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外源因子对桦褐孔菌法呢基焦磷酸合酶合成三萜的影响

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
前言第11-12页
第一篇 文献综述第12-22页
 第一章 桦褐孔菌概述第12-16页
   ·桦褐孔菌的分类及形态学概述第12页
   ·桦褐孔菌的化学成分第12-14页
   ·桦褐孔菌的药用价值第14-16页
     ·抗肿瘤第14页
     ·降血糖第14页
     ·改善心血管系统第14页
     ·抗病毒第14页
     ·增强免疫和抗氧化第14-15页
     ·诱导肿瘤细胞凋亡第15页
     ·抗炎止痛第15-16页
 第二章 法呢基焦磷酸合酶概述第16-22页
   ·类异戊二烯的生物合成途径第16-17页
     ·MVA途径第17页
     ·MEP途径第17页
   ·法呢基焦磷酸合成酶第17-22页
     ·法呢基焦磷酸合成酶基因克隆和酶的表征第18页
     ·法呢基焦磷酸合成酶基因定位第18-19页
     ·法呢基焦磷酸合成酶基因差异表达和调节第19-20页
     ·法呢基焦磷酸合成酶结构分析第20-21页
     ·法呢基焦磷酸合成酶进化第21-22页
第二篇 研究内容第22-60页
 第一章 菌株的培养与鉴别第22-27页
   ·实验材料第22页
     ·菌株第22页
     ·主要试剂第22页
     ·主要仪器第22页
   ·实验方法第22-24页
     ·菌种活化与保藏第22-23页
     ·菌丝液体培养第23页
     ·总DNA提取第23页
     ·菌株分子鉴别第23页
     ·扩增片段的回收与克隆第23-24页
   ·结果与分析第24-25页
     ·菌株MJAU IO925形态鉴定第24页
     ·菌株MJAU IO925分子学鉴定第24-25页
   ·讨论第25-27页
 第二章 法呢基焦磷酸合酶基因特异片段及两端序列第27-33页
   ·实验材料第27页
     ·菌株第27页
     ·主要试剂第27页
     ·主要仪器第27页
   ·实验方法第27-30页
     ·总DNA的提取第27页
     ·总RNA的提取第27-28页
     ·第一条cDNA反转录反应第28页
     ·简并引物设计第28页
     ·桦褐孔菌法呢基焦磷酸合酶基因特异片段第28-29页
     ·桦褐孔菌法呢基焦磷酸合酶 5’端序列第29-30页
     ·桦褐孔菌法呢基焦磷酸合酶 3’端序列第30页
   ·结果与分析第30-32页
     ·特异片段第30-31页
     ·桦褐孔菌法呢基焦磷酸合酶 5’端序列第31页
     ·桦褐孔菌法呢基焦磷酸合酶 3’端序列第31-32页
   ·讨论第32-33页
 第三章 法呢基焦磷酸合酶基因DNA(cDNA)全长及序列分析第33-39页
   ·实验材料第33页
     ·菌株第33页
     ·主要试剂第33页
     ·主要仪器第33页
   ·实验方法第33-34页
     ·总DNA的提取第33页
     ·总RNA的提取第33页
     ·第一条cDNA反转录反应第33页
     ·桦褐孔菌法呢基焦磷酸合酶DNA和cDNA全长的获得第33-34页
     ·法呢基焦磷酸合酶基因的生物信息学分析第34页
   ·结果与分析第34-37页
     ·桦褐孔菌法呢基焦磷酸合酶cDNA全长第34-35页
     ·桦褐孔菌法呢基焦磷酸合酶DNA全长第35页
     ·桦褐孔菌法呢基焦磷酸合酶基因序列分析和系统进化树构建第35-37页
   ·讨论第37-39页
 第四章 法呢基焦磷酸合酶基因功能检测第39-46页
   ·实验材料第39页
     ·菌株第39页
     ·主要试剂第39页
     ·主要仪器第39页
   ·实验方法第39-43页
     ·总RNA的提取第40页
     ·第一条cDNA反转录反应第40页
     ·酵母表达载体的构建第40-41页
     ·酵母感受态细胞的制备和质粒转化第41-42页
     ·阳性转化子的鉴定第42页
     ·法呢基焦磷酸合酶酶活的检测第42-43页
   ·结果与分析第43-45页
     ·法呢基焦磷酸合酶基因导入酵母进行表达第43-44页
     ·法呢基焦磷酸合酶酶活的检测第44-45页
   ·讨论第45-46页
 第五章 不同诱导剂对桦褐孔菌生长影响第46-53页
   ·实验材料第46页
     ·菌株第46页
     ·主要试剂第46页
     ·主要仪器第46页
   ·实验方法第46-48页
     ·诱导剂制备第46-47页
     ·种子发酵液制备第47页
     ·诱导剂诱导桦褐孔菌生长第47页
     ·生物量的分析第47页
     ·总三萜含量的测定第47-48页
   ·结果与分析第48-52页
     ·桦树皮对生物量和三萜物质积累的诱导影响第48-49页
     ·根际土对生物量和三萜物质积累的诱导影响第49-50页
     ·茉莉酸甲酯对生物量和三萜物质积累的诱导影响第50页
     ·木麻黄弗兰克氏菌对生物量和三萜物质积累的诱导影响第50-51页
     ·根瘤菌对生物量和三萜物质积累的诱导影响第51-52页
   ·讨论第52-53页
 第六章 RT-PCR检测法呢基焦磷酸合酶的表达特性第53-60页
   ·实验材料第53页
     ·菌株第53页
     ·主要试剂第53页
     ·主要仪器第53页
   ·实验方法第53-55页
     ·总RNA的提取第53页
     ·第一条cDNA的获得第53页
     ·RT-PCR引物设计及验证第53-54页
     ·实时定量RT-PCR第54-55页
   ·实验结果第55-58页
     ·桦树皮对法呢基焦磷酸合酶的表达量分析第55-56页
     ·桦树根际土对法呢基焦磷酸合酶的表达量分析第56页
     ·茉莉酸甲酯对法呢基焦磷酸合酶的表达量分析第56-57页
     ·木麻黄弗兰克氏菌对法呢基焦磷酸合酶的表达量分析第57-58页
     ·根瘤菌对法呢基焦磷酸合酶的表达量分析第58页
   ·讨论第58-60页
结论第60-63页
参考文献第63-68页
附录第68-74页
作者简介第74-76页
致谢第76页

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