物抗寒途径的早期信号传导因子第75-76页
第七章 结论第76-80页
参考文献第80-88页
附录第88-97页
 图版Ⅰ 三明野生蕉Mugsps的序列信息第88-92页
 图版Ⅱ 三明野生蕉Mugsps生物信息学预测结果第92-97页
致谢第97页

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