摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
前言 | 第11-12页 |
第一篇 文献综述 | 第12-22页 |
第一章 桦褐孔菌概述 | 第12-16页 |
·桦褐孔菌的分类及形态学概述 | 第12页 |
·桦褐孔菌的化学成分 | 第12-14页 |
·桦褐孔菌的药用价值 | 第14-16页 |
·抗肿瘤 | 第14页 |
·降血糖 | 第14页 |
·改善心血管系统 | 第14页 |
·抗病毒 | 第14页 |
·增强免疫和抗氧化 | 第14-15页 |
·诱导肿瘤细胞凋亡 | 第15页 |
·抗炎止痛 | 第15-16页 |
第二章 法呢基焦磷酸合酶概述 | 第16-22页 |
·类异戊二烯的生物合成途径 | 第16-17页 |
·MVA途径 | 第17页 |
·MEP途径 | 第17页 |
·法呢基焦磷酸合成酶 | 第17-22页 |
·法呢基焦磷酸合成酶基因克隆和酶的表征 | 第18页 |
·法呢基焦磷酸合成酶基因定位 | 第18-19页 |
·法呢基焦磷酸合成酶基因差异表达和调节 | 第19-20页 |
·法呢基焦磷酸合成酶结构分析 | 第20-21页 |
·法呢基焦磷酸合成酶进化 | 第21-22页 |
第二篇 研究内容 | 第22-60页 |
第一章 菌株的培养与鉴别 | 第22-27页 |
·实验材料 | 第22页 |
·菌株 | 第22页 |
·主要试剂 | 第22页 |
·主要仪器 | 第22页 |
·实验方法 | 第22-24页 |
·菌种活化与保藏 | 第22-23页 |
·菌丝液体培养 | 第23页 |
·总DNA提取 | 第23页 |
·菌株分子鉴别 | 第23页 |
·扩增片段的回收与克隆 | 第23-24页 |
·结果与分析 | 第24-25页 |
·菌株MJAU IO925形态鉴定 | 第24页 |
·菌株MJAU IO925分子学鉴定 | 第24-25页 |
·讨论 | 第25-27页 |
第二章 法呢基焦磷酸合酶基因特异片段及两端序列 | 第27-33页 |
·实验材料 | 第27页 |
·菌株 | 第27页 |
·主要试剂 | 第27页 |
·主要仪器 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-30页 |
·总DNA的提取 | 第27页 |
·总RNA的提取 | 第27-28页 |
·第一条cDNA反转录反应 | 第28页 |
·简并引物设计 | 第28页 |
·桦褐孔菌法呢基焦磷酸合酶基因特异片段 | 第28-29页 |
·桦褐孔菌法呢基焦磷酸合酶 5’端序列 | 第29-30页 |
·桦褐孔菌法呢基焦磷酸合酶 3’端序列 | 第30页 |
·结果与分析 | 第30-32页 |
·特异片段 | 第30-31页 |
·桦褐孔菌法呢基焦磷酸合酶 5’端序列 | 第31页 |
·桦褐孔菌法呢基焦磷酸合酶 3’端序列 | 第31-32页 |
·讨论 | 第32-33页 |
第三章 法呢基焦磷酸合酶基因DNA(cDNA)全长及序列分析 | 第33-39页 |
·实验材料 | 第33页 |
·菌株 | 第33页 |
·主要试剂 | 第33页 |
·主要仪器 | 第33页 |
·实验方法 | 第33-34页 |
·总DNA的提取 | 第33页 |
·总RNA的提取 | 第33页 |
·第一条cDNA反转录反应 | 第33页 |
·桦褐孔菌法呢基焦磷酸合酶DNA和cDNA全长的获得 | 第33-34页 |
·法呢基焦磷酸合酶基因的生物信息学分析 | 第34页 |
·结果与分析 | 第34-37页 |
·桦褐孔菌法呢基焦磷酸合酶cDNA全长 | 第34-35页 |
·桦褐孔菌法呢基焦磷酸合酶DNA全长 | 第35页 |
·桦褐孔菌法呢基焦磷酸合酶基因序列分析和系统进化树构建 | 第35-37页 |
·讨论 | 第37-39页 |
第四章 法呢基焦磷酸合酶基因功能检测 | 第39-46页 |
·实验材料 | 第39页 |
·菌株 | 第39页 |
·主要试剂 | 第39页 |
·主要仪器 | 第39页 |
·实验方法 | 第39-43页 |
·总RNA的提取 | 第40页 |
·第一条cDNA反转录反应 | 第40页 |
·酵母表达载体的构建 | 第40-41页 |
·酵母感受态细胞的制备和质粒转化 | 第41-42页 |
·阳性转化子的鉴定 | 第42页 |
·法呢基焦磷酸合酶酶活的检测 | 第42-43页 |
·结果与分析 | 第43-45页 |
·法呢基焦磷酸合酶基因导入酵母进行表达 | 第43-44页 |
·法呢基焦磷酸合酶酶活的检测 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45-46页 |
第五章 不同诱导剂对桦褐孔菌生长影响 | 第46-53页 |
·实验材料 | 第46页 |
·菌株 | 第46页 |
·主要试剂 | 第46页 |
·主要仪器 | 第46页 |
·实验方法 | 第46-48页 |
·诱导剂制备 | 第46-47页 |
·种子发酵液制备 | 第47页 |
·诱导剂诱导桦褐孔菌生长 | 第47页 |
·生物量的分析 | 第47页 |
·总三萜含量的测定 | 第47-48页 |
·结果与分析 | 第48-52页 |
·桦树皮对生物量和三萜物质积累的诱导影响 | 第48-49页 |
·根际土对生物量和三萜物质积累的诱导影响 | 第49-50页 |
·茉莉酸甲酯对生物量和三萜物质积累的诱导影响 | 第50页 |
·木麻黄弗兰克氏菌对生物量和三萜物质积累的诱导影响 | 第50-51页 |
·根瘤菌对生物量和三萜物质积累的诱导影响 | 第51-52页 |
·讨论 | 第52-53页 |
第六章 RT-PCR检测法呢基焦磷酸合酶的表达特性 | 第53-60页 |
·实验材料 | 第53页 |
·菌株 | 第53页 |
·主要试剂 | 第53页 |
·主要仪器 | 第53页 |
·实验方法 | 第53-55页 |
·总RNA的提取 | 第53页 |
·第一条cDNA的获得 | 第53页 |
·RT-PCR引物设计及验证 | 第53-54页 |
·实时定量RT-PCR | 第54-55页 |
·实验结果 | 第55-58页 |
·桦树皮对法呢基焦磷酸合酶的表达量分析 | 第55-56页 |
·桦树根际土对法呢基焦磷酸合酶的表达量分析 | 第56页 |
·茉莉酸甲酯对法呢基焦磷酸合酶的表达量分析 | 第56-57页 |
·木麻黄弗兰克氏菌对法呢基焦磷酸合酶的表达量分析 | 第57-58页 |
·根瘤菌对法呢基焦磷酸合酶的表达量分析 | 第58页 |
·讨论 | 第58-60页 |
结论 | 第60-63页 |
参考文献 | 第63-68页 |
附录 | 第68-74页 |
作者简介 | 第74-76页 |
致谢 | 第76页 |