| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 主要符号对照表 | 第11-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-24页 |
| ·研究的目的和意义 | 第13-15页 |
| ·研究的科学意义 | 第13-14页 |
| ·研究对社会、经济、产业及学科发展的意义 | 第14-15页 |
| ·β-C的结构和性质 | 第15-16页 |
| ·β-C在动物体内的营养作用 | 第16-18页 |
| ·β-C在动物体内吸收、代谢、转运和沉积 | 第18-21页 |
| ·β-C在动物体内的吸收与代谢 | 第18-19页 |
| ·β-C在血浆中的转运 | 第19页 |
| ·β-C在动物体内的沉积 | 第19-20页 |
| ·动物黄色脂肪形成的原因 | 第20-21页 |
| ·BCMO1的研究现状 | 第21-23页 |
| ·BCMO1的代谢机制 | 第21-22页 |
| ·BCMO1在动物组织的表达 | 第22-23页 |
| ·本研究的主要内容及创新 | 第23-24页 |
| 第二章 材料与方法 | 第24-37页 |
| ·试验材料及处理 | 第24页 |
| ·试验试剂及仪器 | 第24-25页 |
| ·主要的生化试剂 | 第24-25页 |
| ·主要的仪器设备 | 第25页 |
| ·试验方法及内容 | 第25-36页 |
| ·牦牛脂肪中 β-C提取方法的优化 | 第25-26页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第25页 |
| ·脂肪中 β-C的萃取 | 第25-26页 |
| ·试验设计及数据处理 | 第26页 |
| ·不同营养时期牦牛组织和血液及消化肠内容物中 β-C和VA含量的测定 | 第26-27页 |
| ·色谱条件 | 第26-27页 |
| ·标准储备液的配置 | 第27页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第27页 |
| ·样品的处理 | 第27页 |
| ·不同营养时期牦牛各组织中 β-C降解酶活性的测定 | 第27-29页 |
| ·制备粗酶液 | 第27-28页 |
| ·粗蛋白测定 | 第28页 |
| ·酶活性测定 | 第28-29页 |
| ·实时荧光定量PCR检测不同营养时期牦牛组织中BCMO1 m RNA的表达 | 第29-30页 |
| ·引物设计及合成 | 第29页 |
| ·总RNA的提取及反转录 | 第29-30页 |
| ·常规PCR及产物回收 | 第30页 |
| ·荧光定量PCR | 第30页 |
| ·蛋白质纯化 | 第30-33页 |
| ·目的基因序列及基因合成 | 第30-31页 |
| ·酶切 | 第31页 |
| ·连接转化 | 第31-32页 |
| ·小量表达 | 第32页 |
| ·大量表达 | 第32页 |
| ·蛋白质纯化 | 第32-33页 |
| ·BCMO1单克隆抗体制备 | 第33-34页 |
| ·动物免疫及阳性取血 | 第33页 |
| ·细胞融合 | 第33-34页 |
| ·酶联免疫吸附试验（ELISA）测定抗体效价 | 第34页 |
| ·western blot检测不同时期牦牛各组织BCMO1蛋白表达 | 第34-36页 |
| ·总蛋白质的提取及浓度的测定 | 第34页 |
| ·蛋白电泳 | 第34-35页 |
| ·转膜及封闭 | 第35页 |
| ·洗膜及杂交 | 第35-36页 |
| ·化学发光及曝光 | 第36页 |
| ·数据处理 | 第36-37页 |
| 第三章 试验结果 | 第37-66页 |
| ·牦牛脂肪中 β-C提取方法的优化结果 | 第37-40页 |
| ·单因素试验结果 | 第37-38页 |
| ·碱液浓度对萃取 β-C的影响 | 第37页 |
| ·皂化温度对萃取 β-C的影响 | 第37-38页 |
| ·皂化时间对萃取 β-C的影响 | 第38页 |
| ·正交试验结果 | 第38-40页 |
| ·不同营养时期牦牛组织和血液中 β-C和VA含量的测定结果 | 第40-51页 |
| ·最佳检测波长的选择 | 第40页 |
| ·标准品色谱图及标准曲线的线性范围 | 第40-41页 |
| ·营养丰盛期牦牛体内 β-C和VA含量测定结果 | 第41-45页 |
| ·营养丰盛期牦牛不同组织中 β-C和VA含量测定的典型色谱图 | 第41-44页 |
| ·β-C和VA含量测定结果 | 第44-45页 |
| ·营养匮乏期牦牛体内 β-C和VA含量测定结果 | 第45-50页 |
| ·营养匮乏期牦牛不同组织中 β-C和VA含量测定的典型色谱图 | 第45-49页 |
| ·β-C和VA含量测定结果 | 第49-50页 |
| ·不同营养期牦牛体内 β-C和VA含量的差异分析 | 第50-51页 |
| ·不同营养时期牦牛各组织中 β-C降解酶活性的测定 | 第51-54页 |
| ·蛋白标准曲线和 β-C标准曲线 | 第51-52页 |
| ·牦牛不同营养时期各组织降解酶酶活性的比较 | 第52-54页 |
| ·实时荧光定量PCR检测不同营养时期牦牛组织中BCMO1m RNA的表达 | 第54-60页 |
| ·总RNA的检测 | 第54-55页 |
| ·BCMO1及 βactin基因PCR产物的电泳检测 | 第55页 |
| ·相对定量的扩增效率及溶解曲线 | 第55-57页 |
| ·营养匮乏期高原牦牛不同组织内BCMO1m RNA的相对表达量 | 第57-58页 |
| ·营养丰盛期高原牦牛不同组织内BCMO1m RNA的相对表达量 | 第58-59页 |
| ·不同营养时期牦牛组织中BCMO1基因相对表达量差异分析 | 第59-60页 |
| ·抗体制备及效价检测 | 第60-61页 |
| ·蛋白质表达纯化 | 第60-61页 |
| ·Elisa检测抗体效价 | 第61页 |
| ·Western blot检测牦牛组织中BCMO1蛋白质表达 | 第61-66页 |
| ·营养匮乏期BCMO1蛋白相对表达差异 | 第61-62页 |
| ·营养丰盛期BCMO1蛋白相对表达差异 | 第62-64页 |
| ·不同营养时期BCMO1蛋白相对表达差异分析 | 第64-66页 |
| 第四章 讨论 | 第66-71页 |
| ·牦牛脂肪中 β-C提取方法的优化 | 第66-67页 |
| ·不同营养时期牦牛组织器官和血液中 β-C和VA含量的测定 | 第67页 |
| ·不同营养时期牦牛各组织中 β-C降解酶活性的测定 | 第67-68页 |
| ·实时PCR检测不同营养时期牦牛组织中BCMO1m RNA的表达 | 第68-70页 |
| ·western blot检测牦牛组织中BCMO1蛋白质表达 | 第70-71页 |
| 第五章 结论及展望 | 第71-72页 |
| ·主要研究结论 | 第71页 |
| ·展望 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 作者简历 | 第81页 |
