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中间锦鸡儿3个非生物胁迫相关转录因子的克隆与功能分析

摘要第1-4页
Abstract第4-13页
1 引言第13-32页
   ·植物响应非生物胁迫的机理第13-23页
     ·植物对非生物胁迫的感知过程第14-18页
       ·Ca~(2+)在感知非生物胁迫中的作用第14-15页
       ·磷脂信号系统在感知非生物胁迫中的作用第15-16页
       ·ROS在感知非生物胁迫中的作用第16-17页
       ·MAPK在感知非生物胁迫中的作用第17-18页
     ·非生物胁迫中的转录调控网第18-19页
     ·非生物胁迫中的功能基因与功能分子第19-23页
       ·分子伴侣类蛋白第19-20页
       ·可溶性物质调节渗透平衡第20-22页
       ·抗氧化类酶和小分子第22页
       ·离子通道和转运蛋白第22-23页
   ·NAC转录因子第23-26页
     ·NAC转录因子的结构与分类第23页
     ·NAC转录因子的功能第23-26页
   ·MYB转录因子第26-28页
     ·MYB转录因子的结构与分类第26页
     ·MYB转录因子的功能第26-28页
   ·昼夜节律调控机制第28-30页
   ·中间锦鸡儿第30-31页
   ·研究目的与意义第31页
   ·技术路线第31-32页
2 实验材料和方法第32-48页
   ·实验材料第32页
     ·植物材料第32页
     ·菌株第32页
     ·质粒第32页
   ·实验药品及仪器第32-35页
     ·实验试剂及酶第32-33页
     ·试剂盒第33页
     ·实验药品第33页
     ·培养基和实验所需其它试剂的配制第33-35页
     ·实验仪器第35页
   ·实验方法第35-48页
     ·植物材料处理方法第35-36页
     ·DNA提取第36页
     ·RNA提取与反转录第36-39页
     ·荧光定量PCR第39页
     ·质粒提取与PCR产物胶回收第39页
     ·目的片段与克隆载体及表达载体的连接第39-41页
     ·大肠杆菌感受态制备与转化第41页
     ·c DNA末端快速扩增 (RACE)第41页
     ·基因全长克隆及分析第41-43页
     ·启动子克隆及分析第43页
     ·表达载体构建第43-44页
     ·原生质体制备及转化第44-45页
     ·农杆菌感受态制备与转化第45-46页
     ·拟南芥浸花法转化与纯合体筛选第46页
     ·GUS组织化学染色第46-47页
     ·GFP亚细胞定位观察第47-48页
3 结果与分析第48-78页
   ·CiNAC3和CiNAC4基因全长的克隆第48-51页
   ·CiNAC3和CiNAC4的序列分析第51-52页
     ·CiNAC3和CiNAC4的蛋白序列比对第51-52页
     ·CiNAC3和CiNAC4蛋白序列进化树的构建第52页
   ·CiNAC3和CiNAC4的表达模式第52-55页
   ·CiNAC3和CiNAC4的亚细胞定位观察第55-57页
     ·CiNAC3和CiNAC4的GFP融合载体的构建第55-56页
     ·CiNAC3和CiNAC4在原生质体中的亚细胞定位观察第56页
     ·CiNAC3和CiNAC4在稳定表达株系中的亚细胞定位观察第56-57页
   ·CiNAC4的启动子克隆与GUS组织化学染色第57-61页
     ·CiNAC4的启动子克隆及顺式作用元件分析第57-59页
     ·CiNAC4启动子驱动GUS报告基因表达载体构建第59页
     ·ProCiNAC4:GUS组织化学染色第59-61页
   ·过表达CiNAC3和CiNAC4转基因拟南芥株系获得第61-63页
     ·过表达CiNAC3和CiNAC4表达载体构建与鉴定第61-62页
     ·过表达CiNAC3和CiNAC4转基因株系获得与鉴定第62-63页
   ·过表达CiNAC3和CiNAC4拟南芥对ABA的响应第63-66页
     ·过表达CiNAC3和CiNAC4降低拟南芥对ABA的敏感性第63-65页
     ·过表达CiNAC3和CiNAC4对ABA合成及信号通路基因的影响第65-66页
   ·过表达CiNAC3和CiNAC4增强了拟南芥对Na Cl的耐受性第66-68页
   ·过表达CiNAC4促进拟南芥侧根形成第68-70页
   ·CiMYB177的全长克隆及序列分析第70-71页
     ·CiMYB177的全长克隆第70页
     ·Ci MYB177的序列分析第70-71页
   ·CiMYB177的表达模式第71-73页
   ·CiMYB177的表达受昼夜节律调控第73-74页
   ·CiMYB177的亚细胞定位观察第74-75页
     ·CiMYB177的GFP融合载体的构建与鉴定第74页
     ·Ci MYB177的亚细胞定位观察第74-75页
   ·CiMYB177的启动子克隆与分析第75-78页
     ·CiMYB177的启动子克隆第75-76页
     ·CiMYB177启动子的顺式作用元件分析第76-78页
4 讨论第78-84页
   ·通过对CiNAC3和CiNAC4序列的分析预测其功能第78-79页
   ·CiNAC3和CiNAC4的表达模式第79-80页
   ·CiNAC4的启动子分析与GUS组织化学染色第80-81页
   ·CiNAC3和CiNAC4与ABA的关系第81页
   ·NAC转录因子与生长素第81-82页
   ·CiNAC3和CiNAC4增强拟南芥对Na Cl的耐受性第82页
   ·CiNAC3和CiNAC4的作用方式存在剂量效应第82页
   ·CiNAC3和CiNAC4在功能上的相同与差异之处第82-83页
   ·CiMYB177的序列分析及其功能推测第83页
   ·非生物胁迫与昼夜节律第83-84页
5 结论第84-85页
致谢第85-86页
附表第86-89页
参考文献第89-111页
作者简介第111页

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