摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-21页 |
1 热激转录因子的研究现状 | 第12-15页 |
·Hsf的起源 | 第13页 |
·Hsf的基本结构 | 第13页 |
·Hsf的分类 | 第13页 |
·植物Hsf的功能 | 第13-14页 |
·植物Hsf的调控机制 | 第14-15页 |
2 热激蛋白的研究现状 | 第15-18页 |
·Hsp的发现 | 第15页 |
·Hsp的特点 | 第15-16页 |
·Hsp的功能 | 第16-17页 |
·Hsp基因的表达调控 | 第17-18页 |
3 植物雄性不育与Hsp | 第18-19页 |
·植物雄性不育的发现 | 第18页 |
·热激蛋白作用于植物雄性不育 | 第18-19页 |
4 本研究的目的及意义 | 第19-21页 |
第二章 热激转录基因HsfcDNA的克隆及定量表达 | 第21-33页 |
1 材料 | 第21-22页 |
·供试植株 | 第21页 |
·菌株 | 第21页 |
·主要试剂、培养基 | 第21页 |
·酶与试剂盒 | 第21页 |
·引物 | 第21-22页 |
2 方法 | 第22-28页 |
·辣椒栽培 | 第22页 |
·辣椒RNA提取 | 第22页 |
·辣椒RNA反转录 | 第22-23页 |
·辣椒Hsf基因的克隆 | 第23-26页 |
·重叠PCR扩增Hsf基因 | 第26-28页 |
·荧光定量RT-PCR检测Hsf基因 | 第28页 |
3 结果与分析 | 第28-33页 |
·辣椒Hsf基因分析 | 第28-29页 |
·蛋白质预测及分析 | 第29-30页 |
·Hsf蛋白质同源性分析 | 第30-31页 |
·Hsf基因在辣椒不同组织中的表达分析 | 第31-32页 |
·小结与讨论 | 第32-33页 |
第三章 Hsf过表达及反义抑制表达载体构建 | 第33-37页 |
1 材料与试剂 | 第33页 |
·菌株与质粒 | 第33页 |
·酶与试剂盒 | 第33页 |
·试剂 | 第33页 |
·引物 | 第33页 |
2 实验方法 | 第33-36页 |
·Hsf基因的扩增 | 第33-34页 |
·pWM101载体、对基因和anti-Hsf基因分别进行双酶切 | 第34-35页 |
·目的基因Hsf和anti-Hsf与载体pWM101的连接 | 第35页 |
·菌落PCR鉴定及质粒酶切检测 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-37页 |
·菌落PCR和酶切检测结果 | 第36-37页 |
第四章 烟草的遗传转化及转化子性状分析 | 第37-46页 |
1 材料和试剂 | 第37页 |
·菌种和质粒 | 第37页 |
·植物材料 | 第37页 |
·试剂 | 第37页 |
·培养基 | 第37页 |
2 实验方法 | 第37-39页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第37-38页 |
·植物表达载体转化根瘤农杆菌 | 第38页 |
·农杆菌的菌落PCR检测 | 第38页 |
·烟草的转化以及抗性苗的筛选 | 第38-39页 |
·抗性苗的PCR和RT-PCR检测及移栽 | 第39页 |
·转基因烟草种子的筛选 | 第39页 |
3 结果与分析 | 第39-44页 |
·转基因植株的分子检测 | 第39-40页 |
·转基因植株的观察 | 第40-42页 |
·转基因植株花粉活力的观察和统计 | 第42-43页 |
·转基因植株抗热性的观察和统计 | 第43-44页 |
4 讨论 | 第44-46页 |
第五章 结果与结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
附录1:主要试剂配置 | 第55-57页 |
作者简介 | 第57页 |