| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-14页 |
| ·转氨酶的功能及研究进展 | 第8页 |
| ·L-赖氨酸二氨基庚二酸盐转移酶基因 LL-DAP-AT 的功能及研究进展 | 第8-10页 |
| ·赖氨酸（Lys）对玉米营养价值的影响 | 第10页 |
| ·植物基因克隆研究进展 | 第10-12页 |
| ·植物基因功能研究进展 | 第12-14页 |
| ·生物信息学方法 | 第13页 |
| ·实验分析方法 | 第13-14页 |
| 第二章 引言 | 第14-15页 |
| 第三章 Zmll‐dap‐at 基因的克隆及表达分析 | 第15-30页 |
| ·材料与方法 | 第15-20页 |
| ·田间种植材料和取样方法 | 第15页 |
| ·EST 种子序列的来源及功能 | 第15页 |
| ·目的基因的全长 cDNA 克隆方法 | 第15-18页 |
| ·目标 EST 的全长 cDNA 电子克隆方法 | 第15页 |
| ·引物设计和 PCR 扩增 | 第15-16页 |
| ·PCR 产物纯化和连接 | 第16页 |
| ·转化(TA 克隆) | 第16-17页 |
| ·阳性克隆的挑选与检测 | 第17-18页 |
| ·重组质粒的提取和鉴定 | 第18页 |
| ·目的基因 DNA 序列的测定和分析方法 | 第18页 |
| ·目的基因功能的生物信息学分析方法 | 第18页 |
| ·目的基因的表达分析方法 | 第18-20页 |
| ·试剂与仪器 | 第18页 |
| ·总 RNA 的提取与纯化和 cDNA 第一链的合成 | 第18-20页 |
| ·荧光定量 PCR 引物的设计 | 第20页 |
| ·结果与分析 | 第20-30页 |
| ·Zmll-dap-at 基因的全长 cDNA 序列克隆与分析 | 第20-21页 |
| ·目标 EST 的电子延伸及全长 cDNA 序列克隆 | 第20-21页 |
| ·Zmll-dap-at 基因编码的蛋白结构域和理化性质分析 | 第21-22页 |
| ·Zmll-dap-at 编码蛋白的结构域分析 | 第21-22页 |
| ·Zmll-dap-at 编码蛋白的理化性质分析 | 第22页 |
| ·Zmll-dap-at 基因的磷酸化位点预测和跨膜结构分析 | 第22-24页 |
| ·Zmll-dap-at 基因的亚细胞定位预测和染色体初步定位 | 第24-25页 |
| ·蛋白质三级结构预测 | 第25-26页 |
| ·Zmll-dap-at 基因编码蛋白质的系统进化分析 | 第26-27页 |
| ·Zmll-dap-at 基因的荧光定量表达分析 | 第27-30页 |
| 第四章 Pet28a‐Zmll‐dap‐at 重组蛋白的原核表达 | 第30-34页 |
| ·材料 | 第30页 |
| ·试剂 | 第30页 |
| ·主要试剂的配制 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-32页 |
| ·Zmll-dap-at 蛋白原核表达载体的构建 | 第30-31页 |
| ·诱导 Zmll-dap-at 的原核表达 | 第31页 |
| ·SDS-PAGE 的检测 | 第31-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-34页 |
| ·PCR 扩增目的基因 | 第32页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第33-34页 |
| 第五章 不同赖氨酸含量玉米自交系 Zmll‐dap‐at 基因组序列克隆与分析 | 第34-38页 |
| ·材料与方法 | 第34-35页 |
| ·不同赖氨酸含量玉米自交系的挑选 | 第34页 |
| ·不同玉米自交系 Zmll-dap-at 基因组序列引物设计 | 第34-35页 |
| ·不同玉米自交系 Zmll-dap-at 基因组序列的 PCR 扩增和测序 | 第35页 |
| ·不同自交系 Zmll-dap-at 基因组测序结果的比对方法 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-38页 |
| ·15 个玉米自交系 Zmll-dap-at 基因组序列启动子区域的比较与分析 | 第35-36页 |
| ·不同玉米自交系赖氨酸含量与序列差异的相关性分析 | 第36-38页 |
| 第六章 讨论 | 第38-42页 |
| ·电子克隆中常见的问题及策略 | 第38-39页 |
| ·重组蛋白在原核表达中常见问题及对策 | 第39-40页 |
| ·Zmll-dap-at 基因在玉米籽粒胚乳发育及赖氨酸合成和积累中的作用 | 第40-41页 |
| ·Zmll-dap-at 基因功能的进一步研究与应用 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-49页 |
| ABSTRACT | 第49-50页 |
